慢性乙型肝炎患者血清内毒素、IL-4、IL-18水平的变化
唐宝璋,燕奎华, 黄礼云,庄林, 游晶,陈红英,昆明医学院第一附属医院传染科 云南省昆明市 650032
黄礼云,云南省文山州人民医院 云南省文山市 663000
庄林,昆明市第三人民医院 云南省昆明市 650041
项目负责人:唐宝璋,650032, 云南省昆明市,昆明医学院第一附属医院传染科.
电话:0871-5324888-2673
收稿日期:2003-05-14 接受日期:2003-06-02
, 百拇医药
摘要
目的:研究慢性乙型肝炎患者病程中血清内毒素(LPS)、IL-4和IL-18水平的变化，探讨他们在发病中的作用.
方法:采用鲎试剂基质显色法，检测血清LPS;用ELISA法检测血清IL-4、IL-18.同时检测ALT等生化指标和五型肝炎病原学指标.慢性乙型肝炎35例，健康对照30名.
结果:血清LPS、IL-4和IL-18水平于慢性乙型肝炎活动期及缓解期均显著高于健康对照(t=2.656，P<0.01)，活动期明显高于缓解期(t=2.650，P<0.01). 活动期三项指标均呈正相关(t=2.672，P<0.01).
, 百拇医药
结论:慢性乙型肝炎病程中内毒素、IL-4和IL-18水平的变化及其相互调节，影响着慢性乙型肝炎发病和转归.
唐宝璋,燕奎华, 黄礼云,庄林, 游晶,陈红英. 慢性乙型肝炎患者血清内毒素、IL-4、IL-18水平的变化.世界华人消化杂志 2003;11(12):2041-2042
0 引言近年来内毒素及细胞因子形成的免疫网络在乙型肝炎(乙肝)发病机制中的研究越来越受到重视.发现各型乙肝常有不同程度的内毒素血症.一些研究显示免疫细胞分泌的细胞因子形成的网络在乙肝的发生、发展和转归中发挥着重要作用.新近发现的IL-18对乙肝发病也有影响[1].本文旨在对慢性乙型肝炎患者病程中血清内毒素、IL-4、IL-18水平变化及其相互关系作一初步研究，以探讨他们在发病中的作用.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 全部35例均为住院患者.男30例，女5例，年龄11-78岁，平均39.9±15.6岁.诊断按1995年(北京)第五次全国传染病与寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎标准，35例慢性乙型肝炎中，轻度8例，中度17例，重度10例.并设健康人30名为正常对照.
1.2 方法 全部患者入院后抽取晨间空腹静脉血3mL，2 h内分离血清，置于-30°C保存待检.内毒素检测采用鲎试验三肽基质显色法，试剂购自上海伊华临床医学科技公司.同时用ELISA法检测IL-4、IL-18，试剂购自美国Sigma公司.ALT等指标由本院生化室检测.用ELISA法检测甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒学标志，均为单纯HBV现症感染.病程进入缓解期时，抽血再次检测上述指标.健康对照也同法检测相同指标.
, 百拇医药
统计学处理 两组间均数比较用t检验，比较两组间相关性用直线相关分析.
2 结果
2.1 健康对照与慢性乙型肝炎患者病程中血清 LPS、IL-4、IL-18、ALT水平变化见表1.
表1 慢乙肝患者病程中血清四项指标检测值()
, 百拇医药
aP<0.01 vs 对照组;bP <0.01 vs 缓解期.* 未检测.
2.2相关性分析 活动期:LPS与IL-4、IL-18均呈正相关(r=0.718、0.883，P<0.01); IL-4与IL-18也呈正相关(r=0.854，P<0.01).
3 讨论肝病时，由于肝脏的屏障功能有轻重不等的损伤，使肠源性内毒素灭活不全，故出现不同程度的内毒素血症[2].IL-18是新发现的一种炎性细胞因子，可由多种细胞分泌，但主要由激活的单核巨噬细胞、肝kupffer细胞等产生，具有介导炎性损伤、免疫调节，抗病毒等多种生物学功能[3,4].在炎症反应中，IL-18mRNA以单核巨噬细胞表达为主，LPS可导致IL-18mRNA在外周血单个核细胞中的表达显著增加[5].HBV、HCV等病毒感染，内毒素刺激，均可激活宿主巨噬细胞产生更多成熟的IL-18[1].本文发现随肝脏炎症坏死程度不一升高不同.IL-18与IL-12相似，可激活Th1细胞，增强细胞免疫功能，诱生IFN-g，还活NK细胞，增强其靶细胞杀伤作用，促进对HBV清除，在清除病毒过程中，同时可引起组织免疫损伤，加重疾病发展[6-8].IL-18是诱导LPS肝损害的重要递质[9].内毒素可激活巨噬细胞产生更多IL-18，二者互为因果导致慢性乙型肝炎转为重型肝炎.
