胃镜下喷洒尿素酶试剂检测幽门螺旋杆菌
陈少夫,吴波,李岩,中国医科大学第二临床学院消化内科，辽宁沈阳市110004
项目负责人 陈少夫 110004沈阳市和平区三好街36号,中国医科大学第二临床学院消化内科. csf196211@yahoo.com.cn
电话：024-23893501
收稿日期 2002-05-02 接收日期 2002-06-12
摘要
目的：将尿素酶试剂直接于胃镜下喷洒观察胃黏膜的颜色变化，以期明确Hp分布范围并减少了取材的盲目性，拟在Hp分布的范围内取活组织进一步做病理切片Giemsa染色以检测Hp.
, 百拇医药 方法：选择慢性浅表性胃炎患者47例.实验组，将尿素酶试剂喷洒于胃窦部，变红色的区域为Hp分布区，在此红色部位取活检组织1块.胃黏膜未变红者提示Hp尿素酶试验阴性，于胃窦取活组织1块.对照组，不喷洒尿素酶试剂，于胃窦取活组织1块.上述活组织均用Giemsa染色检测Hp，分别计算两组的Hp阳性率.
结果：胃内尿素酶试剂喷洒后阳性者的组织切片Hp检出率为75%，明显高于对照组的检出率25%，P <0.05.胃内尿素酶试剂喷洒后阴性者的组织切片Hp检出率为20%，与对照组的检出率25%相比无显著差异，P >0.05.提示胃内喷洒尿素酶试剂可提高组织切片Hp的检出率.
结论：此方法可以明确Hp分布范围并提高了活组织病理检测Hp的阳性率，减少了活组织取材检测Hp的盲目性.
陈少夫, 吴波, 李岩. 胃镜下喷洒尿素酶试剂检测幽门螺旋杆菌. 世界华人消化杂志 2002;10(8):983-984
, 百拇医药
0 引言幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)在消化性溃疡，慢性胃炎，胃癌，胃淋巴瘤中的致病作用已被肯定[1]，Hp可以产生尿素酶，分解胃液中的尿素，产生氨和二氧化碳，使局部的pH值升高，中和胃酸便于细菌定植胃和有胃上皮化生的十二指肠黏膜，损伤胃黏膜而致病.根据这一发现，Marshalletal设计了快速尿素酶试验用于胃镜检查中诊断Hp感染[2].试验试剂含有尿素，pH指示剂(酚红),缓冲剂.在酸性pH值条件下(<6.8)，酚红呈黄褐色，活检组织中Hp菌尿素酶分解试剂中的尿素后产氨，使试剂的pH值变为碱性(>8.4)，酚红由黄色变为紫红色，此结果为阳性.但由于Hp在胃内感染灶分布不均，故可因活检取材部位而影响结果.本研究应用胃内喷洒法，即将尿素酶试剂直接于胃镜下喷洒观察胃黏膜的颜色变化，以期明确Hp分布范围并减少了取材的盲目性，拟在Hp分布的范围内取活组织进一步做病理切片Giemsa染色以检测Hp.
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 材料 选择慢性浅表性胃炎患者47例，其中实验组27例，对照组20例.诊断标准符合中华医学会消化病学分会2000年全国慢性胃炎研讨会共识意见.
1.2 试剂 尿素酶试剂配方：尿素5-10g,酚红0.2g,磷酸氢二钠0.51g,磷酸二氢钠0.21g，加水450ml，调整pH值至6.0,定容至500ml，-20℃保存.
1.3方法 患者空腹，进行胃镜检查证实为慢性浅表性胃炎，将胃液抽净后，实验组，将尿素酶试剂20ml用灌洗管均匀喷洒于胃窦部观察15min，胃黏膜变成红色者提示Hp尿素酶试验阳性，红色的区域为Hp分布区，在此红色部位取活检组织1块，放入10%甲醛溶液中，送病理切片Giemsa染色检测Hp[3].胃黏膜未变红者提示Hp尿素酶试验阴性，于胃窦小弯距幽门4cm处取活组织1块，送病理切片Giemsa染色检测Hp.对照组，不喷洒尿素酶试剂，于胃窦小弯侧距幽门部4cm处取活组织1块，送病理切片，同样条件下做Giemsa染色，检测Hp，分别计算两组的Hp阳性率.
