徐志强,成军, 张鸿飞,王建军, 刘妍,纪冬,中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心,全军病毒性肝炎防治研究重点实验室感染三科 北京市 100039

    国家自然科学基金攻关项目,No. C03011402, No. C30070689

    军队“九、五”科技攻关项目,No. 98D063

    军队回国留学人员启动基金项目,No. 98H038

    军队“十、五”科技攻关青年基金项目,No. 01Q138

    军队“十、五”科技攻关面上项目,No. 01MB135

    项目负责人:成军, 100039, 北京市西四环中路100号,中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心,全军病毒性肝炎防治研究重点实验室感染三科. cj@genetherapy.com.cn

    电话:010-66933391 传真:010-63801283

    收稿日期:2004-05-28 接受日期:2004-09-30

    摘要

    目的: 筛选与克隆HBcAg激活基因，了解其在体内的调节功能线索及机制.

    方法:以分子生物学技术构建HBcAg的真核表达载体pcDNA3.1(-)-HBcAg，以表达质粒pcDNA3.1(-)-HBcAg转染HepG2细胞，以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照，制备转染后的细胞裂解液，提取mRNA.应用基因表达谱芯片技术对差异表达mRNA进行检测和分析.

    结果:HBcAg表达质粒pcDNA3.1(-)-HBcAg经酶切鉴定和DNA测序鉴定正确.经基因表达谱芯片分析，29种基因的表达水平上调，17种基因的表达水平下调.

    结论:筛选到一些与细胞内信号传导、免疫调节、细胞凋亡、蛋白质翻译合成、肿瘤发生相关的HBcAg反式调节的靶基因.

    徐志强,成军, 张鸿飞,王建军, 刘妍,纪冬. 应用表达谱芯片技术筛选HBcAg反式调节基因.世界华人消化杂志 2004;12(12):2886-2890

    0 引言乙型肝炎病毒(HBV)属于嗜肝DNA病毒，是一种严重危害人类健康的致病因子.不仅引起急、慢性病毒性肝炎，而且与肝纤维化(LF)、肝细胞癌(HCC)的发生发展密切相关^[1].HBcAg是由HBVDNA C基因区编码的一种结构性蛋白 ......