雷公藤单体T10对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用及机制研究
帕金森病(PD)是一种多发于中老年人的中枢神经系统退变性疾病。近来研究发现氧化应激和线粒体膜电位下降在多巴胺能(DA)神经元的死亡过程中发挥了非常重要的作用。从而把减轻氧化应激作为药物作用的靶点之一,用于神经保护药物的筛选。雷公藤内酯醇(T10)具有与免疫抑制剂环孢菌素A(CsA)相似的神经保护作用,但其机制尚不清楚。北京大学神经科学研究所以谷氨酸为工具药建立帕金森病(PD)的氧化应激模型,观察T10的保护作用并初步探讨其作用机制。r:%t), 百拇医药
方法:分别用10-10、10-9摩尔/升的T10和/或10、50摩尔/升谷氨酸处理PC12细胞24小时,MTT法检测细胞的活力,并用AnnexinV-FITC和PI对活细胞进行双标,流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。分别采用荧光探剂2’7’-二氯荧光素乙酰乙酸盐和JC1定量检测细胞内活性氧和线粒体膜电位水平以探讨其作用机制。结果:谷氨酸处理PC12细胞24小时,可引起细胞的凋亡和坏死,细胞内活性氧形成明显增加,线粒体膜电位下降。而用10-10或10-9摩尔/升的T10预保护30分钟可明显减轻PC12细胞的损伤,并抑制细胞内活性氧的形成和线粒体膜电位下降。r:%t), 百拇医药
结论:10-10或10-9摩尔/升的T10能有效地拮抗谷氨酸对PC12细胞的损伤作用。其作用机制可能与抑制谷氨酸诱导的细胞内活性氧自由基的生成和线粒体膜电位下降有关。r:%t), 百拇医药
摘自《北京大学学报(医学版)》2003年第35卷第3期(《北京大学学报(医学版)》 )
方法:分别用10-10、10-9摩尔/升的T10和/或10、50摩尔/升谷氨酸处理PC12细胞24小时,MTT法检测细胞的活力,并用AnnexinV-FITC和PI对活细胞进行双标,流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。分别采用荧光探剂2’7’-二氯荧光素乙酰乙酸盐和JC1定量检测细胞内活性氧和线粒体膜电位水平以探讨其作用机制。结果:谷氨酸处理PC12细胞24小时,可引起细胞的凋亡和坏死,细胞内活性氧形成明显增加,线粒体膜电位下降。而用10-10或10-9摩尔/升的T10预保护30分钟可明显减轻PC12细胞的损伤,并抑制细胞内活性氧的形成和线粒体膜电位下降。r:%t), 百拇医药
结论:10-10或10-9摩尔/升的T10能有效地拮抗谷氨酸对PC12细胞的损伤作用。其作用机制可能与抑制谷氨酸诱导的细胞内活性氧自由基的生成和线粒体膜电位下降有关。r:%t), 百拇医药
摘自《北京大学学报(医学版)》2003年第35卷第3期(《北京大学学报(医学版)》 )