陈国凤,成军, 张玲霞,李莉,中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039

    国家自然科学基金项目,No. C03011402, No. C30070689, 军队“九、五”科技攻关项目,No. 98D063, 军队回国留学人员启动基金项目,No. 98H038, 军队“十、五”科技攻关青年基金项目No.01Q138，军队“十、五”科技攻关面上项目,No.01MB135

    项目负责人:成军, 100039, 北京市西四环中路100号,中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室.cj@genetherapy.com.cn

    电话:010-66933391 传真:010-63801283

    收稿日期:2003-07-12 接受日期:2003-08-16

    陈国凤,成军, 张玲霞,李莉. 乙型肝炎病毒DNA聚合酶末端蛋白研究进展.世界华人消化杂志 2004;12(2):391-393

    0 引言乙型肝炎病毒(HBV)是嗜肝DNA病毒的一种，HBVDNA的长度为3.2kb，具有4个开放读码框架(ORF)，分别编码HBV的表面抗原蛋白，核心/e抗原蛋白、X蛋白以及HBVDNA聚合酶(HBVDNA P)^[1]. HBV DNA P基因在ORF中最长，并且与C、S、X基因区有重叠，其编码的P蛋白含有3个功能域和1个无意义的隔离片(spacer，SP)，排列顺序为N-末端蛋白(TP)，隔离片，RT/DNA聚合酶和RNaseH. 由于受到不能从病毒体直接纯化和在不同的系统中表达有活性酶的限制，目前对聚合酶及其所编码的各个功能区域蛋白质的功能的认识还不是很清楚.

    1 末端蛋白的结构和功能HBV DNA P基因编码TP、RT、RNaseH和隔离片，各区段分别在2307-2 840 nt、133-1128 nt、1 129-1621 nt和2841-0-132 nt ^[2]. Li et al 在T7噬菌体启动子的调控下构建HBV聚合酶cDNA并在兔的网状细胞裂解液中表达，组成一对转录翻译系统.在指定位点的突变中进一步证实重组聚合酶cDNA产生3种产物:全长蛋白(约94kD)，内在的始动蛋白(约81kD)，N-TP(约40kD). 体外表达的聚合酶具有蛋白引物的活性 ......