结直肠癌微血管密度与增生细胞核抗原的关系 陈卫昌,刘强,李 锐,康苏娅
陈卫昌,刘强,李锐,苏州大学附属一院消化科 江苏省苏州市 215006
康苏娅,苏州大学附属一院病理科
项目负责人 陈卫昌，215006江苏省苏州市，苏州大学附属一院消化科.
收稿日期 2002-06-12 接受日期 2002-07-09
摘要目的:探讨微血管密度计数(MVD)与增生细胞核抗原(PCNA指数)在结直肠癌中的变化，以及与结直肠癌临床病理间的关系.
方法:应用免疫组化方法分析结直肠癌52例、结直肠腺瘤10例、正常肠黏膜组织8例中的MVD、PCNA表达.
, http://www.100md.com
结果:结直肠癌MVD(20.7±10.2)明显高于结直肠腺瘤(8.5±2.3)和正常肠黏膜组织(3.5±0.8) (P <0.01)，结直肠腺瘤亦明显高于正常肠黏膜组织(P <0.05);MVD与结直肠癌淋巴结转移、浆膜浸润、远处转移有关，Duke D，C期明显高于A，B期(P<0.01)，而与其肿瘤大小、病理类型无关(P>0.05).结直肠癌PCNA指数(61.5±23.8)明显高于结直肠腺瘤(18.6±9.0)、正常肠组织(12.3±8.5)(P<0.01),而结直肠腺瘤与正常肠组织相比，PCNA指数无显著性差异(P>0.05);PCNA指数与结直肠癌淋巴结侵犯、浆膜浸润、远处转移有关
(P<0.05,P<0.01)，与肿瘤大小无关(P>0.05)，低分化组PCNA指数明显高于中分化组、高分化组(P<0.05),随Duke分期进展，Duke D期最高(83.6±13.6),Duke D，C期明显高于Duke B，A期(P<0.01,P<0.05).相关分析表明，MCD与PCNA指数呈正相关
, 百拇医药
(γ=0.572,P<0.05).
结论:MVD、PCNA与结直肠癌生物学行为密切相关，PCNA与结直肠肿瘤血管生成有关.
陈卫昌，刘强，李锐，康苏娅.结直肠癌微血管密度与增生细胞核抗原的关系.世界华人消化杂志 2002;10(10):1222-1224
0 引言血管生成在实体瘤的发生、发展中起重要作用，实体瘤的生物学行为与肿瘤血管生成密切相关，这已为多数实验和临床研究所证实,亦为多数学者接受[1,2] .大量临床资料表明，肿瘤微血管密度(microvessel density MVD)是影响肿瘤预后的主要因素之一[3]，人们在胃癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、卵巢癌[2]等中发现微血管密度与肿瘤转移、复发、死亡等相关.增生细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen PCNA)和细胞增生状态有关[4].我们采用免疫组化(immunohistochemistry)方法，旨在探讨MVD、PCNA指数在结直肠癌中的变化，与结直肠癌临床病理间的关系，肿瘤血管形成与PCNA的相关性.
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1 材料和方法1.1 材料 1999-05/2001-06间本院普外科收治的住院手术的52例结直肠癌患者，所有患者术前均未接受放-化疗以及其他针对肿瘤的特殊治疗.男28例，女24例，年龄19-78(平均57.4)岁.其中高分化腺癌10例，中分化腺癌28例，低分化腺癌4例，黏液腺癌8例，印戒细胞癌2例，将黏液腺癌、印戒细胞癌归入低分化组一并统计.其中依结直肠肿瘤TNM分期，52例结直肠癌分为Duke A期10例，B期8例，C期27例，D期7例.同期，行手术切除或结肠镜下高频电凝电切结直肠腺瘤10例，男4例，女6例，年龄37-81(平均54.4)岁.另8例为正常肠黏膜石蜡包埋组织标本，男5例，女3例，年龄28-73(平均57.4)岁.
