慢性萎缩性胃炎患者血清骨桥蛋白的变化
邢晓静,宫月华, 袁媛,中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所第三研究室 辽宁省沈阳市 110001
国家“十五”科技攻关项目资助,No. 2001BA703B06(B)
项目负责人:袁媛, 110001, 辽宁省沈阳市和平区北二马路92号,中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所第三研究室. yyuan@mail.com.edc.cn
电话:024-23256666-6153
收稿日期:2004-08-16 接受日期:2004-08-30
摘要
, 百拇医药
目的:探讨血清骨桥蛋白(osteopontin，OPN)水平与慢性萎缩性胃炎之间的关系.
方法:慢性萎缩性胃炎患者42名，正常人38名，胃癌患者42例应用酶联免疫技术(ELISA法)检测血清OPN表达情况.
结果:慢性萎缩性胃炎患者血清OPN水平(25.0±2.8mg/L)低于正常人(41.4±7.5mg/L)，低于胃癌患者血清OPN水平(78.9±44.5mg/L)，三者相比差异均有统计学意义(P<0.01). 血清OPN水平与慢性萎缩性胃炎患者的性别、年龄无相关性(P>0.05) .
结论:慢性萎缩性胃炎患者血清OPN明显下降.
, 百拇医药
邢晓静,宫月华, 袁媛.慢性萎缩性胃炎患者血清骨桥蛋白的变化.世界华人消化杂志 2004;12(11):2744-2746
0 引言慢性萎缩性胃炎指慢性胃膜炎性病变累及胃膜腺体萎缩.作为在胃癌演变中一个最重要的癌前疾病与胃癌的发生关系密切，是胃癌的病变基础.骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是一种有多种功能的分泌型钙结合磷酸化糖蛋白.可由多种细胞分泌，普遍认为OPN与肿瘤的发生，发展关系密切，能够促进肿瘤的浸润转移，反映肿瘤的恶性程度.而近来亦有不同意见认为，OPN与肿瘤的发生相关而非转移相关.肿瘤的防治是当前医学迫切需要解决的问题，癌前疾病的早期发现对肿瘤的防治意义重大，寻求新的有意义的筛查指标是其中的重要研究方向.目前，尚无OPN与萎缩性胃炎关系的报道.
我们检测血清OPN在正常人、慢性萎缩性胃炎和胃癌患者中的表达情况，探讨血清中OPN水平与慢性萎缩性胃炎之间的关系.
, http://www.100md.com
1 材料和方法
1.1 材料 辽宁省庄河地区正常人38名，男18名，女20名，年龄34-79(平均51岁);慢性萎缩性胃炎患者42例，男21例，女21例，年龄24-72(平均54岁);胃癌患者42例来自中国医科大学附属第一医院肿瘤科、中国医科大学附属第二医院普外科:男23例，女19例，年龄36-78(平均57岁)，全部病例均经病理诊断确诊，均为未经治疗患者.采集受试对象空腹外周静脉血，分离血清，-80°C放置备用.
1.2 方法 应用血清OPN抗体ELISA检测试剂盒(美国AssayDisigns公司)检测血清OPN水平.全部操作均严格按照试剂盒操作说明书进行，应用MultiskanAscent自动酶标仪(芬兰Labsystems公司)空白孔调零，在450nm波长下读取吸光度值，根据标准曲线得出OPN浓度.实验中所有样品及标准品均双份检测.
, 百拇医药
统计学处理 采用t检验及(s)方差分析，应用统计软件SPSS10.0处理.
2 结果慢性萎缩性胃炎患者血清OPN浓度平均为25.0±2.8mg/L，正常人为41.4±7.5mg/L，胃癌患者为78.9±44.5mg/L.慢性萎缩性胃炎患者血清OPN显著低于正常人及胃癌患者(P<0.01) . 慢性萎缩性胃炎患者性别、年龄与血清OPN表达无相关性(P>0.05，图1).
