用抗HCV多抗从随机15肽库中筛选抗原表位

http://www.100md.com 朱继萍 温新宇 赵平 施明 贺永怀 姚志建 沈倍奋

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     柯屾；朱继萍；温新宇；施明；贺永怀；沈倍奋；赵平；姚志建 解放军总医院基础医学研究所；军事医学科学院基础医学研究所；第二军医大学微生物学教研室；北方基因中心 北京 100853 细胞与分子免疫学杂志 2003 1

    关键词：噬菌体随机肽库；抗原表位；丙型肝炎病毒

    目的:分析丙肝患者血清中抗HCV抗体的抗原表位。方法: 制备Protein A亲和层析柱,从丙肝患者血清中纯化、制备抗HCV多克隆抗体;并以此为筛选配基,对噬菌体表面展示的随机15肽库进行亲和筛选。结果:三轮筛选的投入产出比逐轮升高至3.3×10-3,假阳性率逐轮降低至0.2%,提示具有良好的富集效果。对从第3轮挑选出的16个克隆进行结合试验,发现9个克隆只与HCV抗体有较强的结合力而不与正常人血清起反应。测序表明,8个克隆的外源肽含有核心序列WPWS。用阳性噬菌体克隆检测20例丙肝患者血清,有程度不等的阳性反应。结论:用多克隆抗体从噬菌体随机肽库中,筛选到 ...

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