鼠肝移植对胃黏膜损伤的实验研究
褚延魁,马庆久,鲁建国,何显力,杜锡林,乔庆,王胜智,中国人民解放军第四军医大学唐都医院普通外科 陕西省西安市 710038
刘维,中国人民解放军第四军医大学西京医院供应室 陕西省西安市 710032
项目负责人:褚延魁,710038,陕西省西安市,中国人民解放军第四军医大学唐都医院普通外科. tdsurg@fmmu.edu.cn
电话:029-3377732
收稿日期:2002-10-29 接受日期:2002-11-14
摘要
目的:观察肝移植术后胃黏膜的病理变化.
, http://www.100md.com
方法:采用二袖套法+肝动脉重建吻合法行鼠肝移植，经组织病理和电镜切片观察肝移植后胃黏膜的组织结构和细胞结构的变化.
结果:肝移植后胃黏膜组织结构表现为充血、水肿、溃疡、糜烂形成.
结论:肝移植伴随胃黏膜的损伤，需要预防治疗.
褚延魁,马庆久,鲁建国,刘维,何显力,杜锡林,乔庆,王胜智. 鼠肝移植对胃黏膜损伤的实验研究. 世界华人消化杂志 2003;11(4):486-487
0 引言理论上讲，一切肝病用常规的内外科所有方法不能治愈，而预计在短期内无法避免死亡者，均可作肝移植.目前，肝移植已成为公认的治疗肝病的有效手段，且取得了满意的结果，但肝移植需阻断肝门血流，造成胃肠道淤血，势必对胃黏膜造成损伤，国内尚未见关于此方面的报道[1-7]，我们在成功地对大鼠进行肝移植手术的基础上，观察胃黏膜的组织病理及电镜变化，为预防肝移植后的上消化道出血，提高患者的生存质量提供理论依据.
, http://www.100md.com
1 材料和方法
1.1材料 SD♂大鼠70只(第四军医大学动物中心提供)，体质量(280±60 g)，受体体质量等于或略重于供体，随机分组.受体术前禁食4 h，不禁水清洁手术.
1.2方法 肝移植手术方法采用二袖套法+肝动脉重建吻合法，手术过程分为(1)供肝切取；(2)受体肝切除；(3)肝移植等三部分，其中肝上下腔静脉，门静脉采用袖套法吻合，肝下下腔静脉及肝动脉吻合采用缝合法，血管缝合借助手术显微镜操作. 于肝移植后1 h、24 h、72 h分别心脏穿刺取血装入加有抑肽酶1 000 u，100 g/L EDTA-Na2 Leoul的离心管中，4 ℃，3 000 rpm，15 min，留取血样分装，置于-70 ℃超低温冰箱保存，待测肝功，留取部分胃黏膜组织，常规石蜡切片，HE染色，镜下行病理学观察. 留取部分胃黏膜组织，切成2×3 mm长条形，戊二醛固定，电镜检查，血中谷丙转氨酶，谷草转氨酶由本院检验科协助检查.
, http://www.100md.com
统计学处理 实验结果均表示为采用团体t检验，P <0.05为显著水平.
2 结果
2.1本组肝移植实验动物肝缺血无肝期平均为15.6±3.2 min，术后动物苏醒，肝脏恢复血供，并有胆汁流出，移植成功.
2.2 肝移植对转氨酶的影响 见表1.
表1 实验动物肝功检测结果(n =10)
, http://www.100md.com
aP <0.01，bP <0.01 vs 对照.
2.3光镜观察结果 光镜下胃黏膜组织结构变化主要为充血、水肿，部分大鼠胃黏膜形成溃疡、糜烂，但病变局限于黏膜浅层，呈灶性分布，部分大鼠可见黏膜上皮脱落. 炎细胞浸润程度不等，可见嗜酸性粒细胞及中性粒细胞浸润.
2.4透射电镜观察结果 透射电镜下可见细胞水肿，线粒体肿胀，线粒体嵴模糊不清，大量的滑面内质网扩张，核膜不清，染色质浓集，可见浆细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性细胞浸润，部分大鼠可见壁细胞染色质变淡，核出现溶解，细胞器空化，核膜不清，以上变化水肿以移植后1 h为主，坏死性变化以术后24 h为主，72 h组和治疗组鼠胃黏膜病变程度均有减轻.