1.2 方法 采用免疫组化S-P法.对CD34进行柠檬酸缓冲液高温高压抗原修复.鼠抗人单克隆抗体CD34(造血祖细胞抗原)、鼠抗人增生核细胞抗原(PCNA),均为即用性，以及显色试剂(DAB，3,3二氨基苯联胺)均购自福州迈新生物技术开发公司.严格按操作说明书进行.微血管密度定量(MVD)：参照Weider方法[5]，先在低倍镜下(×40)扫视整个切片，寻找高血管密度区，即“热点”，再在高倍镜下(×200)下记数被染成黄色的血管数目.结果用3个高倍镜视野下的血管数目的平均数来表示.增生细胞核抗原指数(PCNA 指数)[6] :细胞核染成棕褐色为阳性.先在低倍镜下找到阳性细胞密集区，然后在高倍镜下记数1 000个细胞，其中阳性细胞所占的百分比即为PCNA指数.
, 百拇医药
统计学处理 数据采用SPSS10.0统计软件包进行c2检验、t 检验和方差分析.PCNA指数和MVD的相关性用Spearman等级相关分析.
2 结果2.1 MVD与结直肠癌 结直肠癌组织内微血管形态不规则，分布呈异质性，结肠腺瘤微血管分布相对规则，正常结肠组织的微血管分布较均匀且少.三者间比较均有差异显著性(表1).微血管密度与结直肠癌肿瘤大小、病理类型均无明显关联，与肿瘤淋巴结侵犯、浆膜浸润、远处转移明显相关，随结直肠癌Duke分期进展，显示微血管密度逐渐增加，以Duke D期为最高，统计分析表明，Duke C，D期与A，B期相比较，差异有显著性(表2).
表1 结直肠癌组织MVD，PCNA指数(c±s )
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aP <0.01 vs 正常组织、结直肠腺瘤比较; bP <0.01 vs 正常组织比较.
表2 MVD、VEGF、PCNA指数和结直肠癌临床病理参数之间关系(c±s ).
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aP <0.05,bP <0.01; cP <0.01 D，C vs A，B比较; dP <0.05 C vs B比较.
eP <0.05,低分化 vs 高分化、中分化比较；fP <0.05, Duke分期C vs A 、B期比较;gP <0.01, Duke分期D与A、B期比较.
2.2 PCNA指数与结直肠癌 结直肠癌52例PCNA指数为 61.5±23.8，与结直肠腺瘤(18.6±9.0)、正常肠组织(12.3±8.5)明显增高，统计学处理显示差异有明显显著性.而结直肠腺瘤与正常肠组织PCNA指数比较，统计学处理差异无显著性.PCNA指数与结直肠癌肿瘤大小无明显关联，与肿瘤淋巴结侵犯、浆膜浸润、远处转移明显相关，从病理类型角度，我们发现，低分化组比高分化组、中分化组PCNA指数亦明显增高，而高分化组与中分化相比，无统计学差异.与结直肠癌Duke分期关系，显示PCNA指数逐渐增加，以Duke D期为最高(83.6±13.6)，其次为C期(70.4±17.7)、B期(46.1±20.4)、A期(34.2±14.1)，统计分析表明，Duke D、C期与A、B期相比较，有显著性差异(表2).MVD与PCNA指数呈正相关(g=0.572，P <0.05).
, 百拇医药
3 讨论许多研究已证实，肿瘤新生血管与肿瘤侵袭和转移潜能密切相关.Nanashima et al [7]对结直肠癌肝转移行肝切除的62例患者的多因素分析表明，微血管计数是主要的预后因素.Nakasaki et al [8]采用免疫组化方法对结直肠癌100例行MVD检测，发现其与结直肠癌浸润深度、淋巴结转移、肝转移明显有关，且MVD与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor VEGF)亦明显相关.提示，肿瘤血管生成增强了肿瘤细胞侵袭血管和转移潜能，微血管计数可预测肿瘤复发.我们对52例结直肠癌的MVD测定，MVD明显高于腺瘤、及正常肠组织，而且，MVD与结直肠癌大小、病理类型无关，但与淋巴结转移、远处转移、浆膜侵犯明显相关，随Duke分期进展，MVD逐渐增高，C、D期明显高于A、B期.因此，MVD测定可反映肿瘤进展程度，预测患者预后，与结直肠肿瘤生物学行为密切相关.因本组病例随访时间较短.故未比较其与患者5 a生存率的关系.
