补脾方药血清对离体脾虚大鼠壁细胞胞内[Ca2+]i的影响
隋峰,广州中医药大学脾胃研究所 广东省广州市 510405
王汝俊,王建华, 杜群, 巫燕丽, 广州中医药大学脾胃研究所 广东省广州市 510405
国家自然科学基金资助项目,No. 30271650
项目负责人:王汝俊 510405, 广州市白云区三元里12号, 广州中医药大学脾胃研究所. piweiyaol@gzhtcm.edu.cn
电话:020-36585555 传真: 020-36586563
收稿日期:2004-11-18 接受日期: 2004-12-08
, http://www.100md.com
摘要
目的:探讨脾虚状态的分子病理机制及补脾方药对其的影响.
方法:采用血清药理学方法对分离后的大鼠壁细胞在体外给药，并用荧光指示剂Fura-2/AM负载细胞，使用双波长荧光分光光度计分别检测静息状态下壁细胞内的[Ca2+]i及胃泌素负荷后[Ca2+]i动态变化情况.
结果:静息状态下，脾虚模型组大鼠壁细胞胞内[Ca2+]i(64.32±12.82)明显低于正常组(76.64±14.21)(P<0.05)，加入胃泌素(终浓度100 nM)后，胞内[Ca2+]i的增高幅度模型组(13.43±2.70)明显大于正常组(9.80±2.12)(P<0.01);脾虚大鼠经补脾方药血清作用后各组的静息状态下[Ca2+]i均介于正常组与模型组之间，胃泌素刺激后胞内[Ca2+]i的增高幅度也有不同程度的减小，其中党参治疗组的增高幅度(11.13±2.46)与模型组(13.43±2.70)相比差异显著(P<0.05).
, 百拇医药
结论:脾虚大鼠壁细胞胞内静息状态下[Ca2+]i降低和胃泌素刺激后胞内[Ca2+]i的异常变化可能是脾虚证病理机制之一，Ca2+可能在分子水平上参与了脾虚证的形成.
隋峰,王汝俊, 王建华,杜群,巫燕丽. 补脾方药血清对离体脾虚大鼠壁细胞胞内[Ca2+]i的影响.世界华人消化杂志 2005;13(3):392-394
赵海磊, 刘成,赵爱光. 中药复方胃肠安血清诱导肝癌SMMC-7721细胞分化.世界华人消化杂志 2003;11:1345-1348
2 彭智聪,黄静宁, 郭宝丽,张红玲. 中药血清药理学实验方法研究进展.中国实验方剂学杂志 200l;7:57-59
3 聂克, 王汝俊,王建华. 大鼠胃壁细胞的分离方法.世界华人消化杂志 1999;7:994-995
, 百拇医药
4 Scott DA, de Souza W, Benchimol M, Zhong L, Lu HG, Moreno SN,Docampo R. Presence of a plant-like
proton-pumping pyrophosphatase inacidocalcisomes of Trypanosoma cruzi. J Biol Chem 1998;373:22151-22158
5 台卫平, 罗和生.黄连素对HT-29人结肠癌细胞系Ca2+的抑制作用.世界华人消化杂志 2003;11:1662-2664
6 Cobbold PH, Rink TJ. Fluorescence and bioluminescence measurementof cytoplasmic free calcium.
, 百拇医药
Biochem J 1987;248:313-328
7 Mansilla-Olivares A. Calcium, the atom triggering life and cellularfunction. Cir Cir 2004;72:139-151
8 Yorek MA, Davidson EP, Dunlap JA, Stefani MR. Effects of bradykininon cytosolic Calcium in neuroblastoma cells using
the fluorescent indicator fluo-3. BiochimBiophys Acta 1993;1177:215-220
9 Gascon-Barre M, Hoddad P, Provincher SJ, Bilodeau S, Pecker F,Lotersztajn S, Vallieres S. Chronic hypocalcemia
, 百拇医药
of vitamin D deficiency leads to lowerintracellular calcium concentrations in rat hepatocytes. J Clin Invest
1994;93:2159-2167
10 Johnson WT, Dufaut SN. Intracellular calcium mobilization in ratplatelets is adversely affected by copper
deficiency. Biochim Biophys Acta 1993;1175:263-268
11 Sachs G. Physiology of the parietal cell and therapeuticimplications. Pharmacotherapy 2003;23(10Pt2 ):68-73
, 百拇医药
12 Yao X, Forte JG. Cell biology of acid secretion by the parietalcell. Annu Rev Physiol 2003;65:103-131
13 Niv Y, Vardi I. Calcium channel blocker decreases pentagastrin-stimulatedalkaline-tide:a role for extracellular calcium
in gastric acid secretion. Isr JMed Sci 1995;31:215-217
14 Niki S, Rokutan K, Nakamura K, Ogihara S, Kutsumi H, Saitoh T,Aoike A, Kawai K. Calcium-dependent signaling of
, http://www.100md.com
acid secretion in isolated parietalcells from guinea pigs and its modification by ethanol.