, 百拇医药
3 讨论以手术方法植入一个或部分健康的肝脏，从而获得肝功能的正常恢复，称为肝移植. 肝移植起始于1950年，迄今已50 a. 目前，肝移植作为一种治疗终末期肝病的临床手段在全世界广泛应用. 已有上百家肝移植中心分布在全球，肝移植的总例数已超过3万例. 肝移植的效果也有了明显的改进，最长存活者已超过25 a，大多数存活5 a以上的患者都过着正常生活.
肝移植治疗肝脏疾病取得了满意的效果，但肝移植必然要阻断门静脉血流，造成胃肠道淤血，势必对胃黏膜造成损伤，特别是近年来肝移植用于治疗门脉高压症[8-13]，许多作者发现肝移植术无论从降低门脉压力、预防术后再出血，提高存活率等各方面都优于常规的断流及分流手术，得到广泛应用[14-18]. 而门脉高压常伴有不同程度的门脉高压性胃炎，阻断门静脉造成的胃肠道淤血势必加重对胃黏膜的损伤，需要作进一步的研究.
本实验结果表明:肝移植后，胃黏膜组织出现充血、水肿、部分大鼠胃黏膜有溃疡形成，与对照组比较表明肝移植缺血再灌注对胃黏膜造成损伤，胃黏膜病变以炎症性变为主，尽管病变局限在黏膜浅层，但仍可形成黏膜的出血，部分胃黏膜形成溃疡，是造成术后患者上消化道出血的主要原因. 肝移植肝缺血再灌注造成胃黏膜损伤的原因，作者认为与阻断门脉及肝动脉造成胃肠道淤血，局部缺氧，引起氧自由基及肿瘤坏死因子，白介素类物质增多，造成对胃黏膜的损害有关.透射电镜下见细胞内线粒体肿胀、嵴模糊不清，大量滑面内质网扩张，核膜不清，染色质浓集，并有炎性细胞浸润，同样支持胃黏膜在移植后出现损伤的结论.
, 百拇医药
实验结果表明，水肿性改变以术后1 h为主，而24 h主要表现为坏死性变化，72 h和法莫替丁治疗组，胃黏膜病变程度均有减轻，提示我们对移植后的胃黏膜损伤的预防及治疗应在术前进行，并应持续治疗3 d以上，法莫替丁治疗，由于抑制了胃液的分泌，减少了胃黏膜的损伤因素，减轻了对胃黏膜的损伤. 起到了胃黏膜的保护作用.
总之，通过对正常鼠肝移植后胃黏膜病理改变的观察，我们发现肝移植伴随远隔器官-胃黏膜的损伤，需要我们在临床工作中加以预防治疗.
4 参考文献1 付福民. 大鼠原位肝移植方法探讨及免疫反应的观察. 中华器官移植杂志 1987;8:50-51
2 曾琪华,孙君泓,吴孟超. 三袖套法大鼠原位肝移植. 中华器官移植杂志 1989;10:159-161
3 Putnam CW,Porter KA, Weil R 3rd, Reid HA, Starzl TE. Liver transplantation for Budd chiari syndrome.
, 百拇医药
JAMA 1976;236:1142-1146
4 Glenn H. Liver transplantation for the Budd chiari syndrome. Ann Sury 1990;211:43-46
5 Knoop M, Lemmens HP, Bechstein WO, Blumhardt G, Schattenfroh N, Keck H, Neuhaus P. Treatment of Budd chiari
syndrome with ortho topic liver transplantation and long-term anti loagulation. Clic Transplant 1994;8:67-72
6 陈大志,刘爱武,陈嘉薇. 原位肝移植后门脉高压和脾功能亢进的恢复过程. 中华器官移植杂志 1998;10:240-242
, 百拇医药
7 夏穗生. 我国肝移植现状. 世界华人消化杂志 1999;7:645-646
8 Kasahara M, Ohwada S,Takeichi T,Kaneko H,Tomomasa T,Morikawa A,Yonemura K,Asonuma K,Tanaka K,Kobayashi K,Saheki T,Takeyoshi I,Morishita Y.Living related liver transplantation for type II citrullinemia using a graft from
heterozygote donor. Tansplantation 2001;71:157-159
9 Kim YS,Moon JI,Jeong HJ,Kim MS,Kim SI, Choi KH, Lee HY,Han DS, Park K.Live donor renal allograft in end-stage renal
, 百拇医药
failure patients from immunoglobulin A nephropathy. Transplantation 2001; 71:233-238
