胃肠激素与不同类型反流所致食管炎的相关性
王雯,张志坚, 林克荣,南京军区福州总医院消化内科福建省福州市 350025
李兆申,许国铭,中国人民解放军第二军医大学长海医院消化内科上海市 200433
福建省青年科技人才创新项目,No. 2002J059
项目负责人:王雯,350025, 福建省福州市西二环北路156号,南京军区福州总医院消化内科. wangw68@medmail.com.cn
电话:0591-2859371
, 百拇医药 收稿日期:2003-10-10 接受日期:2003-11-19
摘要
目的:通过动物实验探讨胃肠激素与不同类型反流引起食管炎的相关性.
方法:用不同手术制作单纯胃食管反流(G组)、单纯十二指肠食管反流(D组)、十二指肠胃混合食管反流(DG组)及无反流对照组(C组)动物模型，于术后不同时期取静脉血，用放射免疫法测定血浆促胃液素(GAS)和血管活性肠肽(VIP)含量.
结果:反流性食管炎程度由轻至重依次为D组、DG组、G组.术后1 wk时D组血浆GAS含量(6.1pg/ml)较对照组 (26.5pg/ml)明显降低(P<0.01)，G组(48.3pg/ml)和DG组(46.9pg/ml)升高(P<0.05)，4wk时仍维持相同趋势.D组、DG组血浆VIP含量在术后1wk时无明显变化，4wk时2组VIP含量(117.4pg/ml，88.1pg/ml)均高于对照组(P<0.01，P<0.05)，而G组1wk时轻度降低，4wk时升高(75.6pg/ml，P<0.05 vs C组 33.8pg/ml)，D组与G组间比较差别显著(P<0.05).
, 百拇医药
结论:不同反流类型引起的GAS和VIP改变不同，可能与其所致食管炎的程度不同有关.胃肠激素与反流性食管炎的发生密切相关.
王雯,李兆申, 许国铭,张志坚, 林克荣.胃肠激素与不同类型反流所致食管炎的相关性.世界华人消化杂志 2004;12(2):476-477
0 引言胃肠道可分泌多种神经肽类激素，其含量和活性异常可能与许多消化道疾病的发生有关，而许多消化道疾病又可导致胃肠激素分泌异常.但目前胃肠激素与反流性食管炎的关系研究较少，本研究通过动物实验了解不同反流所导致的反流性食管炎大鼠血浆内促胃液素(GAS)和血管活性肠肽(VIP)含量的变化，以探讨部分胃肠激素与大鼠反流性食管炎的相关性.
1 材料和方法
, 百拇医药
1.1 材料 健康SD大鼠80只，均为♂，体质量220-260 g，由上海必凯实验动物有限公司提供.GAS和VIP放免药盒由第二军医大学神经生物教研室提供.
1.2 方法
1.2.1 动物分组及模型制作 将SD大鼠随机分为4组:单纯胃食管反流组(G组)28只，单纯十二指肠食管反流组(D组)20只，胃十二指肠混合食管反流组(DG组)20只及无反流对照组(C组)12只.运用不同手术方式制作以上3种食管反流大鼠模型及对照组[1-2].于术后1 wk、4wk时分批开腹，取5mL下腔静脉血置于含EDTA二钠及抑肽酶的试管中，并取出大鼠食管行肉眼观察及常规病理切片染色、光镜观察.
1.2.2 血浆GAS和VIP含量测定 血标本以3000 r/min低温离心20min，取上清-20°C冻存备用.用放射免疫法测定血浆GAS和VIP含量.
, http://www.100md.com
统计学处理 数据用mean±SD表示，采用t检验.
2 结果
2.1 不同反流组食管大体形态及光镜检查结果 大体观察各反流组于术后逐渐出现食管下段黏膜充血、粗糙、糜烂、溃疡及“树皮样”黏膜增生白斑等病变，4wk时病变发生率分别为G组40.0%、D组100%、DG组89.5%，D组及DG组与G组比均有显著差别(P<0.01，P<0.05)，D组与DG组之间相差无统计学意义(P>0.05). 光镜下表现为食管壁炎症、糜烂溃疡及上皮过度增生，4wk时后者发生率分别为D组75.0%、DG组47.4%、G组15.0%、C组0，D组较DG组、G组均高(P<0.05，P<0.01)，DG组高于G组(P<0.05)，后者与C组相比无显著差异(P>0.05).
