血清标本的外观检查不容忽视
血清标本的外观检查以往是一个重要的检查项目。标本黄色的深浅,即黄疸指数,作为黄疸的一个诊断指标,血清脂浊度作为高脂血症分型的重要依据。随着自动分析仪器的普及,已经很容易对血清胆红素及甘油三酯等的浓度进行准确定量,血清标本外观检查逐渐被人忽视。
许多大医院都引起了大型全自动生化分析仪,使生化检验的精确度和准确性都大为提高。检验人员基本很少观察标本,全靠仪器操作,这样虽然可提高工作效率,减少工作人员被传染的机会,但对异常标本经常忽视,这对生化检验的质量控制非常不利,有时会使某些检验结果产生重大误差。本文仅就血清标本外观检查的重要性作如下分析。
1 血清外观异常的种类及其可能对检验结果的影响
健康人正常饮食条件下空腹血清标本为淡黄色透明。常见的空腹血清标本异常有脂浊,黄疸,溶血,色浅及量相对增多、其它颜色等。
1.1 脂浊对检验结果的干扰 脂浊主要是由乳糜微粒增多引起,它对比色或比浊法的干扰为人所共识。脂浊可散射光线。如用比色法测定血清钙、果糖胺、肌酐、碱性磷酸酶和双缩脲法测量总蛋白等,在pH>10的强碱环境下,乳糜微粒中的甘油三酯可逐步皂化,使血清逐渐变清,吸光度下降,对结果造成负误差。其次,乳糜微粒所占的所取标本的容积,除甘油三酯测定外,几乎对所有血清成分测定都可产生负误差。如果是存放的标本,乳糜微粒上浮于血清标本上层,如直接从上层血清取样,容积误差会更大。
1.2 黄疸对检验结果的干扰 胆红素对比色分析的干扰已为大家所熟知,尤其是对反应结果产生的黄色和红色化合物的比色分析影响更大。在这种情况下,多数是用标本空白或两点比色法、速率法来消除胆红素的黄色对效果的干扰。但胆红素的黄色不稳定,随着胆红素被氧化成胆绿素,胆褐素而变色,因而,即使用两点法或速率法亦不能排除胆红素对结果的干扰,如高胆红素血症对速率法测定肌酐就产生很大的负干扰。
1.3 溶血对检验结果的干扰 溶血是各种原因引起的红细胞破坏,胞内物质进入血清,使血清显红色。溶血对血清成分检测的影响是多方面的:(1)血红素的红色对比色分析的正干扰。这种干扰可用空白或用两点比色法得以部分消除。但血红素中的亚铁离子可被测定试剂中的一些氧化剂如亚硝酸钠氧化成高铁血红素成黄褐色,对两点比色法造成一定的干扰,如血清总蛋白测定和血清蛋白电泳等。血红蛋白还可以对重氮法测定胆红素产生负干扰。(2)红细胞中高浓度K + 、LDH、AST及ACP等随着溶血,使血清中这些物质的浓度增高;相反,红细胞内浓度极低的物质,如脂蛋白、胆固醇脂、钠、钙等随着溶血,细胞内液体对血清的稀释作用亦不可忽视,尤其是重度溶血时。(3)红细胞内还含有较多的有机磷酸脂,非糖还原物质、非肌酐Jaffe反应物质等,随着溶血使这类物质在血清中浓度升高而对一些检验结果产生干扰。
1.4 血标本其他异常外观 (1)血细胞减少,健康人血块和红细胞约占50%左右(常速离心情况下),如血细胞部分<30%,主要见于各类贫血病人,有时也会出现在临床输液的同侧静脉采血情况下,血液被输注液体稀释。(2)药物和染料引起的异常颜色,如服用土霉素、四环素、核黄素、利福平等时黄色;靛氰绿排泄试验期间采集的血清呈现的绿色等。
2 血清外观检查在生化检验质控上的意义