10 Sugawara Y, Makuuchi M,Takayama T,Imamura H,Dowaki S, Mizuta K,Kawarasaki H, Hashizume K.Small-for-size grafts
in living-related liver transplantation. J Am Coll Surg 2001;192:510-513
11 Colle I,Van Vlierberghe H, Troisi R, De Hemptinne B,De Vos M.Living related adult-to-adult liver transplantation: which
, http://www.100md.com
patient should benefit from this technique? Acta Gastroenterol Beelg 2001;64:6-8
12 Hui AM,Makuuchi M,Takayama T,Sano K,Kubota K,Harihara Y,Matsunami H.Left hemihepatectomy in living donors with a
thick middle hepatic vein draining the caudal half of the right liver. Transplantation 2000;69:1499-1501
13 Kiuchi T, Kasahara M, Uryuhara K, Inomata Y,Uemoto S,Asonuma K,Egawa H,Fujita S,Hayashi M,Tanaka K. Impact of graft
, http://www.100md.com
size mismatching on graft prognosis in liver transplantation from living donors. Transplantation 1999;67:321-327
14 次秀丽,王宝恩, 张淑文, 张宁宁. lps+tnf致休克大鼠胃肠运动及屏障功能的改变. 世界华人消化杂志 1999;7:510-512
15 Kamada N,Calne RY.Orthotopic liver transplantation in the rat.technique using cuff for portal vein anastomosis and
biliary drainage. Transplantation 1979;28:47-50
16 Guan WX,Dou KF,Li KZ, Gao ZQ,Fu YC. Long term survivor of living related liver transplantation. Zhongguo Putong Waike
Zazhi 2000;9:64-67
17 朱金照,杨国汉,冷恩仁, 陈东风. 中药的促胃肠动力作用. 世界华人消化杂志 1999;7:689-690
18 严家春, 陈文笔, 马勇, 孙新华. 试论肝硬变的组织病理学分期. 世界华人消化杂志 1999;7:841-844, http://www.100md.com(褚延魁,马庆久,鲁建国,刘 维,何显力,杜锡林,乔 庆,王胜智)
刘维,中国人民解放军第四军医大学西京医院供应室 陕西省西安市 710032
项目负责人:褚延魁,710038,陕西省西安市,中国人民解放军第四军医大学唐都医院普通外科. tdsurg@fmmu.edu.cn
电话:029-3377732
收稿日期:2002-10-29 接受日期:2002-11-14
摘要
目的:观察肝移植术后胃黏膜的病理变化.
, http://www.100md.com
方法:采用二袖套法+肝动脉重建吻合法行鼠肝移植，经组织病理和电镜切片观察肝移植后胃黏膜的组织结构和细胞结构的变化.
结果:肝移植后胃黏膜组织结构表现为充血、水肿、溃疡、糜烂形成.
结论:肝移植伴随胃黏膜的损伤，需要预防治疗.
褚延魁,马庆久,鲁建国,刘维,何显力,杜锡林,乔庆,王胜智. 鼠肝移植对胃黏膜损伤的实验研究. 世界华人消化杂志 2003;11(4):486-487
0 引言理论上讲，一切肝病用常规的内外科所有方法不能治愈，而预计在短期内无法避免死亡者，均可作肝移植.目前，肝移植已成为公认的治疗肝病的有效手段，且取得了满意的结果，但肝移植需阻断肝门血流，造成胃肠道淤血，势必对胃黏膜造成损伤，国内尚未见关于此方面的报道[1-7]，我们在成功地对大鼠进行肝移植手术的基础上，观察胃黏膜的组织病理及电镜变化，为预防肝移植后的上消化道出血，提高患者的生存质量提供理论依据.
, http://www.100md.com
1 材料和方法
1.1材料 SD♂大鼠70只(第四军医大学动物中心提供)，体质量(280±60 g)，受体体质量等于或略重于供体，随机分组.受体术前禁食4 h，不禁水清洁手术.