, 百拇医药
PCNA是DNA多聚酶δ的一种辅助蛋白，在DNA合成中发挥重要作用，其合成和积聚在细胞核，主要在细胞周期的G1后期和S期，认为是一评价肿瘤增生活性和肿瘤恶性程度的可靠指标.贾玲etal[9]发现，PCNA与大肠癌的淋巴结转移、肝转移呈相关性.Matsushima et al [10] 采用免疫组化方法测定了PCNA与26例结直肠癌伴肺转移临床病理间的相互关系，表明PCNA与结直肠癌进展有关.本研究发现，PCNA指数与结直肠癌肿瘤大小无明显关联，与肿瘤淋巴结侵犯、浆膜浸润、远处转移明显有关，肿瘤低分化时PCNA指数明显高于中分化、高分化，表明PCNA指数与肿瘤分化程度有关，可初步反映肿瘤分化、进展程度.而且，PCNA指数与肿瘤分期也有关，DukeC，D期高于A，B期.提示，PCNA指数测定可评价结直肠肿瘤分化及恶性程度.
本研究对MVD、PCNA的相关分析表明，MVD与PCNA指数呈正相关.PCNA指数主要表示为肿瘤细胞的增生能力，PCNA指数与MVD正相关，提示，细胞增生增加，可使肿瘤集聚，张力增高，可致缺氧，缺氧诱导VEGF表达[2]，促进血管生成，而血管生成又可促进肿瘤细胞增生，进而促进肿瘤浸润、转移.
, 百拇医药
4 参考文献1 Ellis LM,Takahashi Y,Liu W,Shaheen R.Vascular endithelial growth factor in human colon cancer :biology
and therapeutic implications. The Oncologist 2000;5(suppl):11-15
2 Carmelet P, Jain RK.Angiogenesis in cancer and other diseases.Nature 2000;14:249-257
3 Los M,Voest EE. The potential role of antivascular therapy in the adjuvant and neoadjuvant treatment of
, 百拇医药
cancer.Semin Oncol 2001;28:93-105
4 Qin LX,Tang ZY. The prognostic molecular markers in hepatocellular carcinoima.World J Gastroenterol 2002;8:385-392
5 Weidner N.Intratumor microvessel density as a prognostic factor in cancer .Am J Pathol 1995;147:9-19
6 栗华.大肠癌ET-1及其与肿瘤细胞增生和微血管形成的关系.山东医科大学学报 2001;39:13-15
7 Nanashima A,Yamaguchi H,Sawai T,Yamaguchi E,Kidogawa H,Matsuo S,Yasutake T, Tsuji T,Jibiki M,Nakagoe
, http://www.100md.com
T,Ayabe H.Prognostic factors in hepatic metastases of colorectal carcinoma :Immunohistochemical analysis of
tumor biological factors.Dig Dis Sci 2001;46:1623-1628
8 Nakasaki T,Wada H,Shigemori C,Miki C,Gabazza EC,Nobori T,Nakamura S,Shiku H.Expression of tissue factor
and vascular ehdothelial growth factor is associated with angiogenesis in colorectal cancer.Am J Hematol 2002;69:247-254
, 百拇医药
9 贾玲,陈天星，孙建伟，纳智明，张金华.大肠癌微血管密度及增生细胞核抗原与临床预后的关系.世界华人消化病杂志
2000;8:74-76
10 Matsushima S,Yamamoto H,Suzuki S,Egami K,Yoshioka M,Tanaka S.Evaluation of prognostic factors and PCNA
expression for pulmonary metastatic tumors of colorectal carcinoma.J Nippon Med Sch 2000;67:28-31, 百拇医药(结直肠癌微血管密度与增生细胞核抗原的关系 陈卫昌,刘强,李 锐,康苏娅)
康苏娅,苏州大学附属一院病理科
项目负责人 陈卫昌，215006江苏省苏州市，苏州大学附属一院消化科.
收稿日期 2002-06-12 接受日期 2002-07-09
摘要目的:探讨微血管密度计数(MVD)与增生细胞核抗原(PCNA指数)在结直肠癌中的变化，以及与结直肠癌临床病理间的关系.
方法:应用免疫组化方法分析结直肠癌52例、结直肠腺瘤10例、正常肠黏膜组织8例中的MVD、PCNA表达.