2.1 发现和估计一些生化检验结果的系统误差,并采用适当措施加以消除或减轻 (1)如前述脂浊血清中的乳糜微粒对许多生化结果有正干扰或负干扰。在外观检查发现脂浊血清时,可根据脂浊程度对生化检验可能产生的干扰作出估价。为了消除脂浊对生化检验结果的干扰,可采用过滤、高速离心、除蛋白等方法。(2)黄疸血清中高胆红素浓度对一些生化结果有重大干扰,可采用除蛋白、加胆红素氧化酶或高铁氰化钾等氧化剂预先将胆红素氧化成较稳定的胆褐素,可大大减低或消除胆红素的干扰。
2.2 有利于发现和纠正一些检验操作过程中偶尔误差和差错 如在外观检查时为脂浊血清,提示有高甘油三酯血症;黄疸血清提示高胆红素血症,若检验结果与外观提示不一致,应查找原因。首先应复查,如果仍然如此,有可能是低蛋白血症引起的脂浊;药物或染料的黄色造成的假性“黄疸”血清。在进一步验证中有可能发现和纠正操作过程中的偶然误差和差错。
2.3 发现标本采集过程中的差错 (1)临床在抢救病人时常有忙乱中从输注液的同侧静脉采血做电解质、肾功能等急诊检验。这种血液标本因被输液体所稀释,血清颜色变浅,细胞明显减少,提示检验人员应注意鉴别标本采集有无错误,从检验结果上看,如输注糖盐水时,则血清氯、钠和糖浓度明显增高。其余成分则明显偏低,以此可作为判断。 (2)如发现血清呈绿色或红色等异常颜色,有可能是染料污染(如注射器、试管等);靛氰绿排泄试验期采血;采血过程中人为造成的溶血。如果是明显绿色或红色,说明污染或溶血严重,将对很多生化检验结果造成干扰,这时应重新采集标本检查。
从以上看出血清标本的外观检查对生化检验的质量控制非常重要,在大规模自动化检测时代亦不能忽视。
(收稿日期:2004-06-07)
(编辑海 涛)
作者单位:234000安徽省宿州市市立医院检验科, http://www.100md.com(王钦利)
许多大医院都引起了大型全自动生化分析仪,使生化检验的精确度和准确性都大为提高。检验人员基本很少观察标本,全靠仪器操作,这样虽然可提高工作效率,减少工作人员被传染的机会,但对异常标本经常忽视,这对生化检验的质量控制非常不利,有时会使某些检验结果产生重大误差。本文仅就血清标本外观检查的重要性作如下分析。
1 血清外观异常的种类及其可能对检验结果的影响
健康人正常饮食条件下空腹血清标本为淡黄色透明。常见的空腹血清标本异常有脂浊,黄疸,溶血,色浅及量相对增多、其它颜色等。
1.1 脂浊对检验结果的干扰 脂浊主要是由乳糜微粒增多引起,它对比色或比浊法的干扰为人所共识。脂浊可散射光线。如用比色法测定血清钙、果糖胺、肌酐、碱性磷酸酶和双缩脲法测量总蛋白等,在pH>10的强碱环境下,乳糜微粒中的甘油三酯可逐步皂化,使血清逐渐变清,吸光度下降,对结果造成负误差。其次,乳糜微粒所占的所取标本的容积,除甘油三酯测定外,几乎对所有血清成分测定都可产生负误差。如果是存放的标本,乳糜微粒上浮于血清标本上层,如直接从上层血清取样,容积误差会更大。
1.2 黄疸对检验结果的干扰 胆红素对比色分析的干扰已为大家所熟知,尤其是对反应结果产生的黄色和红色化合物的比色分析影响更大。在这种情况下,多数是用标本空白或两点比色法、速率法来消除胆红素的黄色对效果的干扰。但胆红素的黄色不稳定,随着胆红素被氧化成胆绿素,胆褐素而变色,因而,即使用两点法或速率法亦不能排除胆红素对结果的干扰,如高胆红素血症对速率法测定肌酐就产生很大的负干扰。
