根除幽门螺杆菌前后血浆抗坏血酸浓度的变化
吴静,臧宏,王玉玲,任登先,兰州医学院第一附属医院消化内科 甘肃省兰州市 730000
项目负责人 吴静,730000,甘肃省兰州市, 兰州医学院第一附属医院消化科. wujing36@163.com
收稿日期 2002-04-09 接受日期 2002-08-09
摘要
目的:研究根除幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)前后血抗坏血酸(ascorbid acid ,AA)浓度的变化，及其与胃病理组织学改变的关系.
方法:Hp阳性组63例，年龄19-68岁.Hp阴性组56例，年龄21-65岁.两组患者均于空腹下作内镜，在胃窦取组织，常规作尿素酶试验和组织学检查.同时取肘静脉血，应用高效液相色谱法(HLPC)检测血浆AA浓度.Hp阳性组患者接受抗Hp三联，并于治疗后60 d分别重复上述检查.
, http://www.100md.com
结果:根除Hp后血浆AA浓度(9.68±3.88 mg/L)明显增高，与治疗前(4.78±3.85 mg/L) 及治疗后Hp未根除者(4.60±3.07 mg/L)以及Hp阴性患者(10.20±5.89 mg/L)比较有显著性差异(P <0.001，P <0.01, P <0.001)；Hp根除后AA增高与胃黏膜炎症及萎缩、肠化和不典型增生改善有关.
结论:Hp感染造成血浆AA浓度可逆性降低.测定抗Hp治疗前后AA浓度可作为判定抗Hp治疗效果，指导临床用药的有效指标.
吴静,臧宏,王玉玲,任登先.根除幽门螺杆菌前后血浆抗坏血酸浓度的变化.世界华人消化杂志 2002;10(12):1470-1471
0 引言Hp感染是慢性胃炎的重要病因，是消化性溃疡的重要致病因素,与溃疡复发有密切关系，根除Hp后可以显著降低或防止溃疡复发[1-3] .流行病学调查也显示Hp感染与胃癌的发病有关[4] .世界卫生组织已将该菌纳入第一类致癌原[5] .根除Hp感染有望在很大程度上降低胃癌的发病率与死亡率.AA是维生素C(vitamin c，VC)的还原形式，是一种有效的抗氧化剂[6],可经正常胃分泌，对胃黏膜具有抗氧化保护作用[7],与胃癌的发生呈负相关[8] .我们应用HLPC检测63例Hp阳性的慢性胃病患者根除Hp前后血浆AA浓度，并与56例Hp阴性患者进行对照以探讨根除Hp前后血浆AA的变化，及其与胃病理组织学改变的关系.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 63例经胃镜及尿素酶和组织病理学确诊的Hp阳性患者，男性38例，女性25例，年龄19-68岁，排除其他脏器疾病.对照组56例Hp阴性CSG患者，男性41例，女性15例，年龄21-65岁.Hp阳性组患者给予抗Hp三联治疗：洛塞克20 mg 1次/d×28 d+阿莫西林0.5 g,甲硝唑0.2 g 4次/d×14 d, 停药后40 d复查胃镜及实验室检查.
1.2 方法
1.2.1标本采集 两组检测对象均行胃镜检查，检查当日空腹采取静脉血5 ml . 常规操作胃镜在胃窦取组织3块，胃体取2块，其中窦部1块作快速尿素酶试验，另外4块行病理组织学检查及嗜银染色.抽取的静脉血经离心, 取上清夜.0.1 ml，加5 %偏磷酸液0.9 ml(4 ℃贮存,使用1 wk),震荡后贮存于-70 ℃冰箱中待测(1 mo内测定).
, 百拇医药
1.2.2 标本测定 (1)仪器与试剂:PE1022型高效液相色谱系统：200型二元低压梯度泵,Lc-235二极管陈列检测器,1 022小型工作站,PE CRC18(3 um 4.6×3.3 cm)，LGJ0.5-Ⅱ冷冻干燥机(军事医学科学院实验仪器厂).抗坏血酸对照品(含量9.7 %，上海化工试剂研究所).AA标准液用0.002 mol/L MPA临用前配制. (2)色谱条件流动相：0.005 mol/L KH2PO4(磷酸调pH至3.11)；检测波长245 nm；流速0.5 ml/min. (3)分析方法认定 AA浓度在0.47-26.93 mg/L范围内，用AA峰面积对浓度回归, 得回归方程Y=4 582 580+2 459 330×R=0.9 991.AA生物样品提取回收率95.05±3.3 %，日内和日间平均RSD<2.7 %和<4.1 %. (4)样品检定前处理 测定时将冻结的样品迅速置于冷冻干燥器中干燥, 残渣用100 ul 去离子水溶解后进样10 ul.