, 百拇医药
IL-4为Th2细胞因子，在IL-4产生增多，Th2促进体液免疫占优势时，乙肝易慢性化[10].IL-4也是炎症修复因子，在肝炎病变中，有炎症因子IL-18被大量激活，同时炎症修复因子也被激活.因此本文结果显示慢性乙型肝炎活动期LPS、IL-4和IL-18均明显升高，其变化呈显著正相关，三者可相互调节，共同参与发病.
本研究还表明，经护肝、支持疗法治疗后病情好转，随ALT下降，病程进入缓解期，炎症减轻，病变趋于静息，LPS、IL-4、IL-18均显著降低.部分原因可能与IL-18的抗感染、抗病毒作用有关，使HBV复制水平降低.Sakao et al [9]认为IL-18在介导LPS肝损害的同时，还可显著下调TNF-a的产生，因此病变减轻.
本研究显示在慢性乙型肝炎病程中，内毒素、IL-4、IL-18的变化及其相互调节影响着慢性乙型肝炎的发病和转归，IL-18的抗HBV作用值得研究.
, http://www.100md.com
4 参考文献1 Chisari FV, Ferrari C. Hepatitis B virus immunopathogenesis. AnnuRev Immunol 1995;13:29-60
2 Lin RS, Lee FY, Lee SD, Tsai YT, Lin HC, Lu RH, Hsu WC, Huang CC,Wang SS, Lo KJ. Endotoxemia in patients with
chroni liver diseases: relationship toseverity of liver diseases, presence of esophageal varices, andhyperdynamic
circulation. J Hepatol 1995;22:165-172
, 百拇医药
3 Dinarello CA. Interleukin-18. Methods 1999;19:121-132
4 Tominaga K, Yoshimoto T, Torigoe K, Kurimoto M, Matsui K, Hada T,Okamura H, Nakanishi K. IL-12 synergizes with IL-
18 or IL-lbfor IFN-gamma production from human T cells.Into Immunol 2000; 12:151-160
5 Klein SA, Ottmann OG, Ballas K, Dobmeyer TS, Pape M, Weidmann E,Hoelzer D, Kalina U. Quantification of human
, http://www.100md.com
interleukin 18 mRNA expression bycompetitive reverse transcriptase polymerase chain reaction. Cytokine
1999;11:451-458
6 Tanaka M, Itai T, Adachi M, Nagata S. Downregulation of Fas ligandby shedding. Nat Med 1998;4:31-36
7 Guidotti LG, Ishikawa T, Hobbs MV, Matzke B, Schreiber R, ChisariFV. Intracellular inactivation of the hepatitis B virus
by cytotoxic T lymphocytes. Immunity 1996;4:25-36
, http://www.100md.com
8 Penna A, Del Prete G, Cavalli A, Bertoletti A, D'Alios MM,Sorrentino R, D扐matoM, Boni C, Pilli M, Fiaccadori F, Ferrari
C. Predominant T-helper 1 cytokine profileof hepatitis B virus nucleocapsid-specific T cells in acute self-limitedhepatitis
B. Hepatology 1997;25:1022-1027
9 Sakao Y, Takeda K, Tsutsui H, Kaissho T, Nomura F, Okamuea H,Nakanishi K, Akira S. IL-18-deficient mice are resistant
to endotoxin-induced liver injury buthighly susceptible to endotoxin shock. Int Immunol 1999;11:471-480
10 Milich DR. Influence of T-helper cell subsets and crossregulationin hepatitis B virus infection. J Viral Hepat
1997;4(Suppl):248-259, http://www.100md.com( 唐宝璋, 燕奎华, 黄礼云, 庄 林, 游 晶, 陈红英)
黄礼云,云南省文山州人民医院 云南省文山市 663000
庄林,昆明市第三人民医院 云南省昆明市 650041
项目负责人:唐宝璋,650032, 云南省昆明市,昆明医学院第一附属医院传染科.