, http://www.100md.com
结果:结直肠癌MVD(20.7±10.2)明显高于结直肠腺瘤(8.5±2.3)和正常肠黏膜组织(3.5±0.8) (P <0.01)，结直肠腺瘤亦明显高于正常肠黏膜组织(P <0.05);MVD与结直肠癌淋巴结转移、浆膜浸润、远处转移有关，Duke D，C期明显高于A，B期(P<0.01)，而与其肿瘤大小、病理类型无关(P>0.05).结直肠癌PCNA指数(61.5±23.8)明显高于结直肠腺瘤(18.6±9.0)、正常肠组织(12.3±8.5)(P<0.01),而结直肠腺瘤与正常肠组织相比，PCNA指数无显著性差异(P>0.05);PCNA指数与结直肠癌淋巴结侵犯、浆膜浸润、远处转移有关
(P<0.05,P<0.01)，与肿瘤大小无关(P>0.05)，低分化组PCNA指数明显高于中分化组、高分化组(P<0.05),随Duke分期进展，Duke D期最高(83.6±13.6),Duke D，C期明显高于Duke B，A期(P<0.01,P<0.05).相关分析表明，MCD与PCNA指数呈正相关
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(γ=0.572,P<0.05).
结论:MVD、PCNA与结直肠癌生物学行为密切相关，PCNA与结直肠肿瘤血管生成有关.
陈卫昌，刘强，李锐，康苏娅.结直肠癌微血管密度与增生细胞核抗原的关系.世界华人消化杂志 2002;10(10):1222-1224
0 引言血管生成在实体瘤的发生、发展中起重要作用，实体瘤的生物学行为与肿瘤血管生成密切相关，这已为多数实验和临床研究所证实,亦为多数学者接受[1,2] .大量临床资料表明，肿瘤微血管密度(microvessel density MVD)是影响肿瘤预后的主要因素之一[3]，人们在胃癌、非小细胞肺癌、黑色素瘤、卵巢癌[2]等中发现微血管密度与肿瘤转移、复发、死亡等相关.增生细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen PCNA)和细胞增生状态有关[4].我们采用免疫组化(immunohistochemistry)方法，旨在探讨MVD、PCNA指数在结直肠癌中的变化，与结直肠癌临床病理间的关系，肿瘤血管形成与PCNA的相关性.
, http://www.100md.com
1 材料和方法1.1 材料 1999-05/2001-06间本院普外科收治的住院手术的52例结直肠癌患者，所有患者术前均未接受放-化疗以及其他针对肿瘤的特殊治疗.男28例，女24例，年龄19-78(平均57.4)岁.其中高分化腺癌10例，中分化腺癌28例，低分化腺癌4例，黏液腺癌8例，印戒细胞癌2例，将黏液腺癌、印戒细胞癌归入低分化组一并统计.其中依结直肠肿瘤TNM分期，52例结直肠癌分为Duke A期10例，B期8例，C期27例，D期7例.同期，行手术切除或结肠镜下高频电凝电切结直肠腺瘤10例，男4例，女6例，年龄37-81(平均54.4)岁.另8例为正常肠黏膜石蜡包埋组织标本，男5例，女3例，年龄28-73(平均57.4)岁.
1.2 方法 采用免疫组化S-P法.对CD34进行柠檬酸缓冲液高温高压抗原修复.鼠抗人单克隆抗体CD34(造血祖细胞抗原)、鼠抗人增生核细胞抗原(PCNA),均为即用性，以及显色试剂(DAB，3,3二氨基苯联胺)均购自福州迈新生物技术开发公司.严格按操作说明书进行.微血管密度定量(MVD)：参照Weider方法[5]，先在低倍镜下(×40)扫视整个切片，寻找高血管密度区，即“热点”，再在高倍镜下(×200)下记数被染成黄色的血管数目.结果用3个高倍镜视野下的血管数目的平均数来表示.增生细胞核抗原指数(PCNA 指数)[6] :细胞核染成棕褐色为阳性.先在低倍镜下找到阳性细胞密集区，然后在高倍镜下记数1 000个细胞，其中阳性细胞所占的百分比即为PCNA指数.
, 百拇医药
统计学处理 数据采用SPSS10.0统计软件包进行c2检验、t 检验和方差分析.PCNA指数和MVD的相关性用Spearman等级相关分析.