, 百拇医药
统计学处理 采用t显著性检验.
2 结果
2.1血浆AA与Hp根除的疗效关系 63例行抗Hp治疗的Hp阳性患者,51例治疗后Hp根除,血浆AA(9.68 ±3.88 mg/L)浓度显著升高，与抗Hp治疗前(4.78 ±3.85 mg/L)及Hp阴性组(10.20±5.89 mg/L)比较有显著性差异(P<0.001，P<0.001)，与治疗后Hp未根除者(4.60±3.07 mg/L)比较有显著差异(P<0.01).12例治疗后Hp未根除者血浆AA与治疗前(3.51±2.96 mg/L)比较无显著性差异(P>0.05)，与Hp阴性组比较有显著性差异(P<0.05).经正规三联治疗Hp根除者，其治疗前血浆AA浓度高于Hp未根除者治疗前血浆AA浓度，二者比较无显著性差异(P>0.05).
, http://www.100md.com
2.2血浆AA与胃黏膜病理组织学改变的关系 ⑴治疗后Hp根除的51例患者，其中41例(82.35 %)患者急性炎症消失、10例减轻；所有患者存在慢性炎症，其中38例减轻.治疗后Hp未根除的12例患者，4例浆细胞浸润消失,5例淋巴细胞浸润减少,3例无变化.⑵ 63例Hp阳性患者治疗前萎缩40例,肠化32例,不典型增生15例,Hp根除后病理组织学均得到改善,与Hp未根除者比较对萎缩的疗效分别为22/33(66.7 %)和3/7(42.9 %):对不典型增生的疗效分别为7/11(70.0 %)和 2/4(50 %)差异均无显著性(P >0.05).而对肠化的疗效分别为20/24(83.3 %)和3/8(50.0 %)，差异有显著性(P <0.05).
3 讨论抗坏血酸是强烈的抗氧化剂，具有还原亚硝酸盐，抑制N-硝基化合物的形成和清除活性氧代谢物的作用，预防胃癌的发生[9] .流行病学的研究表明低维生素饮食的摄入与胃癌的发生密切相关[9] .Hp感染是慢性胃炎的主要病因，与胃癌的发生有关.Hp感染可降低AA浓度，但其机制尚不清楚.
, http://www.100md.com
本研究采用特异性好，灵敏度高的HPLC法检测AA浓度，结果显示，血浆AA浓度在根除Hp后显著增加，与抗Hp治疗前及Hp阴性组比较有显著性差异，与治疗后Hp未根除者比较有显著差异.12例治疗后Hp未根除者血浆AA与治疗前比较无显著性差异，与Hp阴性组比较有显著性差异.认为Hp感染降低AA浓度的机制可能是：(1)Hp感染造成胃黏膜损害，刺激吞噬细胞产生大量的反应性氧代谢产物(ROM)，使AA氧化作用增强[10] ; (2)炎性细胞代谢产物以及损伤部位再生可增加AA的消耗; (3) Hp感染可导致胃黏膜氧自由基释放[11]，AA利用增多.
本研究还显示根除Hp后胃黏膜病理组织学的急慢性炎症及胃黏膜的萎缩、肠化和不典型增生均有不同程度的减轻及改善.因此根除Hp对胃黏膜病理组织学的改善有重要意义.体内外实验也已证明Hp感染可使空腹胃酸减少，pH值升高常伴有高浓度的亚硝酸盐，这就需要AA与亚硝酸盐反应生成脱氢抗坏血酸和亚硝酸盐氧化物，阻止亚硝基化合物的形成.否则，增加胃癌发生的危险性.因此认为，根除Hp感染，提高AA水平，有望成为逆转或阻断胃黏膜细胞恶变的新途径.适当补充维生素C可做为抗Hp的辅助治疗，提示测定血浆和或胃液AA浓度可成为监测抗Hp治疗效果、指导临床用药的有效指标.
