人DOC-2氨基端PID结构域的克隆与原核表达

http://www.100md.com 刘淑娟 郑维国 纪宗玲 陈苏民 张新海 杨力军

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     刘淑娟；郑维国；纪宗玲；陈苏民；张新海；杨力军 第四军医大学西京医院妇产科；第四军医大学免疫学教研室；第四军医大学西京医院泌尿外科 陕西西安710032 细胞与分子免疫学杂志 2003 2

    关键词：DOC2；PID结构域；克隆；原核表达

    目的 :克隆人DOC 2氨基端PID结构域 (暂命名为nDOC 2 ) ,并在原核细胞中表达。方法 :用RT PCR从正常人卵巢组织中扩增nDOC 2基因 ,并克隆到载体 pUC 19中。经测序证实后 ,用BamHI/EcoRI双酶切 ,亚克隆到原核表达载体 pGEX 4T 1,并转化E .coliDH5α菌株。取工程菌 ,用IPTG诱导表达 ,对表达产物进行SDS PAGE鉴定。结果 :①经RT PCR、测序和酶切鉴定 ,成功地克隆了人nDOC 2基因。②经IPTG诱导的重组质粒pGEX 4T nDOC 2表达出相对分子质量 (Mr)约为 5 0 0 0 0的融合蛋白 ,与预期的结果相符。结论 :成功克隆到人DOC 2氨基端PID结构域 ,并在E .coliDH5α中表...

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