图1 骨桥蛋白ELISA检测.无色或极浅色者为阴性,棕黄色为阳性. A: B:
3 讨论慢性萎缩性胃炎作为慢性胃炎的一种，因其与胃癌的发生关系密切，较其他疾病发生胃癌的频率高，是胃癌的病变基础，为胃癌的癌前疾病，受到较多关注.流行病学资料表明胃癌高发区慢性萎缩性胃炎的发病率明显高于低发区[1-4]. OPN是一种有多种功能的分泌型糖蛋白，在体内以游离状态和结合状态两种形式存在，在多种体液中均可检测得到.OPN含多个酪氨酸蛋白激酶介导的磷酸化部位和糖基化部位，多种激酶对OPN发生磷酸化的部位不同是其发挥不同的功能的原因之一.OPN作为多功能蛋白质，对肿瘤生长的诸多方面均有影响，参与细胞的信号传导；参与细胞外基质的迁移和体外形成毛细血管样管道，抑制p53活性，影响机体非特异性应答[5-13].Chang et al [14]报道，体外由TPA诱发的癌性生长可被OPN抗体所抑制，其认为体外诱导中OPN必不可少.Takahashi et al [15]报道成纤维母细胞瘤的OPN转染体在老鼠体内可显著诱导新血管生成.Terashi et al [16]认为OPN水平的低表达与肝胆管癌的进展和临床结论相关.OPN参与癌基因对细胞的转染，同时抑制抑癌基因活性，抑制增生细胞凋亡从而发挥其作为增生细胞标志蛋白的作用[17]等.我们在慢性萎缩性胃炎患者组中，血清OPN水平明显低于正常人组和胃癌患者组(P<0.01)，可能是在慢性萎缩性胃炎中，其胃黏膜层变薄，胃黏膜内固有腺管萎缩，黏膜表面上皮细胞及胃小凹上皮细胞脱落，从而OPN分泌减少，分泌入血清的OPN同样减少，导致在慢性萎缩性胃炎患者中表达下降，血清OPN值降低.
, 百拇医药
当前，肿瘤的防治仍是医学界迫切需要解决的问题.对人群进行有计划的、定期的普查，不仅可以及时发现已患肿瘤的患者，为早治提供有利的条件，而且可以及早查出癌前疾病(病变)的患者并予以适当的处置，这对预防癌症的发生、发展有着重要的意义.因此，寻求新的，有意义的监测指标意义重大.Van Heek et al [18]以Affymefrix人类基因组U133标记基因分析235例基因片段，认为血清OPN测定优于基因片段分析，血清OPN测定可作为恶性疾病筛查指标之一.本实验发现血清OPN水平在胃良、恶疾病以及正常人群之间存在明显的差异，结果提示血清OPN水平可能对慢性萎缩性胃炎有预警作用，血清OPN水平降低的人群可能是慢性萎缩性胃炎的高发人群.血清OPN水平可作为鉴别胃癌及癌前疾病的良好的标志物.今后有必要进一步扩大样本例数及癌前疾病的种类，进行更深入研究.
4 参考文献1 Smith SI, Oyedeji KS, Arigbabu AO, Cantet F, Megraud F, Ojo OO,Uwaifo AO, Otegbayo JA, Ola SO, Coker AO.