2 结果2.1 MVD与结直肠癌 结直肠癌组织内微血管形态不规则，分布呈异质性，结肠腺瘤微血管分布相对规则，正常结肠组织的微血管分布较均匀且少.三者间比较均有差异显著性(表1).微血管密度与结直肠癌肿瘤大小、病理类型均无明显关联，与肿瘤淋巴结侵犯、浆膜浸润、远处转移明显相关，随结直肠癌Duke分期进展，显示微血管密度逐渐增加，以Duke D期为最高，统计分析表明，Duke C，D期与A，B期相比较，差异有显著性(表2).
表1 结直肠癌组织MVD，PCNA指数(c±s )
| 分组 | n | MVD | PCNA指数 |
| 正常组织 | 8 | 3.5±0.8 | 12.3±8.5 |
| 结直肠腺瘤 | 10 | 8.5±2.3b | 18.6±9.0 |
| 结直肠癌 | 52 | 20.7±10.2a | 61.5±23.8a |
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aP <0.01 vs 正常组织、结直肠腺瘤比较; bP <0.01 vs 正常组织比较.
表2 MVD、VEGF、PCNA指数和结直肠癌临床病理参数之间关系(c±s ).
| 临床参数 | n | MVD | PCNA指数 |
| 肿瘤大小 | |||
| ≥5 cm | 35 | 22.5±11.0 | 63.1±22.5 |
| <5 cm | 17 | 17.0±7.2 | 58.1±26.7 |
| 病理类型 | |||
| 分化高 | 10 | 17.7±8.2 | 41.9±18.1e |
| 中 | 28 | 20.1±10.7 | 60.3±23.0 |
| 低 | 14 | 24.2±9.9 | 77.9±17.5 |
| 淋巴结转移 | |||
| 阳性 | 33 | 25.3±8.5b | 73.2±17.9b |
| 阴性 | 19 | 12.8±7.7 | 41.1±18.6 |
| 浆膜侵犯 | |||
| 阳性 | 33 | 24.1±10.0b | 68.7±20.8a |
| 阴性 | 19 | 14.8±7.8 | 48.9±24.0 |
| 远处转移 | |||
| 有 | 7 | 35.5±9.3b | 83.6±13.6b |
| 无 | 45 | 18.4±8.2 | 58.0±23.3 |
| Duke分期 | |||
| A | 10 | 9.4±3.5 | 34.2±14.1 |
| B | 8 | 14.6±7.7 | 46.1±20.4 |
| C | 27 | 22.9±6.1cd | 70.4±17.7f |
| D | 7 | 35.5±9.3c | 83.6±13.6g |
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aP <0.05,bP <0.01; cP <0.01 D，C vs A，B比较; dP <0.05 C vs B比较.
eP <0.05,低分化 vs 高分化、中分化比较；fP <0.05, Duke分期C vs A 、B期比较;gP <0.01, Duke分期D与A、B期比较.
2.2 PCNA指数与结直肠癌 结直肠癌52例PCNA指数为 61.5±23.8，与结直肠腺瘤(18.6±9.0)、正常肠组织(12.3±8.5)明显增高，统计学处理显示差异有明显显著性.而结直肠腺瘤与正常肠组织PCNA指数比较，统计学处理差异无显著性.PCNA指数与结直肠癌肿瘤大小无明显关联，与肿瘤淋巴结侵犯、浆膜浸润、远处转移明显相关，从病理类型角度，我们发现，低分化组比高分化组、中分化组PCNA指数亦明显增高，而高分化组与中分化相比，无统计学差异.与结直肠癌Duke分期关系，显示PCNA指数逐渐增加，以Duke D期为最高(83.6±13.6)，其次为C期(70.4±17.7)、B期(46.1±20.4)、A期(34.2±14.1)，统计分析表明，Duke D、C期与A、B期相比较，有显著性差异(表2).MVD与PCNA指数呈正相关(g=0.572，P <0.05).