1.3 溶血对检验结果的干扰 溶血是各种原因引起的红细胞破坏,胞内物质进入血清,使血清显红色。溶血对血清成分检测的影响是多方面的:(1)血红素的红色对比色分析的正干扰。这种干扰可用空白或用两点比色法得以部分消除。但血红素中的亚铁离子可被测定试剂中的一些氧化剂如亚硝酸钠氧化成高铁血红素成黄褐色,对两点比色法造成一定的干扰,如血清总蛋白测定和血清蛋白电泳等。血红蛋白还可以对重氮法测定胆红素产生负干扰。(2)红细胞中高浓度K + 、LDH、AST及ACP等随着溶血,使血清中这些物质的浓度增高;相反,红细胞内浓度极低的物质,如脂蛋白、胆固醇脂、钠、钙等随着溶血,细胞内液体对血清的稀释作用亦不可忽视,尤其是重度溶血时。(3)红细胞内还含有较多的有机磷酸脂,非糖还原物质、非肌酐Jaffe反应物质等,随着溶血使这类物质在血清中浓度升高而对一些检验结果产生干扰。
1.4 血标本其他异常外观 (1)血细胞减少,健康人血块和红细胞约占50%左右(常速离心情况下),如血细胞部分<30%,主要见于各类贫血病人,有时也会出现在临床输液的同侧静脉采血情况下,血液被输注液体稀释。(2)药物和染料引起的异常颜色,如服用土霉素、四环素、核黄素、利福平等时黄色;靛氰绿排泄试验期间采集的血清呈现的绿色等。
2 血清外观检查在生化检验质控上的意义
2.1 发现和估计一些生化检验结果的系统误差,并采用适当措施加以消除或减轻 (1)如前述脂浊血清中的乳糜微粒对许多生化结果有正干扰或负干扰。在外观检查发现脂浊血清时,可根据脂浊程度对生化检验可能产生的干扰作出估价。为了消除脂浊对生化检验结果的干扰,可采用过滤、高速离心、除蛋白等方法。(2)黄疸血清中高胆红素浓度对一些生化结果有重大干扰,可采用除蛋白、加胆红素氧化酶或高铁氰化钾等氧化剂预先将胆红素氧化成较稳定的胆褐素,可大大减低或消除胆红素的干扰。
2.2 有利于发现和纠正一些检验操作过程中偶尔误差和差错 如在外观检查时为脂浊血清,提示有高甘油三酯血症;黄疸血清提示高胆红素血症,若检验结果与外观提示不一致,应查找原因。首先应复查,如果仍然如此,有可能是低蛋白血症引起的脂浊;药物或染料的黄色造成的假性“黄疸”血清。在进一步验证中有可能发现和纠正操作过程中的偶然误差和差错。
2.3 发现标本采集过程中的差错 (1)临床在抢救病人时常有忙乱中从输注液的同侧静脉采血做电解质、肾功能等急诊检验。这种血液标本因被输液体所稀释,血清颜色变浅,细胞明显减少,提示检验人员应注意鉴别标本采集有无错误,从检验结果上看,如输注糖盐水时,则血清氯、钠和糖浓度明显增高。其余成分则明显偏低,以此可作为判断。 (2)如发现血清呈绿色或红色等异常颜色,有可能是染料污染(如注射器、试管等);靛氰绿排泄试验期采血;采血过程中人为造成的溶血。如果是明显绿色或红色,说明污染或溶血严重,将对很多生化检验结果造成干扰,这时应重新采集标本检查。
从以上看出血清标本的外观检查对生化检验的质量控制非常重要,在大规模自动化检测时代亦不能忽视。
(收稿日期:2004-06-07)
(编辑海 涛)
作者单位:234000安徽省宿州市市立医院检验科, http://www.100md.com(王钦利)