, 百拇医药
统计学处理 应用x2 检验两组的显著性差异.
2 结果应用尿素酶试剂胃内喷洒后阳性者为12例，其中组织切片Giemsa染色的Hp阳性为9例，阳性率为75%.应用尿素酶试剂胃内喷洒后阴性者为15例，其中组织切片Giemsa染色的Hp阳性者为3例，阳性率为20%.而对照组不用尿素酶试剂组织切片Giemsa染色的Hp阳性者为5例，阳性率为25%.胃内尿素酶试剂喷洒后阳性者的组织切片Hp检出率为75%，明显高于对照组的检出率，P <0.05.胃内尿素酶试剂喷洒后阴性者的组织切片Hp检出率为20%，与对照组相比无显著差异，P >0.05.提示胃内喷洒尿素酶试剂可提高组织切片Hp的检出率.
3 讨论检测胃黏膜组织中Hp的方法包括快速尿素酶法，活组织病理染色，细菌分离培养，基因诊断，13C呼气试验[4]，血清学检查.其中细菌分离培养和基因诊断技术条件要求高，费用昂贵，不易用于临床常规检查，仅适用于科研[5].血清学检查不能用作Hp感染和根除的诊断依据，仅用于流行病学调查[6].目前快速尿素酶法，活组织病理染色和13C呼气试验是临床常用而可靠的方法[7-9]，本研究将快速尿素酶法和活组织病理染色法相结合，并将尿素酶试剂喷洒于胃窦黏膜观察黏膜颜色变化，结果表明，此方法可以明确Hp分布范围并提高了活组织病理染色法检测Hp的阳性率，减少了活组织取材检测Hp的盲目性.由于胃内环境仅适于Hp大量定植，胃液中其他产生尿素酶的过路菌菌量太少，尿素酶活性低，其改变喷入胃内的尿素酶试剂中pH值的能力被缓冲液所缓冲，故胃内过路菌不致使试剂变色出现假阳性结果.
, 百拇医药
4 参考文献1 汪荣泉,房殿春,刘为纹,罗文辉.幽门螺杆菌感染与胃癌和癌旁组织中MUC5AC基因表达.世界华人消化杂志1999; 7:546
2 Kamiya S, Taniguchi I,Yamamoto T,Shirai T,Harasawa S,Miwa T,Ozawa A. Evaluation of a fast urease test for detection
of Helicobacter pylori in gastric biopsy specimens. Eur J Epdemiol 1993;19:450-452
3 Cohen H, Laine L.Endoscopic methods for the diagnosis of Helicobacter pylori. Aliment Pharmacol Ther 1997;11:3-9
, http://www.100md.com
4 Chey WD,Chathadi KV,Montagme J, Ahmed F, Murthy U. Intragastric acdification reduces the occurrence of false-negative
urea breath test results in patients taking a proton pump inhibitor. AM J Gastroenterol 2001;96:1028-1032
5 彭孝纬.幽门螺杆菌特异的免疫反应与基因检测.世界华人消化杂志 2000;8:553?54
6 王小众,李丹.幽门螺杆菌的血清学诊断.世界华人消化杂志 2000;8:550?51
7 詹德法,徐克成. 14C-尿素呼气试验的临床应用价值及其影响因素.世界华人消化杂志 2000;8:558?59
8 王承党.幽门螺杆菌的细菌学诊断.世界华人消化杂志 2000;8:546?48
9 黄跃,许鲁宁.幽门螺杆菌尿素酶依赖性试验.世界华人消化杂志 2000;8:549?50, 百拇医药(陈少夫, 吴 波, 李 岩)
项目负责人 陈少夫 110004沈阳市和平区三好街36号,中国医科大学第二临床学院消化内科. csf196211@yahoo.com.cn
电话：024-23893501
收稿日期 2002-05-02 接收日期 2002-06-12
摘要
目的：将尿素酶试剂直接于胃镜下喷洒观察胃黏膜的颜色变化，以期明确Hp分布范围并减少了取材的盲目性，拟在Hp分布的范围内取活组织进一步做病理切片Giemsa染色以检测Hp.
