胃液抗Hp IgA测定对Hp根除治疗效果的判断
谢勇,吕农华, 黄德强,陈江, 徐萍,王崇文,江西医学院一附院消化研究所 江西省南昌市 330006
项目负责人:谢勇, 330006, 江西省南昌市永外正街17号,江西医学院一附院消化研究所. xieyong-med@163.net
收稿日期:2002-12-24 接受日期:2003-01-03
摘要
目的:为探讨胃液抗HpIgA测定对Hp根除治疗效果判断的价值.
方法:采用间接ELISA法检测了65患者Hp根除前后胃液抗HpIgA.
结果:(1)Hp根除后胃液抗HpIgA含量显著低于治疗前(0.465和0.173,P<0.001); (2)Hp根除后胃液抗HpIgA阳性率由治疗前的94.29%降至22.86 % (P<0.001); (3)Hp未根除者及Hp阴性者其胃液中抗HpIgA在治疗前后无显著差异(P >0.05).
结论:胃液中抗HpIgA含量能反映当时胃内Hp感染情况,可作为Hp是否根除的判断标志.
谢勇,吕农华, 黄德强,陈江, 徐萍,王崇文. 胃液抗HpIgA测定对Hp根除治疗效果的判断.世界华人消化杂志 2003;11(11):1818-1820
0 引言幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,简称Hp)感染与胃炎、消化性溃疡和胃癌的关系日益受到人们的重视[1-4],根除Hp可改善胃黏膜炎症,预防溃疡复发,降低胃癌发病率[5-7],因此监测抗Hp治疗效果具有重要意义.我们及国外许多学者的研究已证实Hp感染可刺激胃黏膜局部产生特异性抗HpIgA[8-12],IgA的半衰期比IgG短,胃液中抗HpIgA是否会随着Hp的根除而消失这方面的研究报道不多.本文采用测定胃液中抗HpIgA用于Hp根除治疗后的监测,取得了良好的效果,现报道如下.
1 材料和方法
1.1 材料 随机选择本院胃镜检查者65例,经胃镜活检孔吸取胃液4-5mL,混有血液者弃用.胃液取出后立即用碳酸氢钠调pH至7,置-80°C待测,并取活检黏膜数块,做Hp培养、涂片革兰氏染色镜检Hp和病理检查.所有患者抗Hp治疗停药1mo后复查胃镜,复查时再次取胃液和黏膜做同样检查.
1.2方法
1.2.1 胃黏膜内Hp菌检测 活检黏膜直接涂片检查及Hp的分离培养鉴定均参照张振华etal [13] 所报道的方法.细菌培养阳性或涂片中见大量典型细菌者方确认阳性,二者均为阴性者方确认为阴性.
1.2.2 ELISA 方法 从患者胃黏膜中培养出的7株Hp菌分离纯化,超声粉碎后在4°C下15000 g离心30min,取上清蛋白定量后作抗原.该抗原用SDS-PAGE法分析主要蛋白带在120kD、63 kD、28kD、94 kD. 用50mg/mL的抗原包被聚苯乙稀反应板,用间接ELISA法测定,每板均设标准阳性和标准阴性对照,将二者A值比值作为质控,每板之间此值的变异系数小于5%.
1.2.3 吸收抑制试验 用7例在ELISA试验中高效价抗HpIgA的胃液混合后,分别用Hp,空肠弯曲菌(Cj)及大肠杆菌完整的细菌和Hp抗原吸收后,按上述方法做ELISA试验.
1.2.4 结果判断 结果用待测标本A值与标准阳性A值之比来表示.阳性临界值的确定:以20例Hp阴性者胃液经Hp菌特异黏咐后,按上述方法进行ELISA测定,以其均数加3倍标准差定为阳性临界值,该值大于或等于0.145为阳性.该方法与细菌学检测结果比较其特异性、敏感性和诊断符合率分别为92.9%、96.4 %和95.3%[9].
1.2.5 Hp根治方法及根除标准 洛赛克20mg,1次/d,甲硝唑200mg,3次/d,阿莫西林500mg,3次/d,2wk为1疗程.治疗结束后1mo复查胃镜,分别取胃体和胃窦黏膜做Hp检测,两处均阴性者为Hp根除.
统计学处理 均数间比较用 t 检验,计数资料用x2检验.