2.2 不同反流组血浆GAS和VIP含量变化 对照组2个时间点间血浆GAS和VIP含量无显著性变化.术后1 wk时D组血浆GAS含量明显较对照组降低，G组和DG组显著升高，4wk时D组血浆GAS仍较低，而G组升高程度较前轻度下降，DG组仍较高，但后2组间相比无显著差异.D组、DG组血浆VIP含量在术后1wk时无明显变化，术后4wk时2组血浆VIP含量均高于对照组，而G组1wk时较对照组轻度降低，4wk时显著增加，D组与G组间比较差别显著(表1).
, 百拇医药
表1 反流性食管炎大鼠血浆GAS和VIP含量变化(pg/ml)
, http://www.100md.com
aP<0.05, bP <0.01 vs 对照组;cP <0.05, dP <0.01 vs D组.
3 讨论反流性食管炎的发生主要与下食管括约肌(LES)和食管体、胃十二指肠功能异常有关，而调控胃肠功能的因素除交感神经、迷走神经外，近年受重视的还有非肾上腺能、非胆碱能神经及胃肠激素[3].反流引起的刺激和损伤又可能引起神经体液的一系列反应.本研究探讨了不同类型反流对食管黏膜的损伤作用及与大鼠体内胃肠激素变化的关系.
GAS具有调节胃肠道营养、运动和分泌的多种功能，他主要由胃窦黏膜中的G细胞分泌，其分泌受迷走神经、胃窦扩张、胃内容物的种类和酸度以及其他多种胃肠激素的复杂调控[4].本实验结果显示反流术后D组血浆GAS含量明显降低，这与全胃切除、缺失G细胞有关，而D组食管炎最为严重，可能与失去了促胃液素对食管黏膜的营养作用，以及GAS减少后食管体的蠕动减弱导致反流物停留在食管内的时间延长有一定关系.G组和DG组血浆GAS含量升高可能由于肠液反流至胃中，降低了胃内pH所引起，而4wk时G组GAS升高程度较1wk时轻度下降，可能酸反流至食管后刺激食管黏膜，通过负反馈机制抑制促胃液素的释放.提示GAS虽可致反流物酸性增加，但本身又能对食管黏膜具有一定保护作用，减少反流性食管炎的发生，尤其是对抗胆汁反流的损伤.而一旦食管黏膜受反流物损伤后，又对促胃液素的分泌起非常复杂的影响.
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VIP是消化道主要的非肾上腺素能、非胆碱能抑制性神经递质[5].血浆VIP浓度可反映非肾上腺素能、非胆碱能神经的功能改变，给小鼠静脉注射VIP可引起剂量依赖性的下食管括约肌压力(LESP)下降[6].有研究[7-8]显示反流性食管炎和Barrett食管患者血浆VIP水平较对照组显著升高，与LESP水平呈负相关，另一研究[9]发现酸反流引起的食管炎症反应可导致VIP神经纤维增生，从而引起上皮胚细胞增生增加，基底细胞层增厚.可见VIP与反流性食管炎的关系是非常错综复杂的.我们的研究结果显示G组血浆VIP含量在术后1wk时降低，4wk时增加，而术后4wk时D组、DG组血浆VIP含量显著高于对照组，可能的机制为早期酸反流对食管黏膜的刺激通过负反馈抑制VIP的合成或释放，以促进食管体蠕动、增加LES压力，减少酸反流.手术所致的较长时间的反流引起食管黏膜损伤炎症较重，反而使VIP释放增加，以加快食管上皮细胞的代偿增生.
总之，不同反流类型引起的大鼠血浆GAS和VIP改变不同，可能与其所致食管炎的程度不同有关，说明胃肠激素变化与反流性食管炎的发生密切相关.
