重组乙型肝炎病毒变异s基因的表达及其抗原性的分析

http://www.100md.com 葛军辉 张乐之 姚玉成 刘会敏 王新民 余宏宇 何金 胡以平

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     葛军辉；张乐之；姚玉成；刘会敏；王新民；余宏宇；何金；胡以平 第二军医大学长征医院病理科 上海200003；第二军医大学长海医院实验诊断科 上海200433；第二军医大学基础部细胞生物学教研室 细胞与分子免疫学杂志 2002 6

    关键词：乙型肝炎表面抗原；变异；真核表达

    目的 构建乙型肝炎病毒 (HBV)变异s基因真核表达载体 ,研究变异所致乙肝表面抗原 (HBsAg)免疫学性状的改变。方法 利用DraⅢ和XhoⅠ双酶切含有突变位点的HBVDNA 1.2拷贝的质粒P3.8Ⅱ ,获得 90 4bp带有突变点的HBV S基因片段。将其置换含有HBVDNA(adr亚型 )S和S2片段的真核表达载体 pCMV S2 .S的相应片段 ,从而构建s基因nt5 87G→A突变的真核表达载体 pCMV S2 .S +14 5R ;并转染人肝癌细胞系HepG2 ,以获得分泌变异型HBsAg的细胞系。利用EIA及细胞免疫染色法 ,探讨变异抗原与抗 HBs结合力的变化。结果 构建了HBsAg的第 14 5位甘氨酸→精氨酸突变体的...

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