, 百拇医药
4 参考文献1 Watanaba T, Tada M, Nagai H,Sasaki S, Nakao M. Development of Helicobacter pylori infection induces gastric
cancer in mongolian gerbils. Gastroenterology 1998;115:642-648
2 Lam SK, Talley NJ. Report of the 1997 Asia Pacific Consensus Conference on the management of Helicobacter pylori
infection. J Gastroenterol Hepatol 1998;13:1-12
, http://www.100md.com
3 Honda S, Fujioka T, Tokieda M, Satoh R, Nishizono A, Nasu M. Development of Helicobacter pylori-induced gastric
carcinoma in Mongolian gergils. Cancer Res 1998;58:4255-4259
4 Bjorkholm B,Befrits R, Jaup B, Engstrand L. Rapid PCR detection of Helicobacter pylori-associated virulence and reistance
gene directly from gastric biopsy material. J Clin Micriobiol 1998;36:3689-3690
, http://www.100md.com
5 张万岱,徐智民.幽门螺杆菌研究现状及共识.世界华人消化杂志 2000;8:1084-1088
6 Niki E. Action of ascorbic acid as a scavenger of active and stable oxygen radicals. Am J Clin Nutr 1991;54
(6suppl):1119s-1124s
7 Sobala GM, Schorah CJ,Shires S, Lynch DA, Gallacher B, Dixon MF,Axon AT. Effect of eradication of Helicobater pylori or
gastric juice ascorbic acid concentrations.Gut 1993;34:1034-1041
, 百拇医药
8 Zhang HM, Wakisaka N, Maeda O, Yamamoto T. Vitamin C inhibits the growth of a bacterial risk factor for gastric
carcinoma: Helicobacter pylori. Cancer 1997;80:1897-1903
9 房静远,朱舜时,李蓉蓉,施尧,顾伟齐,江绍基,萧树东.胃癌及良性胃病患者血和胃黏膜细胞内维生素的变化.新消化
病学杂志 1995;3:149-151
10 Davies GR, Simmonds NJ, Stevens TR, Sheaff MT, Banatvala N, Laurenson IF, Blake DR, Rampton DS. Helicobacter
pylori stimulates antral mucosal reactive oxygen metabolite production in vivo. Gut 1994;35:179-185
11 Moss SF, Calam J, Aagrwal B, Wang S, Holt PR.Induction of gastric epithelial apoptosis by Helicobacter pylori.
Gut 1996;38:498-501, 百拇医药(吴 静,臧 宏,王玉玲,任登先)
项目负责人 吴静,730000,甘肃省兰州市, 兰州医学院第一附属医院消化科. wujing36@163.com
收稿日期 2002-04-09 接受日期 2002-08-09
摘要
目的:研究根除幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)前后血抗坏血酸(ascorbid acid ,AA)浓度的变化，及其与胃病理组织学改变的关系.
方法:Hp阳性组63例，年龄19-68岁.Hp阴性组56例，年龄21-65岁.两组患者均于空腹下作内镜，在胃窦取组织，常规作尿素酶试验和组织学检查.同时取肘静脉血，应用高效液相色谱法(HLPC)检测血浆AA浓度.Hp阳性组患者接受抗Hp三联，并于治疗后60 d分别重复上述检查.
, http://www.100md.com
结果:根除Hp后血浆AA浓度(9.68±3.88 mg/L)明显增高，与治疗前(4.78±3.85 mg/L) 及治疗后Hp未根除者(4.60±3.07 mg/L)以及Hp阴性患者(10.20±5.89 mg/L)比较有显著性差异(P <0.001，P <0.01, P <0.001)；Hp根除后AA增高与胃黏膜炎症及萎缩、肠化和不典型增生改善有关.
结论:Hp感染造成血浆AA浓度可逆性降低.测定抗Hp治疗前后AA浓度可作为判定抗Hp治疗效果，指导临床用药的有效指标.