, 百拇医药
Comparison of three PCR methods fordetection of Helicobacter pylori DNA and detection of cagA gene in gastricbiopsy
specimens. World J Gastroenterol 2004;10:1958-1960
2 Yang GF, Deng CS, Xiong YY, Gong LL, Wang BC, Luo J.Expression ofnuclear factor-kappa B and target genes in gastric
precancerous lesions and adenocarcinoma:Association with Helicobactor pylori cagA (+) infection. World J
, http://www.100md.com
Gastroenterol 2004;10:491-496
3 Li S, Lu AP, Zhang L, Li YD. Anti-Helicobacter pyloriimmunoglobulin G (IgG) and IgA antibody responses and the value
of clinical presentations in diagnosis of Hpylori infection in patients with precancerous lesions. World JGastroenterol
2003;9:755-758
4 Yin GY, Zhang WN, Shen XJ, Chen Y, He XF. Ultrastructure andmolecular biological changes of chronic gastritis, gastric
, 百拇医药
cancer and gastric precancerous lesions: acomparative study.World J Gastroenterol 2003;9:851-857
5 Gao C, Guo H, Downey L, Marroquin C, Wei J, Kuo PC. Osteopontin-dependentCD44v6 expression and cell adhesion in
HepG2 cells. Carcinogenesis 2003;24:1871-1878
6 Gao C, Guo H, Wei J, Kuo PC. Osteopontin inhibits expression ofcytochrome c oxidase in RAW 264.7 murine
, http://www.100md.com
macrophages. Biochem Biophys Res Commun 2003;309:120-125
7 Zhang GX, Zhao ZQ, Wang HD, Hao B. Enhancement of osteopontinexpression in HepG2 cells by epidermal growth
factor via phosphatidylinositol 3-kinasesignaling pathway.World J Gastroenterol 2004;10:205-208
8 Mangum J, Bermudez E, Sar M, Everitt J. Related Articles, LinksOsteopontin expression in particle-induced lung
, 百拇医药
disease. Exp Lung Res 2004;30:585-598
9 Gao C, Mi Z, Guo H, Wei J, Wai PY, Kuo PC. Related Articles, LinksA transcriptional repressor of osteopontin expression
in the 4T1 murine breast cancer cell line.Biochem Biophys Res Commun 2004;321:1010-1016
10 Mi Z, Guo H, Wai PY, Gao C, Wei J, Kuo PC. Related Articles, Links Differential osteopontin expression in phenotypically
, 百拇医药
distinct subclones of murine breast cancercells mediates metastatic behavior. J Biol Chem 2004;279:46659-46667
11 Marroquin CE, Downey L, Guo H, Kuo PC. Related Articles, LinksOsteopontin increases CD44 expression and cell
adhesion in RAW 264.7 murine leukemiacells. Immunol Lett 2004;95:109-112
12 Iguchi S, Nishi S, Ikegame M, Hoshi K, Yoshizawa T, Kawashima H,Arakawa M, Ozawa H, Gejyo F. Related Articles,Links Expression of osteopontin incisplatin-induced tubular injury. Nephron Exp Nephrol 2004;97:96-105
, 百拇医药
13 Nagatomo T, Ohga S, Takada H, Nomura A, Hikino S, Imura M, OhshimaK, Hara T. Related Articles, Links Microarray
analysis of human milk cells: persistenthigh expression of osteopontin during the lactation period. Clin ExpImmunol
2004;138:47-53
14 Chang PL, Cao M, Hicks P. Osteopontin induction is required fortumor promoter-induced transformation of preneoplastic
, 百拇医药
mouse cells. Carcinogenesis 2003;24:1749-1758
15 Takahashi F, Akutagawa S, Fukumoto H, Tsukiyama S, Ohe Y, TakahashiK, Fukuchi Y, Saijo N, Nishio K. Osteopontin
induces angiogenesis of murineneuroblastoma cells in mice.Int J Cancer 2002;98:707-712
16 Terashi T, Aishima S, Taguchi K, Asayama Y, Sugimachi K, MatsuuraS, Shimada M, Maehara S, Maehara Y,Tsuneyoshi M. Decreased expression ofosteopontin is related to tumor aggressivenss and clinical outcomeof
, 百拇医药
intrahepatic cholamgiocar-cinomal. Liver Int 2004;24:38-45
17 Denhardt DT, Giachelli CM, Rittling SR. Role of Osteopontin incelluar signaling and toxicant injury. Annu Rev Pharmacol
Toxicol 2001;41:723-749
18 Van Heek NT, Maitra A, Koopmann J, Fedarko N, Jain A, Rahman A,Iacobuzio-Donahue CA, Adsay V, Ashfaq R, Yeo CJ,Cameron JL, Offerhaus JA, Hruban RH, BergKD, Goggins M. Gene expression profiling identifies markers of ampullary
adenocarcinoma. Cancer Biol Ther 2004;3:651-656, 百拇医药( 邢晓静, 宫月华, 袁 媛)
国家“十五”科技攻关项目资助,No. 2001BA703B06(B)
项目负责人:袁媛, 110001, 辽宁省沈阳市和平区北二马路92号,中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所第三研究室. yyuan@mail.com.edc.cn
电话:024-23256666-6153
收稿日期:2004-08-16 接受日期:2004-08-30
摘要
, 百拇医药
目的:探讨血清骨桥蛋白(osteopontin，OPN)水平与慢性萎缩性胃炎之间的关系.
