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编号:10597394
人骨髓间充质细胞培养的研究进展
http://www.100md.com 《中华中西医杂志》 2004年第13期
1MSC的分离及培养,2MSC的定向诱导分化,3MSC的生物学特性
     骨髓中的细胞包括造血和非造血细胞两大类。20世纪70年代,Friedenstein等首先报道在骨髓中存在一种纺锤形的成纤维细胞集落形成单位(CFU-F),具有高度的自我更新和分化潜能[1] 。1991年,Caplan把这些在体外能高度扩增并可多向分化的细胞群命名为骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC) [2]。这类细胞通过体外培养,不仅可分化为造血实质和基质细胞,还可分化为多种类型的组织,特别是中胚层来源组织的细胞,如成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞、成纤维细胞、内皮细胞、神经细胞等。理论上讲,它还可以分化为所有间充质组织类型,如心肌细胞和真皮等。国外已建立了小鼠、大鼠、兔和人的MSCs系,并诱导分化出多种结缔组织,而国内大多进行的是骨髓中造血干细胞的分离、培养及用于骨髓移植,对于骨髓MSC的研究起步不久。随着组织细胞工程学和基因工程学的发展,利用MSC的多向分化潜能,在组织工程、细胞因子替代治疗中以及器官移植等方面的应用研究已成为热点 [3] 。本文就MSC的细胞分离方法及培养条件,向各组织定向分化潜能及其生物学特性作一简要综述。

     1 MSC的分离及培养

    1.1 MSC的组织分布 一般认为,MSC只存在于骨髓中,但最近的研究发现,从人的骨骼肌中也分离出了MSC。它同样可以分化为骨骼肌管、平滑肌、软骨及脂肪 [4] 。此外也有人分别从骨外膜 [5] 和骨小梁 [6] 分离出MSC。Bethel等 [7] 研究发现MSC在胎儿骨髓中的含量较成人骨髓中的含量高,但在细胞形态学方面二者无差异。苏瑞军 [8] 的研究表明,胚胎骨髓间充质内骨干细胞较成人的幼稚,具有更强的自分泌因子以维持自身生长及分化的能力。因此常选用胎儿骨髓作为培养材料。

    1.2 分离方法 目前用于分离MSC的方法主要有三种:(1)密度梯度离心法:根据MSC与其它细胞的密度不同,采用Percoll分离液 ......

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