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3 讨论许多研究已证实，肿瘤新生血管与肿瘤侵袭和转移潜能密切相关.Nanashima et al [7]对结直肠癌肝转移行肝切除的62例患者的多因素分析表明，微血管计数是主要的预后因素.Nakasaki et al [8]采用免疫组化方法对结直肠癌100例行MVD检测，发现其与结直肠癌浸润深度、淋巴结转移、肝转移明显有关，且MVD与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor VEGF)亦明显相关.提示，肿瘤血管生成增强了肿瘤细胞侵袭血管和转移潜能，微血管计数可预测肿瘤复发.我们对52例结直肠癌的MVD测定，MVD明显高于腺瘤、及正常肠组织，而且，MVD与结直肠癌大小、病理类型无关，但与淋巴结转移、远处转移、浆膜侵犯明显相关，随Duke分期进展，MVD逐渐增高，C、D期明显高于A、B期.因此，MVD测定可反映肿瘤进展程度，预测患者预后，与结直肠肿瘤生物学行为密切相关.因本组病例随访时间较短.故未比较其与患者5 a生存率的关系.
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PCNA是DNA多聚酶δ的一种辅助蛋白，在DNA合成中发挥重要作用，其合成和积聚在细胞核，主要在细胞周期的G1后期和S期，认为是一评价肿瘤增生活性和肿瘤恶性程度的可靠指标.贾玲etal[9]发现，PCNA与大肠癌的淋巴结转移、肝转移呈相关性.Matsushima et al [10] 采用免疫组化方法测定了PCNA与26例结直肠癌伴肺转移临床病理间的相互关系，表明PCNA与结直肠癌进展有关.本研究发现，PCNA指数与结直肠癌肿瘤大小无明显关联，与肿瘤淋巴结侵犯、浆膜浸润、远处转移明显有关，肿瘤低分化时PCNA指数明显高于中分化、高分化，表明PCNA指数与肿瘤分化程度有关，可初步反映肿瘤分化、进展程度.而且，PCNA指数与肿瘤分期也有关，DukeC，D期高于A，B期.提示，PCNA指数测定可评价结直肠肿瘤分化及恶性程度.
本研究对MVD、PCNA的相关分析表明，MVD与PCNA指数呈正相关.PCNA指数主要表示为肿瘤细胞的增生能力，PCNA指数与MVD正相关，提示，细胞增生增加，可使肿瘤集聚，张力增高，可致缺氧，缺氧诱导VEGF表达[2]，促进血管生成，而血管生成又可促进肿瘤细胞增生，进而促进肿瘤浸润、转移.
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4 参考文献1 Ellis LM,Takahashi Y,Liu W,Shaheen R.Vascular endithelial growth factor in human colon cancer :biology
and therapeutic implications. The Oncologist 2000;5(suppl):11-15
2 Carmelet P, Jain RK.Angiogenesis in cancer and other diseases.Nature 2000;14:249-257
3 Los M,Voest EE. The potential role of antivascular therapy in the adjuvant and neoadjuvant treatment of
, 百拇医药
cancer.Semin Oncol 2001;28:93-105
4 Qin LX,Tang ZY. The prognostic molecular markers in hepatocellular carcinoima.World J Gastroenterol 2002;8:385-392
5 Weidner N.Intratumor microvessel density as a prognostic factor in cancer .Am J Pathol 1995;147:9-19
6 栗华.大肠癌ET-1及其与肿瘤细胞增生和微血管形成的关系.山东医科大学学报 2001;39:13-15
7 Nanashima A,Yamaguchi H,Sawai T,Yamaguchi E,Kidogawa H,Matsuo S,Yasutake T, Tsuji T,Jibiki M,Nakagoe
, http://www.100md.com
T,Ayabe H.Prognostic factors in hepatic metastases of colorectal carcinoma :Immunohistochemical analysis of
tumor biological factors.Dig Dis Sci 2001;46:1623-1628
8 Nakasaki T,Wada H,Shigemori C,Miki C,Gabazza EC,Nobori T,Nakamura S,Shiku H.Expression of tissue factor
and vascular ehdothelial growth factor is associated with angiogenesis in colorectal cancer.Am J Hematol 2002;69:247-254
, 百拇医药
9 贾玲,陈天星，孙建伟，纳智明，张金华.大肠癌微血管密度及增生细胞核抗原与临床预后的关系.世界华人消化病杂志
2000;8:74-76
10 Matsushima S,Yamamoto H,Suzuki S,Egami K,Yoshioka M,Tanaka S.Evaluation of prognostic factors and PCNA
expression for pulmonary metastatic tumors of colorectal carcinoma.J Nippon Med Sch 2000;67:28-31, 百拇医药(结直肠癌微血管密度与增生细胞核抗原的关系 陈卫昌,刘强,李 锐,康苏娅)