方法:慢性萎缩性胃炎患者42名，正常人38名，胃癌患者42例应用酶联免疫技术(ELISA法)检测血清OPN表达情况.
结果:慢性萎缩性胃炎患者血清OPN水平(25.0±2.8mg/L)低于正常人(41.4±7.5mg/L)，低于胃癌患者血清OPN水平(78.9±44.5mg/L)，三者相比差异均有统计学意义(P<0.01). 血清OPN水平与慢性萎缩性胃炎患者的性别、年龄无相关性(P>0.05) .
结论:慢性萎缩性胃炎患者血清OPN明显下降.
, 百拇医药
邢晓静,宫月华, 袁媛.慢性萎缩性胃炎患者血清骨桥蛋白的变化.世界华人消化杂志 2004;12(11):2744-2746
0 引言慢性萎缩性胃炎指慢性胃膜炎性病变累及胃膜腺体萎缩.作为在胃癌演变中一个最重要的癌前疾病与胃癌的发生关系密切，是胃癌的病变基础.骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是一种有多种功能的分泌型钙结合磷酸化糖蛋白.可由多种细胞分泌，普遍认为OPN与肿瘤的发生，发展关系密切，能够促进肿瘤的浸润转移，反映肿瘤的恶性程度.而近来亦有不同意见认为，OPN与肿瘤的发生相关而非转移相关.肿瘤的防治是当前医学迫切需要解决的问题，癌前疾病的早期发现对肿瘤的防治意义重大，寻求新的有意义的筛查指标是其中的重要研究方向.目前，尚无OPN与萎缩性胃炎关系的报道.
我们检测血清OPN在正常人、慢性萎缩性胃炎和胃癌患者中的表达情况，探讨血清中OPN水平与慢性萎缩性胃炎之间的关系.
, http://www.100md.com
1 材料和方法
1.1 材料 辽宁省庄河地区正常人38名，男18名，女20名，年龄34-79(平均51岁);慢性萎缩性胃炎患者42例，男21例，女21例，年龄24-72(平均54岁);胃癌患者42例来自中国医科大学附属第一医院肿瘤科、中国医科大学附属第二医院普外科:男23例，女19例，年龄36-78(平均57岁)，全部病例均经病理诊断确诊，均为未经治疗患者.采集受试对象空腹外周静脉血，分离血清，-80°C放置备用.
1.2 方法 应用血清OPN抗体ELISA检测试剂盒(美国AssayDisigns公司)检测血清OPN水平.全部操作均严格按照试剂盒操作说明书进行，应用MultiskanAscent自动酶标仪(芬兰Labsystems公司)空白孔调零，在450nm波长下读取吸光度值，根据标准曲线得出OPN浓度.实验中所有样品及标准品均双份检测.
, 百拇医药
统计学处理 采用t检验及(s)方差分析，应用统计软件SPSS10.0处理.
2 结果慢性萎缩性胃炎患者血清OPN浓度平均为25.0±2.8mg/L，正常人为41.4±7.5mg/L，胃癌患者为78.9±44.5mg/L.慢性萎缩性胃炎患者血清OPN显著低于正常人及胃癌患者(P<0.01) . 慢性萎缩性胃炎患者性别、年龄与血清OPN表达无相关性(P>0.05，图1).