, 百拇医药 方法：选择慢性浅表性胃炎患者47例.实验组，将尿素酶试剂喷洒于胃窦部，变红色的区域为Hp分布区，在此红色部位取活检组织1块.胃黏膜未变红者提示Hp尿素酶试验阴性，于胃窦取活组织1块.对照组，不喷洒尿素酶试剂，于胃窦取活组织1块.上述活组织均用Giemsa染色检测Hp，分别计算两组的Hp阳性率.
结果：胃内尿素酶试剂喷洒后阳性者的组织切片Hp检出率为75%，明显高于对照组的检出率25%，P <0.05.胃内尿素酶试剂喷洒后阴性者的组织切片Hp检出率为20%，与对照组的检出率25%相比无显著差异，P >0.05.提示胃内喷洒尿素酶试剂可提高组织切片Hp的检出率.
结论：此方法可以明确Hp分布范围并提高了活组织病理检测Hp的阳性率，减少了活组织取材检测Hp的盲目性.
陈少夫, 吴波, 李岩. 胃镜下喷洒尿素酶试剂检测幽门螺旋杆菌. 世界华人消化杂志 2002;10(8):983-984
, 百拇医药
0 引言幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)在消化性溃疡，慢性胃炎，胃癌，胃淋巴瘤中的致病作用已被肯定[1]，Hp可以产生尿素酶，分解胃液中的尿素，产生氨和二氧化碳，使局部的pH值升高，中和胃酸便于细菌定植胃和有胃上皮化生的十二指肠黏膜，损伤胃黏膜而致病.根据这一发现，Marshalletal设计了快速尿素酶试验用于胃镜检查中诊断Hp感染[2].试验试剂含有尿素，pH指示剂(酚红),缓冲剂.在酸性pH值条件下(<6.8)，酚红呈黄褐色，活检组织中Hp菌尿素酶分解试剂中的尿素后产氨，使试剂的pH值变为碱性(>8.4)，酚红由黄色变为紫红色，此结果为阳性.但由于Hp在胃内感染灶分布不均，故可因活检取材部位而影响结果.本研究应用胃内喷洒法，即将尿素酶试剂直接于胃镜下喷洒观察胃黏膜的颜色变化，以期明确Hp分布范围并减少了取材的盲目性，拟在Hp分布的范围内取活组织进一步做病理切片Giemsa染色以检测Hp.
1 材料和方法
, http://www.100md.com
1.1 材料 选择慢性浅表性胃炎患者47例，其中实验组27例，对照组20例.诊断标准符合中华医学会消化病学分会2000年全国慢性胃炎研讨会共识意见.
1.2 试剂 尿素酶试剂配方：尿素5-10g,酚红0.2g,磷酸氢二钠0.51g,磷酸二氢钠0.21g，加水450ml，调整pH值至6.0,定容至500ml，-20℃保存.
1.3方法 患者空腹，进行胃镜检查证实为慢性浅表性胃炎，将胃液抽净后，实验组，将尿素酶试剂20ml用灌洗管均匀喷洒于胃窦部观察15min，胃黏膜变成红色者提示Hp尿素酶试验阳性，红色的区域为Hp分布区，在此红色部位取活检组织1块，放入10%甲醛溶液中，送病理切片Giemsa染色检测Hp[3].胃黏膜未变红者提示Hp尿素酶试验阴性，于胃窦小弯距幽门4cm处取活组织1块，送病理切片Giemsa染色检测Hp.对照组，不喷洒尿素酶试剂，于胃窦小弯侧距幽门部4cm处取活组织1块，送病理切片，同样条件下做Giemsa染色，检测Hp，分别计算两组的Hp阳性率.
