抗人精浆蛋白抗体Fab片段在大肠杆菌中表达及活性鉴定

http://www.100md.com 孙脊峰 杨洁 郝晓柯 赵晶 温伟红 金明 王成济 杨安钢

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     孙脊峰；杨洁；郝晓柯；赵晶；温伟红；金明；王成济；杨安钢 第四军医大学唐都医院肾脏内科；第四军医大学生物化学与分子生物学教研室 陕西西安710038 细胞与分子免疫学杂志 2003 5

    关键词：单克隆抗体；Fab；人精浆蛋白

    目的:构建编码抗人精浆蛋白抗体Fab基因的表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。方法:从克隆载体pUC19 К和pBluescriptKS(M13 ) Fd中,酶切获得抗人精浆蛋白单克隆抗体(mAb)Fd基因和К链基因。然后将Fd和К链基因重组到Fab表达载体pComb3中,构建抗人精浆蛋白Fab基因的重组表达载体pComb3 Fab ,并在XL1 Blue菌中表达。结果:经重组表达载体转化的XL1 Blue菌株可表达Fab基因。Westernblot和免疫细胞化学分析表明,表达产物Fab具有特异性结合精浆蛋白的活性。结论:抗人精浆蛋白Fab基因成功地获得,为进一步将其与抗肿瘤药物偶联用于前列腺癌的导向治疗创造了条...

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