1.2方法 肝移植手术方法采用二袖套法+肝动脉重建吻合法，手术过程分为(1)供肝切取；(2)受体肝切除；(3)肝移植等三部分，其中肝上下腔静脉，门静脉采用袖套法吻合，肝下下腔静脉及肝动脉吻合采用缝合法，血管缝合借助手术显微镜操作. 于肝移植后1 h、24 h、72 h分别心脏穿刺取血装入加有抑肽酶1 000 u，100 g/L EDTA-Na2 Leoul的离心管中，4 ℃，3 000 rpm，15 min，留取血样分装，置于-70 ℃超低温冰箱保存，待测肝功，留取部分胃黏膜组织，常规石蜡切片，HE染色，镜下行病理学观察. 留取部分胃黏膜组织，切成2×3 mm长条形，戊二醛固定，电镜检查，血中谷丙转氨酶，谷草转氨酶由本院检验科协助检查.
, http://www.100md.com
统计学处理 实验结果均表示为采用团体t检验，P <0.05为显著水平.
2 结果
2.1本组肝移植实验动物肝缺血无肝期平均为15.6±3.2 min，术后动物苏醒，肝脏恢复血供，并有胆汁流出，移植成功.
2.2 肝移植对转氨酶的影响 见表1.
表1 实验动物肝功检测结果(n =10)
| 对照 | 肝移植 | 肝移植+法莫替丁OLT+Famotidine | |||||
| 1 h | 24 h | 72 h | 1 h | 24 h | 72 h | ||
| ALT | 63±13 | 189±36a | 453±67a | 387±45a | 177±28a | 426±53a | 356±41a |
| AST | 85±26 | 241±55b | 632±10b | 412±54b | 228±40b | 397±57b | 341±39b |
, http://www.100md.com
aP <0.01，bP <0.01 vs 对照.
2.3光镜观察结果 光镜下胃黏膜组织结构变化主要为充血、水肿，部分大鼠胃黏膜形成溃疡、糜烂，但病变局限于黏膜浅层，呈灶性分布，部分大鼠可见黏膜上皮脱落. 炎细胞浸润程度不等，可见嗜酸性粒细胞及中性粒细胞浸润.
2.4透射电镜观察结果 透射电镜下可见细胞水肿，线粒体肿胀，线粒体嵴模糊不清，大量的滑面内质网扩张，核膜不清，染色质浓集，可见浆细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性细胞浸润，部分大鼠可见壁细胞染色质变淡，核出现溶解，细胞器空化，核膜不清，以上变化水肿以移植后1 h为主，坏死性变化以术后24 h为主，72 h组和治疗组鼠胃黏膜病变程度均有减轻.
, 百拇医药
3 讨论以手术方法植入一个或部分健康的肝脏，从而获得肝功能的正常恢复，称为肝移植. 肝移植起始于1950年，迄今已50 a. 目前，肝移植作为一种治疗终末期肝病的临床手段在全世界广泛应用. 已有上百家肝移植中心分布在全球，肝移植的总例数已超过3万例. 肝移植的效果也有了明显的改进，最长存活者已超过25 a，大多数存活5 a以上的患者都过着正常生活.
肝移植治疗肝脏疾病取得了满意的效果，但肝移植必然要阻断门静脉血流，造成胃肠道淤血，势必对胃黏膜造成损伤，特别是近年来肝移植用于治疗门脉高压症[8-13]，许多作者发现肝移植术无论从降低门脉压力、预防术后再出血，提高存活率等各方面都优于常规的断流及分流手术，得到广泛应用[14-18]. 而门脉高压常伴有不同程度的门脉高压性胃炎，阻断门静脉造成的胃肠道淤血势必加重对胃黏膜的损伤，需要作进一步的研究.
本实验结果表明:肝移植后，胃黏膜组织出现充血、水肿、部分大鼠胃黏膜有溃疡形成，与对照组比较表明肝移植缺血再灌注对胃黏膜造成损伤，胃黏膜病变以炎症性变为主，尽管病变局限在黏膜浅层，但仍可形成黏膜的出血，部分胃黏膜形成溃疡，是造成术后患者上消化道出血的主要原因. 肝移植肝缺血再灌注造成胃黏膜损伤的原因，作者认为与阻断门脉及肝动脉造成胃肠道淤血，局部缺氧，引起氧自由基及肿瘤坏死因子，白介素类物质增多，造成对胃黏膜的损害有关.透射电镜下见细胞内线粒体肿胀、嵴模糊不清，大量滑面内质网扩张，核膜不清，染色质浓集，并有炎性细胞浸润，同样支持胃黏膜在移植后出现损伤的结论.