2 结果
2.1 抗Hp治疗前后胃液中抗HpIgA变化 65例患者中55例阳性者经抗Hp治疗后35例Hp根除,其中27例胃液抗HpIgA为阴性,8例仍为阳性.20例Hp未根除者19例胃液中抗HpIgA为阳性,1例阴性,10例Hp阴性者复查时Hp仍为阴性.表1反映了治疗前后胃液中抗HpIgA变化. 经抗Hp治疗Hp根除后其胃液抗HpIgA含量和阳性率显著低于治疗前(P<0.001),而Hp未根除者及Hp阴性者其胃液中抗HpIgA在治疗前后无显著差异(P>0.05). 另外胃液抗HpIgA含量,在治疗前Hp根除组与未根除组之间无差异(P>0.05),与Hp阴性组之间有显著差异(P<0.01),而治疗后已根除组显著低于未根除组(P<0.01),虽稍高于Hp阴性组,但无统计学意义(P>0.05).
表1 抗Hp治疗前后胃液抗HpIgA结果比较
组别 | n | 治疗前 | 治疗后 | P值 | ||
阳性数 (%) | 阳性数 (%) | |||||
Hp已根除 | 35 | 0.465±0.184 | 33 (94.29) | 0.173±0.074 | 8 (22.86) | <0.001 |
Hp未根除 | 20 | 0.458±0.197 | 19 (95) | 0.474±0.201 | 19 (95) | >0.05 |
Hp阴性 | 10 | 0.113±0.039 | 1 (10) | 0.109±0.035 | 1 (10) | >0.05 |
2.2吸收抑制试验结果 无论是完整的Hp菌还是超声粉碎提取的Hp抗原与Hp阳性者胃液共同温育后都能使胃液中抗HpIgA效价明显下降,而用大肠杆菌和Cj吸收后的血清和胃液抗体仅有少许下降,此结果证明本试验具有特异性.
3 讨论Hp感染不但可引起机体的全身免疫反应,而且可引起胃肠道的局部免疫反应,我们以前的研究[8,9]表明胃液中抗HpIgA可准确反映内胃内Hp感染情况,其对Hp感染诊断的特异性.敏感性和诊断符合率均高于血清学诊断.Hanvivatvong et al [10]的研究也表明胃液中抗HpIgA诊断Hp感染具有较高的特异性.Perez-Perez et al [11]的研究也发现s1/m1型VacA阳性的Hp感染者,胃液中含有高水平的抗VacAIgA. 而本研究进一步表明胃液中抗HpIgA与血清中Hp抗体不同,Hp根除1mo后,胃液内抗HpIgA迅速下降,降幅在60%以上. Koizumiet al [14]观察了Hp根除前后血清中抗HpIgG水平变化,结果Hp成功根除后3mo,血清中抗HpIgG下降约50 %,可见Hp根除后血液中抗HpIgG含量下降的速度明显比胃液中抗HpIgA慢,这可能是由于IgA在体内的半衰期短.王丕龙etal [15]的研究表明血清中IgA的变化较IgG快也证实了这一点.此外胃液中抗HpIgA为分泌型,其由胃黏膜内的浆细胞分泌,而胃黏膜上皮更新快,当Hp根除后,抗原刺激不再存在,原有的黏膜上皮更新后,抗HpIgA即不再产生,因此随着Hp的根除其含量迅速下降,这使其明显的优于血清学检测,可用于判断Hp是否根除.
抗Hp治疗后Hp是否根除的检测方法目前主要有以下几种:通过胃镜取活组织进行细菌培养、组织学检测、快速尿素酶试验和PCR检测等.这些方法均需要进行胃镜检查,有一定痛苦,患者不易接受,此外抗Hp治疗后Hp定植部位上移和Hp呈灶性分布易造成假阴性结果;14C和13C尿素呼吸试验,无创伤,患者依从性好,结果可靠,但是前者有一定的放射污染,后者价格昂贵,不易普及;血清Hp抗体测定在Hp根除后仍持续一段时间阳性,不能反映胃内当时Hp感染情况,因此不宜作为Hp是否根除的标志.我们的研究发现Hp根除后患者胃液内抗HpIgA含量和阳性率均显著下降,而未根除Hp者胃液中抗HpIgA无显著变化,说明胃液中抗HpIgA含量能反映当时胃内Hp感染情况,可作为Hp是否根除的判断标志.
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