电话:0871-5324888-2673
收稿日期:2003-05-14 接受日期:2003-06-02
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摘要
目的:研究慢性乙型肝炎患者病程中血清内毒素(LPS)、IL-4和IL-18水平的变化，探讨他们在发病中的作用.
方法:采用鲎试剂基质显色法，检测血清LPS;用ELISA法检测血清IL-4、IL-18.同时检测ALT等生化指标和五型肝炎病原学指标.慢性乙型肝炎35例，健康对照30名.
结果:血清LPS、IL-4和IL-18水平于慢性乙型肝炎活动期及缓解期均显著高于健康对照(t=2.656，P<0.01)，活动期明显高于缓解期(t=2.650，P<0.01). 活动期三项指标均呈正相关(t=2.672，P<0.01).
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结论:慢性乙型肝炎病程中内毒素、IL-4和IL-18水平的变化及其相互调节，影响着慢性乙型肝炎发病和转归.
唐宝璋,燕奎华, 黄礼云,庄林, 游晶,陈红英. 慢性乙型肝炎患者血清内毒素、IL-4、IL-18水平的变化.世界华人消化杂志 2003;11(12):2041-2042
0 引言近年来内毒素及细胞因子形成的免疫网络在乙型肝炎(乙肝)发病机制中的研究越来越受到重视.发现各型乙肝常有不同程度的内毒素血症.一些研究显示免疫细胞分泌的细胞因子形成的网络在乙肝的发生、发展和转归中发挥着重要作用.新近发现的IL-18对乙肝发病也有影响[1].本文旨在对慢性乙型肝炎患者病程中血清内毒素、IL-4、IL-18水平变化及其相互关系作一初步研究，以探讨他们在发病中的作用.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 全部35例均为住院患者.男30例，女5例，年龄11-78岁，平均39.9±15.6岁.诊断按1995年(北京)第五次全国传染病与寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎标准，35例慢性乙型肝炎中，轻度8例，中度17例，重度10例.并设健康人30名为正常对照.
1.2 方法 全部患者入院后抽取晨间空腹静脉血3mL，2 h内分离血清，置于-30°C保存待检.内毒素检测采用鲎试验三肽基质显色法，试剂购自上海伊华临床医学科技公司.同时用ELISA法检测IL-4、IL-18，试剂购自美国Sigma公司.ALT等指标由本院生化室检测.用ELISA法检测甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒学标志，均为单纯HBV现症感染.病程进入缓解期时，抽血再次检测上述指标.健康对照也同法检测相同指标.
, 百拇医药
统计学处理 两组间均数比较用t检验，比较两组间相关性用直线相关分析.
2 结果
2.1 健康对照与慢性乙型肝炎患者病程中血清 LPS、IL-4、IL-18、ALT水平变化见表1.
表1 慢乙肝患者病程中血清四项指标检测值()
| 组别 | n | LPS (pg/mL) | IL-4(pg/mL) | IL-18(pg/mL) | ALT(U/L) |
| 健康对照组 | 30 | 0 | 23.86±5.16 | 36.83±5.56 | NO* |
| 慢乙肝组 | |||||
| 活动期 | 35 | 46.97±13.00ab | 58.71±9.37ab | 149.22±66.93ab | 222.61±220.12b |
| 缓解期 | 35 | 23.73±5.88a | 33.83±6.46a | 53.54±20.85a | 72.10±40.18 |
, 百拇医药
aP<0.01 vs 对照组;bP <0.01 vs 缓解期.* 未检测.
2.2相关性分析 活动期:LPS与IL-4、IL-18均呈正相关(r=0.718、0.883，P<0.01); IL-4与IL-18也呈正相关(r=0.854，P<0.01).