吴静,臧宏,王玉玲,任登先.根除幽门螺杆菌前后血浆抗坏血酸浓度的变化.世界华人消化杂志 2002;10(12):1470-1471
0 引言Hp感染是慢性胃炎的重要病因，是消化性溃疡的重要致病因素,与溃疡复发有密切关系，根除Hp后可以显著降低或防止溃疡复发[1-3] .流行病学调查也显示Hp感染与胃癌的发病有关[4] .世界卫生组织已将该菌纳入第一类致癌原[5] .根除Hp感染有望在很大程度上降低胃癌的发病率与死亡率.AA是维生素C(vitamin c，VC)的还原形式，是一种有效的抗氧化剂[6],可经正常胃分泌，对胃黏膜具有抗氧化保护作用[7],与胃癌的发生呈负相关[8] .我们应用HLPC检测63例Hp阳性的慢性胃病患者根除Hp前后血浆AA浓度，并与56例Hp阴性患者进行对照以探讨根除Hp前后血浆AA的变化，及其与胃病理组织学改变的关系.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 63例经胃镜及尿素酶和组织病理学确诊的Hp阳性患者，男性38例，女性25例，年龄19-68岁，排除其他脏器疾病.对照组56例Hp阴性CSG患者，男性41例，女性15例，年龄21-65岁.Hp阳性组患者给予抗Hp三联治疗：洛塞克20 mg 1次/d×28 d+阿莫西林0.5 g,甲硝唑0.2 g 4次/d×14 d, 停药后40 d复查胃镜及实验室检查.
1.2 方法
1.2.1标本采集 两组检测对象均行胃镜检查，检查当日空腹采取静脉血5 ml . 常规操作胃镜在胃窦取组织3块，胃体取2块，其中窦部1块作快速尿素酶试验，另外4块行病理组织学检查及嗜银染色.抽取的静脉血经离心, 取上清夜.0.1 ml，加5 %偏磷酸液0.9 ml(4 ℃贮存,使用1 wk),震荡后贮存于-70 ℃冰箱中待测(1 mo内测定).
, 百拇医药
1.2.2 标本测定 (1)仪器与试剂:PE1022型高效液相色谱系统：200型二元低压梯度泵,Lc-235二极管陈列检测器,1 022小型工作站,PE CRC18(3 um 4.6×3.3 cm)，LGJ0.5-Ⅱ冷冻干燥机(军事医学科学院实验仪器厂).抗坏血酸对照品(含量9.7 %，上海化工试剂研究所).AA标准液用0.002 mol/L MPA临用前配制. (2)色谱条件流动相：0.005 mol/L KH2PO4(磷酸调pH至3.11)；检测波长245 nm；流速0.5 ml/min. (3)分析方法认定 AA浓度在0.47-26.93 mg/L范围内，用AA峰面积对浓度回归, 得回归方程Y=4 582 580+2 459 330×R=0.9 991.AA生物样品提取回收率95.05±3.3 %，日内和日间平均RSD<2.7 %和<4.1 %. (4)样品检定前处理 测定时将冻结的样品迅速置于冷冻干燥器中干燥, 残渣用100 ul 去离子水溶解后进样10 ul.
, 百拇医药
统计学处理 采用t显著性检验.
2 结果
2.1血浆AA与Hp根除的疗效关系 63例行抗Hp治疗的Hp阳性患者,51例治疗后Hp根除,血浆AA(9.68 ±3.88 mg/L)浓度显著升高，与抗Hp治疗前(4.78 ±3.85 mg/L)及Hp阴性组(10.20±5.89 mg/L)比较有显著性差异(P<0.001，P<0.001)，与治疗后Hp未根除者(4.60±3.07 mg/L)比较有显著差异(P<0.01).12例治疗后Hp未根除者血浆AA与治疗前(3.51±2.96 mg/L)比较无显著性差异(P>0.05)，与Hp阴性组比较有显著性差异(P<0.05).经正规三联治疗Hp根除者，其治疗前血浆AA浓度高于Hp未根除者治疗前血浆AA浓度，二者比较无显著性差异(P>0.05).
, http://www.100md.com
2.2血浆AA与胃黏膜病理组织学改变的关系 ⑴治疗后Hp根除的51例患者，其中41例(82.35 %)患者急性炎症消失、10例减轻；所有患者存在慢性炎症，其中38例减轻.治疗后Hp未根除的12例患者，4例浆细胞浸润消失,5例淋巴细胞浸润减少,3例无变化.⑵ 63例Hp阳性患者治疗前萎缩40例,肠化32例,不典型增生15例,Hp根除后病理组织学均得到改善,与Hp未根除者比较对萎缩的疗效分别为22/33(66.7 %)和3/7(42.9 %):对不典型增生的疗效分别为7/11(70.0 %)和 2/4(50 %)差异均无显著性(P >0.05).而对肠化的疗效分别为20/24(83.3 %)和3/8(50.0 %)，差异有显著性(P <0.05).