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4 参考文献1 王雯, 李兆申,许国铭, 王烈,邹多武. 不同方式建成3种反流性食管炎模型.解放军医学杂志 2000;25:171-173
2 王雯, 李兆申,许国铭. 食管反流大鼠肿瘤诱发过程中抑癌基因mRNA表达的变化.世界华人消化杂志 2002;10:1048-1049
3 Hallgren A, Flemstrom G, Nylander O. Interaction between neurokininA,VIP, prostanoids and enteric nerves in regulation
of duodenal function. Am J Phsiol 1998;275(Pt 1):G95-103
4 周吕.胃肠生理学-基础与临床.第1版.北京: 科学出版社, 1991:101-104
, 百拇医药
5 Jin JG, Misra S, Grider JR, Makhlouf GM. Functional differencebetween SP and NKA: relaxation of gastric muscle by SP
is mediated by and VIP and NO. Am J Physiol 1993;264(4 Pt 1):G678-685
6 Guelrud M, Rossiter A, Souney PF, Rossiter G, Fanikos J, Mujica V.The effect of vasoactive intestinal polypeptide on the
lower esophageal sphincter in achalasia.Gastroenterology 1992;103:377-382
, http://www.100md.com
7 Rossiter A, Guelrud M, Souney PF, Mendoza S, Rossiter G, GelrudD.High vasoactive intestinal polypeptide plasma levels
in patients with barrett'sesophagus. Scand J Gastroenterol 1991;26:572-576
8 Kassim SK, El Touny M, El Guinaidy M, El Moghni MA, El Mohsen AA.Serum nitrates and vasoactive intestinal peptide in
patients with gastroesophageal refluxdisease. Clin Biochem 2002;35:641-646
9 Newton M, Kamm MA, Soediono PO, Milner P, Burnham WR, Burnstock G.Oesophageal epithelial innervation in health
and reflux oesophagitis. Gut 1999;44:317-322, http://www.100md.com( 王 雯, 李兆申, 许国铭, 张志坚, 林克荣)
李兆申,许国铭,中国人民解放军第二军医大学长海医院消化内科上海市 200433
福建省青年科技人才创新项目,No. 2002J059
项目负责人:王雯,350025, 福建省福州市西二环北路156号,南京军区福州总医院消化内科. wangw68@medmail.com.cn
电话:0591-2859371
, 百拇医药 收稿日期:2003-10-10 接受日期:2003-11-19
摘要
目的:通过动物实验探讨胃肠激素与不同类型反流引起食管炎的相关性.
方法:用不同手术制作单纯胃食管反流(G组)、单纯十二指肠食管反流(D组)、十二指肠胃混合食管反流(DG组)及无反流对照组(C组)动物模型，于术后不同时期取静脉血，用放射免疫法测定血浆促胃液素(GAS)和血管活性肠肽(VIP)含量.
结果:反流性食管炎程度由轻至重依次为D组、DG组、G组.术后1 wk时D组血浆GAS含量(6.1pg/ml)较对照组 (26.5pg/ml)明显降低(P<0.01)，G组(48.3pg/ml)和DG组(46.9pg/ml)升高(P<0.05)，4wk时仍维持相同趋势.D组、DG组血浆VIP含量在术后1wk时无明显变化，4wk时2组VIP含量(117.4pg/ml，88.1pg/ml)均高于对照组(P<0.01，P<0.05)，而G组1wk时轻度降低，4wk时升高(75.6pg/ml，P<0.05 vs C组 33.8pg/ml)，D组与G组间比较差别显著(P<0.05).
, 百拇医药
结论:不同反流类型引起的GAS和VIP改变不同，可能与其所致食管炎的程度不同有关.胃肠激素与反流性食管炎的发生密切相关.
王雯,李兆申, 许国铭,张志坚, 林克荣.胃肠激素与不同类型反流所致食管炎的相关性.世界华人消化杂志 2004;12(2):476-477
0 引言胃肠道可分泌多种神经肽类激素，其含量和活性异常可能与许多消化道疾病的发生有关，而许多消化道疾病又可导致胃肠激素分泌异常.但目前胃肠激素与反流性食管炎的关系研究较少，本研究通过动物实验了解不同反流所导致的反流性食管炎大鼠血浆内促胃液素(GAS)和血管活性肠肽(VIP)含量的变化，以探讨部分胃肠激素与大鼠反流性食管炎的相关性.
