重组人Ⅱ型胶原蛋白免疫原性多肽表达的研究

http://www.100md.com 王宏坤 朱平 王彦宏 赵旭东 陈常庆

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     王宏坤；朱平；王彦宏；赵旭东；陈常庆 第四军医大学西京医院临床免疫科；第四军医大学西京医院临床免疫科 陕西西安710032；中国科学院上海生物工程研究中心 上海200233 细胞与分子免疫学杂志 2002 4

    关键词：Ⅱ型胶原蛋白；表达；类风湿性关节炎；多肽

    目的 构建编码人Ⅱ型胶原蛋白 2 5 0 2 70多肽片段(HuCⅡ 2 5 0 2 70 )的多聚基因 ,以获得高效表达、高度可溶和便于纯化的重组多肽基因。方法 选用大肠杆菌 (E .coli)偏爱密码子优化HuCⅡ 2 5 0 2 70的基因组成。通过化学合成和PCR法 ,获得HuCⅡ 2 5 0 2 70的基因 ,并利用BamHI和BglⅡ同裂酶进行酶切位点串联获得 6聚体。对影响重组HuCⅡ 2 5 0 2 70表达的各种因素进行系统研究 ,以获得优化表达的条件。对表达产物进行分离纯化。结果 酶切分析和DNA测序证实 ,6聚目的基因的构建正确。融合表达的量明显高于非融合表达 ,在优化条件下 ,可达 30 %。表...

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