蔺淑梅,张树林,西安交通大学第一医院传染科 陕西省西安市 710061

    成军,刘敏, 王琳,黄燕萍, 杨瑗,白桂芹,中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心,全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市 100039

    国家自然科学基金攻关项目,No. C03011402, No. C30070689

    军队“九、五”科技攻关项目,No. 98D063

    军队回国留学人员启动基金项目,No. 98H038

    军队“十、五”科技攻关青年基金项目,No. 01Q138

    军队“十、五”科技攻关面上项目, No. 01MB135

    项目负责人:成军, 100039, 北京市西四环中路100号,中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心,全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn

    电话:010-66933391 传真:010-63801283

    收稿日期:2004-05-28 接受日期:2004-09-30

    摘要

    目的:研究乙型肝炎病毒前-前-S蛋白结合蛋白新基因PPSBP9的克隆化.

    方法:构建前-前-S的酵母细胞表达载体，采用酵母双杂交系统筛选人肝细胞cDNA文库，利用核苷酸数据库及生物信息学技术，对于筛选结果进行分析.发现其中有1个未知功能的新基因.根据GenBank中的序列信息设计引物，以HepG2细胞系cDNA文库为模板，以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长编码序列，并经测序证实，命名该新基因为PPSBP9并在GenBank中注册，注册号为AY553877.

    结果:PPSBP9基因的编码序列全长为840个核苷酸(nt)，编码产物由279个氨基酸残基(aa)组成.经核苷酸序列数据库 (GenBank)和蛋白质一级结构序列数据库(SwissProt)同源序列的搜寻，与已知基因序列和蛋白序列之间没有显著同源性.

    结论:筛选并成功的克隆了乙型肝炎病毒前-前-S蛋白与肝细胞cDNA文库中结合蛋白新基因PPSBP9，为进一步研究HBV前-前-S及其肝细胞结合蛋白新基因在HBV致病中的作用奠定了基础.

    蔺淑梅,成军, 张树林,刘敏, 王琳,黄燕萍, 杨瑗,白桂琴. 乙型肝炎病毒前-前-S蛋白结合蛋白新基因PPSBP9的克隆化.世界华人消化杂志 2004;12(11):2733-2736 ......