蛋白激酶C可抑制人结肠癌细胞系的锚定依赖性和非依赖性生长
http://www.100md.com
2005年4月19日
一项最新研究表明，蛋白激酶C可抑制人结肠癌细胞系CaCo-2细胞的锚定依赖性和非依赖性生长并促进其分化与凋亡。
以往的研究显示，在氧化偶氮甲烷诱导形成的鼠和人结肠肿瘤组织中，蛋白激酶C(PKC)的表达水平有所下降。
在本研究中，研究人员将人类PKC互补DNA放置到两个不同的金属硫蛋白调节表达载体中，转染人结肠癌细胞系CaCo-2。然后利用Western蛋白印记法来显示多克隆PKC转染体群体的特征，PKC活性则通过原位应用PKC特异性底物进行测量。
此外，研究人员使用Coulter计数器确定CaCo-2细胞的增殖情况；使用流式细胞分析仪分析细胞周期的分布情况；通过对软琼脂中细胞生长情况的分析来评估离体细胞的转化情况；通过碱性磷酸酶和异麦芽糖蔗糖酶水平的变化来评估细胞的分化情况；利用4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐和末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的三磷酸去氧鸟苷切口末端标记染色法来评估细胞的凋亡情况。
研究结果显示，在Zn2+存在的情况下，PKC转染细胞中PKC蛋白质的表达增加了4倍，PKC活性增加了2倍，细胞生长速度下降了30%(P<0.05)，并且细胞分化表型增加。PKC表达的增加导致了明显的G0/G1期抑制，同时还导致锚定依赖性细胞生长受到了抑制(50%，P<0.05)以及细胞凋亡增加了2倍。
研究人员最后得出结论，PKC表达的增加在诱导人结肠癌细胞系分化以及缩短细胞存活时间的同时，可抑制该细胞系的锚定依赖性和非依赖性生长。, http://www.100md.com
以往的研究显示，在氧化偶氮甲烷诱导形成的鼠和人结肠肿瘤组织中，蛋白激酶C(PKC)的表达水平有所下降。
在本研究中，研究人员将人类PKC互补DNA放置到两个不同的金属硫蛋白调节表达载体中，转染人结肠癌细胞系CaCo-2。然后利用Western蛋白印记法来显示多克隆PKC转染体群体的特征，PKC活性则通过原位应用PKC特异性底物进行测量。
此外，研究人员使用Coulter计数器确定CaCo-2细胞的增殖情况；使用流式细胞分析仪分析细胞周期的分布情况；通过对软琼脂中细胞生长情况的分析来评估离体细胞的转化情况；通过碱性磷酸酶和异麦芽糖蔗糖酶水平的变化来评估细胞的分化情况；利用4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐和末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的三磷酸去氧鸟苷切口末端标记染色法来评估细胞的凋亡情况。
研究结果显示，在Zn2+存在的情况下，PKC转染细胞中PKC蛋白质的表达增加了4倍，PKC活性增加了2倍，细胞生长速度下降了30%(P<0.05)，并且细胞分化表型增加。PKC表达的增加导致了明显的G0/G1期抑制，同时还导致锚定依赖性细胞生长受到了抑制(50%，P<0.05)以及细胞凋亡增加了2倍。
研究人员最后得出结论，PKC表达的增加在诱导人结肠癌细胞系分化以及缩短细胞存活时间的同时，可抑制该细胞系的锚定依赖性和非依赖性生长。, http://www.100md.com