【摘要】 目的 构建含有HIV tip30与人IFN-γ基因的真核共表达质粒的减毒伤寒沙门菌，以进一步观察以减毒伤寒沙门菌为载体的，联合HIV tip30与IFN-γ的基因对腺样囊性癌的治疗作用。方法 以PCR扩增HIV tip30和人IFN-γ基因，分别插入真核表达载体pCI-neo，构建成重组表达质粒pCI-tip30和pCI-IFN，再构建HIV tip30与人IFN-γ基因的共表达质粒pCI-tip30/IFN。分别将重组表达质粒转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL7207，得到口服携带基因的减毒伤寒沙门菌，体外转染小鼠NIH3T3细胞株，用免疫印迹和ELISA对表达产物进行鉴定。结果 免疫印迹试验表明携带质粒pCI-tip30和pCI-tip30/IFN的减毒伤寒沙门菌转染的小鼠NIH3T3细胞能表达tip30蛋白，ELISA检测则显示携带质粒pCI-IFN和pCI-tip30/IFN的减毒伤寒沙门菌转染的小鼠NIH3T3细胞能分泌性表达人IFN-γ。结论 成功研制了分别含有真核表达质粒pCI-tip30、pCI-IFN、pCI-tip30/IFN的口服减毒伤寒沙门菌，为下一步以减毒伤寒沙门菌为载体，联合HIV tip30与人IFN-γ基因治疗腺样囊性癌的研究奠定了基础。

    关键词 Tip30 干扰素-γ 减毒伤寒沙门菌 基因治疗

    Development of a recombinant attenuated Salmonella typhimurium

    harboring Tip30and human IFN-γgenes

    Jiang Zhongming，Cao Zhizhong，L Chuntang，et al.

    Department of Stomatology，The Second Military Medical University，Shanghai200433.

    【Abstract】 Objective To develop a recombinant attenuated Salmonella typhimurium harboring an eukaryotic co-expression plasmid encoding Tip30and human IFN-γgene for further study of gene therapy on adenoid cystic carcinoma.Methods The tip30and human IFN-γgene were amplified by PCR and inserted into eukaryotic expresˉsion vector pCI-neo for the construction of expression plasmids pCI-tip30and pCI-IFN ......