3 讨论抗坏血酸是强烈的抗氧化剂，具有还原亚硝酸盐，抑制N-硝基化合物的形成和清除活性氧代谢物的作用，预防胃癌的发生[9] .流行病学的研究表明低维生素饮食的摄入与胃癌的发生密切相关[9] .Hp感染是慢性胃炎的主要病因，与胃癌的发生有关.Hp感染可降低AA浓度，但其机制尚不清楚.
, http://www.100md.com
本研究采用特异性好，灵敏度高的HPLC法检测AA浓度，结果显示，血浆AA浓度在根除Hp后显著增加，与抗Hp治疗前及Hp阴性组比较有显著性差异，与治疗后Hp未根除者比较有显著差异.12例治疗后Hp未根除者血浆AA与治疗前比较无显著性差异，与Hp阴性组比较有显著性差异.认为Hp感染降低AA浓度的机制可能是：(1)Hp感染造成胃黏膜损害，刺激吞噬细胞产生大量的反应性氧代谢产物(ROM)，使AA氧化作用增强[10] ; (2)炎性细胞代谢产物以及损伤部位再生可增加AA的消耗; (3) Hp感染可导致胃黏膜氧自由基释放[11]，AA利用增多.
本研究还显示根除Hp后胃黏膜病理组织学的急慢性炎症及胃黏膜的萎缩、肠化和不典型增生均有不同程度的减轻及改善.因此根除Hp对胃黏膜病理组织学的改善有重要意义.体内外实验也已证明Hp感染可使空腹胃酸减少，pH值升高常伴有高浓度的亚硝酸盐，这就需要AA与亚硝酸盐反应生成脱氢抗坏血酸和亚硝酸盐氧化物，阻止亚硝基化合物的形成.否则，增加胃癌发生的危险性.因此认为，根除Hp感染，提高AA水平，有望成为逆转或阻断胃黏膜细胞恶变的新途径.适当补充维生素C可做为抗Hp的辅助治疗，提示测定血浆和或胃液AA浓度可成为监测抗Hp治疗效果、指导临床用药的有效指标.
, 百拇医药
4 参考文献1 Watanaba T, Tada M, Nagai H,Sasaki S, Nakao M. Development of Helicobacter pylori infection induces gastric
cancer in mongolian gerbils. Gastroenterology 1998;115:642-648
2 Lam SK, Talley NJ. Report of the 1997 Asia Pacific Consensus Conference on the management of Helicobacter pylori
infection. J Gastroenterol Hepatol 1998;13:1-12
, http://www.100md.com
3 Honda S, Fujioka T, Tokieda M, Satoh R, Nishizono A, Nasu M. Development of Helicobacter pylori-induced gastric
carcinoma in Mongolian gergils. Cancer Res 1998;58:4255-4259
4 Bjorkholm B,Befrits R, Jaup B, Engstrand L. Rapid PCR detection of Helicobacter pylori-associated virulence and reistance
gene directly from gastric biopsy material. J Clin Micriobiol 1998;36:3689-3690
, http://www.100md.com
5 张万岱,徐智民.幽门螺杆菌研究现状及共识.世界华人消化杂志 2000;8:1084-1088
6 Niki E. Action of ascorbic acid as a scavenger of active and stable oxygen radicals. Am J Clin Nutr 1991;54
(6suppl):1119s-1124s
7 Sobala GM, Schorah CJ,Shires S, Lynch DA, Gallacher B, Dixon MF,Axon AT. Effect of eradication of Helicobater pylori or
gastric juice ascorbic acid concentrations.Gut 1993;34:1034-1041
, 百拇医药
8 Zhang HM, Wakisaka N, Maeda O, Yamamoto T. Vitamin C inhibits the growth of a bacterial risk factor for gastric
carcinoma: Helicobacter pylori. Cancer 1997;80:1897-1903
9 房静远,朱舜时,李蓉蓉,施尧,顾伟齐,江绍基,萧树东.胃癌及良性胃病患者血和胃黏膜细胞内维生素的变化.新消化
病学杂志 1995;3:149-151
10 Davies GR, Simmonds NJ, Stevens TR, Sheaff MT, Banatvala N, Laurenson IF, Blake DR, Rampton DS. Helicobacter
pylori stimulates antral mucosal reactive oxygen metabolite production in vivo. Gut 1994;35:179-185
11 Moss SF, Calam J, Aagrwal B, Wang S, Holt PR.Induction of gastric epithelial apoptosis by Helicobacter pylori.
Gut 1996;38:498-501, 百拇医药(吴 静,臧 宏,王玉玲,任登先)