, 百拇医药
统计学处理 应用x2 检验两组的显著性差异.
2 结果应用尿素酶试剂胃内喷洒后阳性者为12例，其中组织切片Giemsa染色的Hp阳性为9例，阳性率为75%.应用尿素酶试剂胃内喷洒后阴性者为15例，其中组织切片Giemsa染色的Hp阳性者为3例，阳性率为20%.而对照组不用尿素酶试剂组织切片Giemsa染色的Hp阳性者为5例，阳性率为25%.胃内尿素酶试剂喷洒后阳性者的组织切片Hp检出率为75%，明显高于对照组的检出率，P <0.05.胃内尿素酶试剂喷洒后阴性者的组织切片Hp检出率为20%，与对照组相比无显著差异，P >0.05.提示胃内喷洒尿素酶试剂可提高组织切片Hp的检出率.
3 讨论检测胃黏膜组织中Hp的方法包括快速尿素酶法，活组织病理染色，细菌分离培养，基因诊断，13C呼气试验[4]，血清学检查.其中细菌分离培养和基因诊断技术条件要求高，费用昂贵，不易用于临床常规检查，仅适用于科研[5].血清学检查不能用作Hp感染和根除的诊断依据，仅用于流行病学调查[6].目前快速尿素酶法，活组织病理染色和13C呼气试验是临床常用而可靠的方法[7-9]，本研究将快速尿素酶法和活组织病理染色法相结合，并将尿素酶试剂喷洒于胃窦黏膜观察黏膜颜色变化，结果表明，此方法可以明确Hp分布范围并提高了活组织病理染色法检测Hp的阳性率，减少了活组织取材检测Hp的盲目性.由于胃内环境仅适于Hp大量定植，胃液中其他产生尿素酶的过路菌菌量太少，尿素酶活性低，其改变喷入胃内的尿素酶试剂中pH值的能力被缓冲液所缓冲，故胃内过路菌不致使试剂变色出现假阳性结果.
, 百拇医药
4 参考文献1 汪荣泉,房殿春,刘为纹,罗文辉.幽门螺杆菌感染与胃癌和癌旁组织中MUC5AC基因表达.世界华人消化杂志1999; 7:546
2 Kamiya S, Taniguchi I,Yamamoto T,Shirai T,Harasawa S,Miwa T,Ozawa A. Evaluation of a fast urease test for detection
of Helicobacter pylori in gastric biopsy specimens. Eur J Epdemiol 1993;19:450-452
3 Cohen H, Laine L.Endoscopic methods for the diagnosis of Helicobacter pylori. Aliment Pharmacol Ther 1997;11:3-9
, http://www.100md.com
4 Chey WD,Chathadi KV,Montagme J, Ahmed F, Murthy U. Intragastric acdification reduces the occurrence of false-negative
urea breath test results in patients taking a proton pump inhibitor. AM J Gastroenterol 2001;96:1028-1032
5 彭孝纬.幽门螺杆菌特异的免疫反应与基因检测.世界华人消化杂志 2000;8:553?54
6 王小众,李丹.幽门螺杆菌的血清学诊断.世界华人消化杂志 2000;8:550?51
7 詹德法,徐克成. 14C-尿素呼气试验的临床应用价值及其影响因素.世界华人消化杂志 2000;8:558?59
8 王承党.幽门螺杆菌的细菌学诊断.世界华人消化杂志 2000;8:546?48
9 黄跃,许鲁宁.幽门螺杆菌尿素酶依赖性试验.世界华人消化杂志 2000;8:549?50, 百拇医药(陈少夫, 吴 波, 李 岩)