图1 骨桥蛋白ELISA检测.无色或极浅色者为阴性,棕黄色为阳性. A: B:
3 讨论慢性萎缩性胃炎作为慢性胃炎的一种，因其与胃癌的发生关系密切，较其他疾病发生胃癌的频率高，是胃癌的病变基础，为胃癌的癌前疾病，受到较多关注.流行病学资料表明胃癌高发区慢性萎缩性胃炎的发病率明显高于低发区[1-4]. OPN是一种有多种功能的分泌型糖蛋白，在体内以游离状态和结合状态两种形式存在，在多种体液中均可检测得到.OPN含多个酪氨酸蛋白激酶介导的磷酸化部位和糖基化部位，多种激酶对OPN发生磷酸化的部位不同是其发挥不同的功能的原因之一.OPN作为多功能蛋白质，对肿瘤生长的诸多方面均有影响，参与细胞的信号传导；参与细胞外基质的迁移和体外形成毛细血管样管道，抑制p53活性，影响机体非特异性应答[5-13].Chang et al [14]报道，体外由TPA诱发的癌性生长可被OPN抗体所抑制，其认为体外诱导中OPN必不可少.Takahashi et al [15]报道成纤维母细胞瘤的OPN转染体在老鼠体内可显著诱导新血管生成.Terashi et al [16]认为OPN水平的低表达与肝胆管癌的进展和临床结论相关.OPN参与癌基因对细胞的转染，同时抑制抑癌基因活性，抑制增生细胞凋亡从而发挥其作为增生细胞标志蛋白的作用[17]等.我们在慢性萎缩性胃炎患者组中，血清OPN水平明显低于正常人组和胃癌患者组(P<0.01)，可能是在慢性萎缩性胃炎中，其胃黏膜层变薄，胃黏膜内固有腺管萎缩，黏膜表面上皮细胞及胃小凹上皮细胞脱落，从而OPN分泌减少，分泌入血清的OPN同样减少，导致在慢性萎缩性胃炎患者中表达下降，血清OPN值降低.
, 百拇医药
当前，肿瘤的防治仍是医学界迫切需要解决的问题.对人群进行有计划的、定期的普查，不仅可以及时发现已患肿瘤的患者，为早治提供有利的条件，而且可以及早查出癌前疾病(病变)的患者并予以适当的处置，这对预防癌症的发生、发展有着重要的意义.因此，寻求新的，有意义的监测指标意义重大.Van Heek et al [18]以Affymefrix人类基因组U133标记基因分析235例基因片段，认为血清OPN测定优于基因片段分析，血清OPN测定可作为恶性疾病筛查指标之一.本实验发现血清OPN水平在胃良、恶疾病以及正常人群之间存在明显的差异，结果提示血清OPN水平可能对慢性萎缩性胃炎有预警作用，血清OPN水平降低的人群可能是慢性萎缩性胃炎的高发人群.血清OPN水平可作为鉴别胃癌及癌前疾病的良好的标志物.今后有必要进一步扩大样本例数及癌前疾病的种类，进行更深入研究.
4 参考文献1 Smith SI, Oyedeji KS, Arigbabu AO, Cantet F, Megraud F, Ojo OO,Uwaifo AO, Otegbayo JA, Ola SO, Coker AO.