1 材料和方法
, 百拇医药
1.1 材料 健康SD大鼠80只，均为♂，体质量220-260 g，由上海必凯实验动物有限公司提供.GAS和VIP放免药盒由第二军医大学神经生物教研室提供.
1.2 方法
1.2.1 动物分组及模型制作 将SD大鼠随机分为4组:单纯胃食管反流组(G组)28只，单纯十二指肠食管反流组(D组)20只，胃十二指肠混合食管反流组(DG组)20只及无反流对照组(C组)12只.运用不同手术方式制作以上3种食管反流大鼠模型及对照组[1-2].于术后1 wk、4wk时分批开腹，取5mL下腔静脉血置于含EDTA二钠及抑肽酶的试管中，并取出大鼠食管行肉眼观察及常规病理切片染色、光镜观察.
1.2.2 血浆GAS和VIP含量测定 血标本以3000 r/min低温离心20min，取上清-20°C冻存备用.用放射免疫法测定血浆GAS和VIP含量.
, http://www.100md.com
统计学处理 数据用mean±SD表示，采用t检验.
2 结果
2.1 不同反流组食管大体形态及光镜检查结果 大体观察各反流组于术后逐渐出现食管下段黏膜充血、粗糙、糜烂、溃疡及“树皮样”黏膜增生白斑等病变，4wk时病变发生率分别为G组40.0%、D组100%、DG组89.5%，D组及DG组与G组比均有显著差别(P<0.01，P<0.05)，D组与DG组之间相差无统计学意义(P>0.05). 光镜下表现为食管壁炎症、糜烂溃疡及上皮过度增生，4wk时后者发生率分别为D组75.0%、DG组47.4%、G组15.0%、C组0，D组较DG组、G组均高(P<0.05，P<0.01)，DG组高于G组(P<0.05)，后者与C组相比无显著差异(P>0.05).
2.2 不同反流组血浆GAS和VIP含量变化 对照组2个时间点间血浆GAS和VIP含量无显著性变化.术后1 wk时D组血浆GAS含量明显较对照组降低，G组和DG组显著升高，4wk时D组血浆GAS仍较低，而G组升高程度较前轻度下降，DG组仍较高，但后2组间相比无显著差异.D组、DG组血浆VIP含量在术后1wk时无明显变化，术后4wk时2组血浆VIP含量均高于对照组，而G组1wk时较对照组轻度降低，4wk时显著增加，D组与G组间比较差别显著(表1).
, 百拇医药
表1 反流性食管炎大鼠血浆GAS和VIP含量变化(pg/ml)
| 分组 | GAS | VIP | ||
| 1 wk | 4 wk | 1 wk | 4 wk | |
| C | 26.5 | 25.8 | 32.2 | 33.8 |
| G | 48.3ad | 38.5c | 21.6 | 75.6ac |
| DG | 46.9 ad | 52.4ad | 38.3 | 88.1a |
| D | 6.1b | 8.3a | 39.5 | 117.4b |
, http://www.100md.com
aP<0.05, bP <0.01 vs 对照组;cP <0.05, dP <0.01 vs D组.
3 讨论反流性食管炎的发生主要与下食管括约肌(LES)和食管体、胃十二指肠功能异常有关，而调控胃肠功能的因素除交感神经、迷走神经外，近年受重视的还有非肾上腺能、非胆碱能神经及胃肠激素[3].反流引起的刺激和损伤又可能引起神经体液的一系列反应.本研究探讨了不同类型反流对食管黏膜的损伤作用及与大鼠体内胃肠激素变化的关系.