, 百拇医药
实验结果表明，水肿性改变以术后1 h为主，而24 h主要表现为坏死性变化，72 h和法莫替丁治疗组，胃黏膜病变程度均有减轻，提示我们对移植后的胃黏膜损伤的预防及治疗应在术前进行，并应持续治疗3 d以上，法莫替丁治疗，由于抑制了胃液的分泌，减少了胃黏膜的损伤因素，减轻了对胃黏膜的损伤. 起到了胃黏膜的保护作用.
总之，通过对正常鼠肝移植后胃黏膜病理改变的观察，我们发现肝移植伴随远隔器官-胃黏膜的损伤，需要我们在临床工作中加以预防治疗.
4 参考文献1 付福民. 大鼠原位肝移植方法探讨及免疫反应的观察. 中华器官移植杂志 1987;8:50-51
2 曾琪华,孙君泓,吴孟超. 三袖套法大鼠原位肝移植. 中华器官移植杂志 1989;10:159-161
3 Putnam CW,Porter KA, Weil R 3rd, Reid HA, Starzl TE. Liver transplantation for Budd chiari syndrome.
, 百拇医药
JAMA 1976;236:1142-1146
4 Glenn H. Liver transplantation for the Budd chiari syndrome. Ann Sury 1990;211:43-46
5 Knoop M, Lemmens HP, Bechstein WO, Blumhardt G, Schattenfroh N, Keck H, Neuhaus P. Treatment of Budd chiari
syndrome with ortho topic liver transplantation and long-term anti loagulation. Clic Transplant 1994;8:67-72
6 陈大志,刘爱武,陈嘉薇. 原位肝移植后门脉高压和脾功能亢进的恢复过程. 中华器官移植杂志 1998;10:240-242
, 百拇医药
7 夏穗生. 我国肝移植现状. 世界华人消化杂志 1999;7:645-646
8 Kasahara M, Ohwada S,Takeichi T,Kaneko H,Tomomasa T,Morikawa A,Yonemura K,Asonuma K,Tanaka K,Kobayashi K,Saheki T,Takeyoshi I,Morishita Y.Living related liver transplantation for type II citrullinemia using a graft from
heterozygote donor. Tansplantation 2001;71:157-159
9 Kim YS,Moon JI,Jeong HJ,Kim MS,Kim SI, Choi KH, Lee HY,Han DS, Park K.Live donor renal allograft in end-stage renal
, 百拇医药
failure patients from immunoglobulin A nephropathy. Transplantation 2001; 71:233-238
10 Sugawara Y, Makuuchi M,Takayama T,Imamura H,Dowaki S, Mizuta K,Kawarasaki H, Hashizume K.Small-for-size grafts
in living-related liver transplantation. J Am Coll Surg 2001;192:510-513
11 Colle I,Van Vlierberghe H, Troisi R, De Hemptinne B,De Vos M.Living related adult-to-adult liver transplantation: which
, http://www.100md.com
patient should benefit from this technique? Acta Gastroenterol Beelg 2001;64:6-8
12 Hui AM,Makuuchi M,Takayama T,Sano K,Kubota K,Harihara Y,Matsunami H.Left hemihepatectomy in living donors with a
thick middle hepatic vein draining the caudal half of the right liver. Transplantation 2000;69:1499-1501
13 Kiuchi T, Kasahara M, Uryuhara K, Inomata Y,Uemoto S,Asonuma K,Egawa H,Fujita S,Hayashi M,Tanaka K. Impact of graft
, http://www.100md.com
size mismatching on graft prognosis in liver transplantation from living donors. Transplantation 1999;67:321-327
14 次秀丽,王宝恩, 张淑文, 张宁宁. lps+tnf致休克大鼠胃肠运动及屏障功能的改变. 世界华人消化杂志 1999;7:510-512
15 Kamada N,Calne RY.Orthotopic liver transplantation in the rat.technique using cuff for portal vein anastomosis and
biliary drainage. Transplantation 1979;28:47-50
16 Guan WX,Dou KF,Li KZ, Gao ZQ,Fu YC. Long term survivor of living related liver transplantation. Zhongguo Putong Waike
Zazhi 2000;9:64-67
17 朱金照,杨国汉,冷恩仁, 陈东风. 中药的促胃肠动力作用. 世界华人消化杂志 1999;7:689-690
18 严家春, 陈文笔, 马勇, 孙新华. 试论肝硬变的组织病理学分期. 世界华人消化杂志 1999;7:841-844, http://www.100md.com(褚延魁,马庆久,鲁建国,刘 维,何显力,杜锡林,乔 庆,王胜智)
