乙型肝炎大(小)三阳实验室诊断一步法
笔者从事检验工作20多年,由于常年在缺医少药的环境下工作,不可能有发达地区那样的条件从事检验,笔者通过长达10年的对照及多家医院的对照实验,得出一个简便的方法测定乙肝大小三阳,现简述如下。
1 原理
抗HBs致敏红细胞遇标本中HBsAg时,因抗原抗体反应而凝集。
2 试剂
上海实业科华生物技术有限公司生产的改良型冻干乙型肝炎表面抗原诊断血球及配套稀释液。
3 器械及设备
(1)96孔V型微量血凝板;(2)25μl金属稀释棒;(3)微量振荡器;(4)自制滴管(20号针头加橡皮吸球组成);(5)37~65℃恒温水箱。
4 操作方法
血凝板每孔加稀释液1滴(25μ1)或用自制滴管加稀释液1滴(约25μl),直至第8孔。用微量稀释棒蘸取被检血清(25μl),按顺序倍比稀释至第8孔,然后从第5孔起各加血球悬液1滴,将反应板置振荡器上振荡2min,盖上玻板,置于恒温水箱(37℃)内1h后观察结果。
5 结果判断
第5孔的稀释倍数是1:64,以后分别是1:128;1:256;1:512。稀释倍数在1:64者为小三阳,稀释倍数在1:128或以上者为大三阳。
6 讨论
(1)此法与上海实业科华生物有限公司生产的测定乙肝二对半试剂盒及使用方法,经10年5000例对照检测无1例不同;(2)方法简便,易于操作者掌握,比二对半试剂盒方法更易于检测,大大提高工作效率;(3)经济实惠,二对半试剂盒价格1500元/100人份,每份成本15元以上。一步法50元/100人份,成本0.5元左右。
作者单位:832056新疆石河子西古城镇150团医院
(收稿日期:2003-10-02) (编辑使 臻), 百拇医药(徐忠元)
1 原理
抗HBs致敏红细胞遇标本中HBsAg时,因抗原抗体反应而凝集。
2 试剂
上海实业科华生物技术有限公司生产的改良型冻干乙型肝炎表面抗原诊断血球及配套稀释液。
3 器械及设备
(1)96孔V型微量血凝板;(2)25μl金属稀释棒;(3)微量振荡器;(4)自制滴管(20号针头加橡皮吸球组成);(5)37~65℃恒温水箱。
4 操作方法
血凝板每孔加稀释液1滴(25μ1)或用自制滴管加稀释液1滴(约25μl),直至第8孔。用微量稀释棒蘸取被检血清(25μl),按顺序倍比稀释至第8孔,然后从第5孔起各加血球悬液1滴,将反应板置振荡器上振荡2min,盖上玻板,置于恒温水箱(37℃)内1h后观察结果。
5 结果判断
第5孔的稀释倍数是1:64,以后分别是1:128;1:256;1:512。稀释倍数在1:64者为小三阳,稀释倍数在1:128或以上者为大三阳。
6 讨论
(1)此法与上海实业科华生物有限公司生产的测定乙肝二对半试剂盒及使用方法,经10年5000例对照检测无1例不同;(2)方法简便,易于操作者掌握,比二对半试剂盒方法更易于检测,大大提高工作效率;(3)经济实惠,二对半试剂盒价格1500元/100人份,每份成本15元以上。一步法50元/100人份,成本0.5元左右。
作者单位:832056新疆石河子西古城镇150团医院
(收稿日期:2003-10-02) (编辑使 臻), 百拇医药(徐忠元)