GAS具有调节胃肠道营养、运动和分泌的多种功能，他主要由胃窦黏膜中的G细胞分泌，其分泌受迷走神经、胃窦扩张、胃内容物的种类和酸度以及其他多种胃肠激素的复杂调控[4].本实验结果显示反流术后D组血浆GAS含量明显降低，这与全胃切除、缺失G细胞有关，而D组食管炎最为严重，可能与失去了促胃液素对食管黏膜的营养作用，以及GAS减少后食管体的蠕动减弱导致反流物停留在食管内的时间延长有一定关系.G组和DG组血浆GAS含量升高可能由于肠液反流至胃中，降低了胃内pH所引起，而4wk时G组GAS升高程度较1wk时轻度下降，可能酸反流至食管后刺激食管黏膜，通过负反馈机制抑制促胃液素的释放.提示GAS虽可致反流物酸性增加，但本身又能对食管黏膜具有一定保护作用，减少反流性食管炎的发生，尤其是对抗胆汁反流的损伤.而一旦食管黏膜受反流物损伤后，又对促胃液素的分泌起非常复杂的影响.
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VIP是消化道主要的非肾上腺素能、非胆碱能抑制性神经递质[5].血浆VIP浓度可反映非肾上腺素能、非胆碱能神经的功能改变，给小鼠静脉注射VIP可引起剂量依赖性的下食管括约肌压力(LESP)下降[6].有研究[7-8]显示反流性食管炎和Barrett食管患者血浆VIP水平较对照组显著升高，与LESP水平呈负相关，另一研究[9]发现酸反流引起的食管炎症反应可导致VIP神经纤维增生，从而引起上皮胚细胞增生增加，基底细胞层增厚.可见VIP与反流性食管炎的关系是非常错综复杂的.我们的研究结果显示G组血浆VIP含量在术后1wk时降低，4wk时增加，而术后4wk时D组、DG组血浆VIP含量显著高于对照组，可能的机制为早期酸反流对食管黏膜的刺激通过负反馈抑制VIP的合成或释放，以促进食管体蠕动、增加LES压力，减少酸反流.手术所致的较长时间的反流引起食管黏膜损伤炎症较重，反而使VIP释放增加，以加快食管上皮细胞的代偿增生.
总之，不同反流类型引起的大鼠血浆GAS和VIP改变不同，可能与其所致食管炎的程度不同有关，说明胃肠激素变化与反流性食管炎的发生密切相关.
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4 参考文献1 王雯, 李兆申,许国铭, 王烈,邹多武. 不同方式建成3种反流性食管炎模型.解放军医学杂志 2000;25:171-173
2 王雯, 李兆申,许国铭. 食管反流大鼠肿瘤诱发过程中抑癌基因mRNA表达的变化.世界华人消化杂志 2002;10:1048-1049
3 Hallgren A, Flemstrom G, Nylander O. Interaction between neurokininA,VIP, prostanoids and enteric nerves in regulation
of duodenal function. Am J Phsiol 1998;275(Pt 1):G95-103
4 周吕.胃肠生理学-基础与临床.第1版.北京: 科学出版社, 1991:101-104
, 百拇医药
5 Jin JG, Misra S, Grider JR, Makhlouf GM. Functional differencebetween SP and NKA: relaxation of gastric muscle by SP
is mediated by and VIP and NO. Am J Physiol 1993;264(4 Pt 1):G678-685
6 Guelrud M, Rossiter A, Souney PF, Rossiter G, Fanikos J, Mujica V.The effect of vasoactive intestinal polypeptide on the
lower esophageal sphincter in achalasia.Gastroenterology 1992;103:377-382
, http://www.100md.com
7 Rossiter A, Guelrud M, Souney PF, Mendoza S, Rossiter G, GelrudD.High vasoactive intestinal polypeptide plasma levels
in patients with barrett'sesophagus. Scand J Gastroenterol 1991;26:572-576
8 Kassim SK, El Touny M, El Guinaidy M, El Moghni MA, El Mohsen AA.Serum nitrates and vasoactive intestinal peptide in
patients with gastroesophageal refluxdisease. Clin Biochem 2002;35:641-646
9 Newton M, Kamm MA, Soediono PO, Milner P, Burnham WR, Burnstock G.Oesophageal epithelial innervation in health
and reflux oesophagitis. Gut 1999;44:317-322, http://www.100md.com( 王 雯, 李兆申, 许国铭, 张志坚, 林克荣)