Nippon Shokakibyo GakkaiZasshi 1992;89:1484-1490
15 Hinkle KL, Bane GC, Jazayeri A, Samuelson LC. Enhanced calciumsignaling and acid secretion in parietal cells
isolated from gastrin-deficient mice.Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 2003;284:G145-G153
编辑 张海宁, http://www.100md.com( 隋 峰, 王汝俊, 王建华, 杜 群, 巫燕丽)
王汝俊,王建华, 杜群, 巫燕丽, 广州中医药大学脾胃研究所 广东省广州市 510405
国家自然科学基金资助项目,No. 30271650
项目负责人:王汝俊 510405, 广州市白云区三元里12号, 广州中医药大学脾胃研究所. piweiyaol@gzhtcm.edu.cn
电话:020-36585555 传真: 020-36586563
收稿日期:2004-11-18 接受日期: 2004-12-08
, http://www.100md.com
摘要
目的:探讨脾虚状态的分子病理机制及补脾方药对其的影响.
方法:采用血清药理学方法对分离后的大鼠壁细胞在体外给药，并用荧光指示剂Fura-2/AM负载细胞，使用双波长荧光分光光度计分别检测静息状态下壁细胞内的[Ca2+]i及胃泌素负荷后[Ca2+]i动态变化情况.
结果:静息状态下，脾虚模型组大鼠壁细胞胞内[Ca2+]i(64.32±12.82)明显低于正常组(76.64±14.21)(P<0.05)，加入胃泌素(终浓度100 nM)后，胞内[Ca2+]i的增高幅度模型组(13.43±2.70)明显大于正常组(9.80±2.12)(P<0.01);脾虚大鼠经补脾方药血清作用后各组的静息状态下[Ca2+]i均介于正常组与模型组之间，胃泌素刺激后胞内[Ca2+]i的增高幅度也有不同程度的减小，其中党参治疗组的增高幅度(11.13±2.46)与模型组(13.43±2.70)相比差异显著(P<0.05).
, 百拇医药
结论:脾虚大鼠壁细胞胞内静息状态下[Ca2+]i降低和胃泌素刺激后胞内[Ca2+]i的异常变化可能是脾虚证病理机制之一，Ca2+可能在分子水平上参与了脾虚证的形成.
隋峰,王汝俊, 王建华,杜群,巫燕丽. 补脾方药血清对离体脾虚大鼠壁细胞胞内[Ca2+]i的影响.世界华人消化杂志 2005;13(3):392-394
赵海磊, 刘成,赵爱光. 中药复方胃肠安血清诱导肝癌SMMC-7721细胞分化.世界华人消化杂志 2003;11:1345-1348
2 彭智聪,黄静宁, 郭宝丽,张红玲. 中药血清药理学实验方法研究进展.中国实验方剂学杂志 200l;7:57-59
3 聂克, 王汝俊,王建华. 大鼠胃壁细胞的分离方法.世界华人消化杂志 1999;7:994-995
, 百拇医药
4 Scott DA, de Souza W, Benchimol M, Zhong L, Lu HG, Moreno SN,Docampo R. Presence of a plant-like
proton-pumping pyrophosphatase inacidocalcisomes of Trypanosoma cruzi. J Biol Chem 1998;373:22151-22158
5 台卫平, 罗和生.黄连素对HT-29人结肠癌细胞系Ca2+的抑制作用.世界华人消化杂志 2003;11:1662-2664
6 Cobbold PH, Rink TJ. Fluorescence and bioluminescence measurementof cytoplasmic free calcium.
, 百拇医药
Biochem J 1987;248:313-328
7 Mansilla-Olivares A. Calcium, the atom triggering life and cellularfunction. Cir Cir 2004;72:139-151
8 Yorek MA, Davidson EP, Dunlap JA, Stefani MR. Effects of bradykininon cytosolic Calcium in neuroblastoma cells using
the fluorescent indicator fluo-3. BiochimBiophys Acta 1993;1177:215-220
9 Gascon-Barre M, Hoddad P, Provincher SJ, Bilodeau S, Pecker F,Lotersztajn S, Vallieres S. Chronic hypocalcemia
, 百拇医药
of vitamin D deficiency leads to lowerintracellular calcium concentrations in rat hepatocytes. J Clin Invest
1994;93:2159-2167
10 Johnson WT, Dufaut SN. Intracellular calcium mobilization in ratplatelets is adversely affected by copper
deficiency. Biochim Biophys Acta 1993;1175:263-268
11 Sachs G. Physiology of the parietal cell and therapeuticimplications. Pharmacotherapy 2003;23(10Pt2 ):68-73
, 百拇医药
12 Yao X, Forte JG. Cell biology of acid secretion by the parietalcell. Annu Rev Physiol 2003;65:103-131
13 Niv Y, Vardi I. Calcium channel blocker decreases pentagastrin-stimulatedalkaline-tide:a role for extracellular calcium
in gastric acid secretion. Isr JMed Sci 1995;31:215-217
14 Niki S, Rokutan K, Nakamura K, Ogihara S, Kutsumi H, Saitoh T,Aoike A, Kawai K. Calcium-dependent signaling of
, http://www.100md.com
acid secretion in isolated parietalcells from guinea pigs and its modification by ethanol.
Nippon Shokakibyo GakkaiZasshi 1992;89:1484-1490
15 Hinkle KL, Bane GC, Jazayeri A, Samuelson LC. Enhanced calciumsignaling and acid secretion in parietal cells
isolated from gastrin-deficient mice.Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 2003;284:G145-G153
编辑 张海宁, http://www.100md.com( 隋 峰, 王汝俊, 王建华, 杜 群, 巫燕丽)