, 百拇医药
Comparison of three PCR methods fordetection of Helicobacter pylori DNA and detection of cagA gene in gastricbiopsy
specimens. World J Gastroenterol 2004;10:1958-1960
2 Yang GF, Deng CS, Xiong YY, Gong LL, Wang BC, Luo J.Expression ofnuclear factor-kappa B and target genes in gastric
precancerous lesions and adenocarcinoma:Association with Helicobactor pylori cagA (+) infection. World J
, http://www.100md.com
Gastroenterol 2004;10:491-496
3 Li S, Lu AP, Zhang L, Li YD. Anti-Helicobacter pyloriimmunoglobulin G (IgG) and IgA antibody responses and the value
of clinical presentations in diagnosis of Hpylori infection in patients with precancerous lesions. World JGastroenterol
2003;9:755-758
4 Yin GY, Zhang WN, Shen XJ, Chen Y, He XF. Ultrastructure andmolecular biological changes of chronic gastritis, gastric
, 百拇医药
cancer and gastric precancerous lesions: acomparative study.World J Gastroenterol 2003;9:851-857
5 Gao C, Guo H, Downey L, Marroquin C, Wei J, Kuo PC. Osteopontin-dependentCD44v6 expression and cell adhesion in
HepG2 cells. Carcinogenesis 2003;24:1871-1878
6 Gao C, Guo H, Wei J, Kuo PC. Osteopontin inhibits expression ofcytochrome c oxidase in RAW 264.7 murine
, http://www.100md.com
macrophages. Biochem Biophys Res Commun 2003;309:120-125
7 Zhang GX, Zhao ZQ, Wang HD, Hao B. Enhancement of osteopontinexpression in HepG2 cells by epidermal growth
factor via phosphatidylinositol 3-kinasesignaling pathway.World J Gastroenterol 2004;10:205-208
8 Mangum J, Bermudez E, Sar M, Everitt J. Related Articles, LinksOsteopontin expression in particle-induced lung
, 百拇医药
disease. Exp Lung Res 2004;30:585-598
9 Gao C, Mi Z, Guo H, Wei J, Wai PY, Kuo PC. Related Articles, LinksA transcriptional repressor of osteopontin expression
in the 4T1 murine breast cancer cell line.Biochem Biophys Res Commun 2004;321:1010-1016
10 Mi Z, Guo H, Wai PY, Gao C, Wei J, Kuo PC. Related Articles, Links Differential osteopontin expression in phenotypically
, 百拇医药
distinct subclones of murine breast cancercells mediates metastatic behavior. J Biol Chem 2004;279:46659-46667
11 Marroquin CE, Downey L, Guo H, Kuo PC. Related Articles, LinksOsteopontin increases CD44 expression and cell
adhesion in RAW 264.7 murine leukemiacells. Immunol Lett 2004;95:109-112
12 Iguchi S, Nishi S, Ikegame M, Hoshi K, Yoshizawa T, Kawashima H,Arakawa M, Ozawa H, Gejyo F. Related Articles,Links Expression of osteopontin incisplatin-induced tubular injury. Nephron Exp Nephrol 2004;97:96-105
, 百拇医药
13 Nagatomo T, Ohga S, Takada H, Nomura A, Hikino S, Imura M, OhshimaK, Hara T. Related Articles, Links Microarray
analysis of human milk cells: persistenthigh expression of osteopontin during the lactation period. Clin ExpImmunol
2004;138:47-53
14 Chang PL, Cao M, Hicks P. Osteopontin induction is required fortumor promoter-induced transformation of preneoplastic
, 百拇医药
mouse cells. Carcinogenesis 2003;24:1749-1758
15 Takahashi F, Akutagawa S, Fukumoto H, Tsukiyama S, Ohe Y, TakahashiK, Fukuchi Y, Saijo N, Nishio K. Osteopontin
induces angiogenesis of murineneuroblastoma cells in mice.Int J Cancer 2002;98:707-712
16 Terashi T, Aishima S, Taguchi K, Asayama Y, Sugimachi K, MatsuuraS, Shimada M, Maehara S, Maehara Y,Tsuneyoshi M. Decreased expression ofosteopontin is related to tumor aggressivenss and clinical outcomeof
, 百拇医药
intrahepatic cholamgiocar-cinomal. Liver Int 2004;24:38-45
17 Denhardt DT, Giachelli CM, Rittling SR. Role of Osteopontin incelluar signaling and toxicant injury. Annu Rev Pharmacol
Toxicol 2001;41:723-749
18 Van Heek NT, Maitra A, Koopmann J, Fedarko N, Jain A, Rahman A,Iacobuzio-Donahue CA, Adsay V, Ashfaq R, Yeo CJ,Cameron JL, Offerhaus JA, Hruban RH, BergKD, Goggins M. Gene expression profiling identifies markers of ampullary
adenocarcinoma. Cancer Biol Ther 2004;3:651-656, 百拇医药( 邢晓静, 宫月华, 袁 媛)