3 讨论肝病时，由于肝脏的屏障功能有轻重不等的损伤，使肠源性内毒素灭活不全，故出现不同程度的内毒素血症[2].IL-18是新发现的一种炎性细胞因子，可由多种细胞分泌，但主要由激活的单核巨噬细胞、肝kupffer细胞等产生，具有介导炎性损伤、免疫调节，抗病毒等多种生物学功能[3,4].在炎症反应中，IL-18mRNA以单核巨噬细胞表达为主，LPS可导致IL-18mRNA在外周血单个核细胞中的表达显著增加[5].HBV、HCV等病毒感染，内毒素刺激，均可激活宿主巨噬细胞产生更多成熟的IL-18[1].本文发现随肝脏炎症坏死程度不一升高不同.IL-18与IL-12相似，可激活Th1细胞，增强细胞免疫功能，诱生IFN-g，还活NK细胞，增强其靶细胞杀伤作用，促进对HBV清除，在清除病毒过程中，同时可引起组织免疫损伤，加重疾病发展[6-8].IL-18是诱导LPS肝损害的重要递质[9].内毒素可激活巨噬细胞产生更多IL-18，二者互为因果导致慢性乙型肝炎转为重型肝炎.
, 百拇医药
IL-4为Th2细胞因子，在IL-4产生增多，Th2促进体液免疫占优势时，乙肝易慢性化[10].IL-4也是炎症修复因子，在肝炎病变中，有炎症因子IL-18被大量激活，同时炎症修复因子也被激活.因此本文结果显示慢性乙型肝炎活动期LPS、IL-4和IL-18均明显升高，其变化呈显著正相关，三者可相互调节，共同参与发病.
本研究还表明，经护肝、支持疗法治疗后病情好转，随ALT下降，病程进入缓解期，炎症减轻，病变趋于静息，LPS、IL-4、IL-18均显著降低.部分原因可能与IL-18的抗感染、抗病毒作用有关，使HBV复制水平降低.Sakao et al [9]认为IL-18在介导LPS肝损害的同时，还可显著下调TNF-a的产生，因此病变减轻.
本研究显示在慢性乙型肝炎病程中，内毒素、IL-4、IL-18的变化及其相互调节影响着慢性乙型肝炎的发病和转归，IL-18的抗HBV作用值得研究.
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4 参考文献1 Chisari FV, Ferrari C. Hepatitis B virus immunopathogenesis. AnnuRev Immunol 1995;13:29-60
2 Lin RS, Lee FY, Lee SD, Tsai YT, Lin HC, Lu RH, Hsu WC, Huang CC,Wang SS, Lo KJ. Endotoxemia in patients with
chroni liver diseases: relationship toseverity of liver diseases, presence of esophageal varices, andhyperdynamic
circulation. J Hepatol 1995;22:165-172
, 百拇医药
3 Dinarello CA. Interleukin-18. Methods 1999;19:121-132
4 Tominaga K, Yoshimoto T, Torigoe K, Kurimoto M, Matsui K, Hada T,Okamura H, Nakanishi K. IL-12 synergizes with IL-
18 or IL-lbfor IFN-gamma production from human T cells.Into Immunol 2000; 12:151-160
5 Klein SA, Ottmann OG, Ballas K, Dobmeyer TS, Pape M, Weidmann E,Hoelzer D, Kalina U. Quantification of human
, http://www.100md.com
interleukin 18 mRNA expression bycompetitive reverse transcriptase polymerase chain reaction. Cytokine
1999;11:451-458
6 Tanaka M, Itai T, Adachi M, Nagata S. Downregulation of Fas ligandby shedding. Nat Med 1998;4:31-36
7 Guidotti LG, Ishikawa T, Hobbs MV, Matzke B, Schreiber R, ChisariFV. Intracellular inactivation of the hepatitis B virus
by cytotoxic T lymphocytes. Immunity 1996;4:25-36
, http://www.100md.com
8 Penna A, Del Prete G, Cavalli A, Bertoletti A, D'Alios MM,Sorrentino R, D扐matoM, Boni C, Pilli M, Fiaccadori F, Ferrari
C. Predominant T-helper 1 cytokine profileof hepatitis B virus nucleocapsid-specific T cells in acute self-limitedhepatitis
B. Hepatology 1997;25:1022-1027
9 Sakao Y, Takeda K, Tsutsui H, Kaissho T, Nomura F, Okamuea H,Nakanishi K, Akira S. IL-18-deficient mice are resistant
to endotoxin-induced liver injury buthighly susceptible to endotoxin shock. Int Immunol 1999;11:471-480
10 Milich DR. Influence of T-helper cell subsets and crossregulationin hepatitis B virus infection. J Viral Hepat
1997;4(Suppl):248-259, http://www.100md.com( 唐宝璋, 燕奎华, 黄礼云, 庄 林, 游 晶, 陈红英)
