缺血性心脏病即冠心病，是指冠状动脉粥样硬化使血管阻塞导致心肌缺氧而引起的心脏病，其确定的发病机理尚未完全明了。近年来，随着人们对自身免疫产生的病理生理现象的深入了解，发现有些自身抗体与缺血性心脏病的发生发展密切相关，特别是抗心磷脂抗体(ACA)在缺血性心脏病的发生发展中起一定的作用。本研究旨在通过免疫组化法检测心肌梗死患者心肌细胞内自身抗体的存在。

     1 材料与方法

    1.1 取材 治疗后最终死亡的10例心肌梗死患者在经患者家属同意后，由临床大夫用BARK18G活检针穿取心肌组织，将穿刺组织用生理盐水冲洗后放进10%福尔马林固定液内，以备制片用。同时取材了3例肺心衰患者和3例车祸死亡患者的心肌组织作为对照，处理同上。

    1.2 组织处理

    1.2.1 固定 所取得的组织用缓冲甲醇固定液在室温下固定45min。

    1.2.2 脱水、透明、浸蜡、包埋 梯度酒精脱水，以70%→80%→90%→95%→无水酒精，每梯两缸，每缸20min，二甲苯透明，分两缸，每缸10min，浸蜡包埋，优质石蜡58℃～62℃两缸，每缸20in。

    1.2.3 载玻片预处理 玻片浸入2%APES丙酮溶液中30秒，纯丙酮涮一下后蒸馏水洗3次，晾干备用。

    1.2.4 组织切片贴片 将蜡块修理成小梯形块，置于冰箱预冷40min后在切片机上切出2～3μm的组织薄片，并将组织薄片贴到载玻片上。

    1.3 免疫组化染色检测 免疫组化抗人IgG、IgM、IgA检测试剂盒由北京中山生物技术有限公司提供。染色原理:以人免疫球蛋白IgG、IgM、IgA为靶抗原的鼠抗人抗体作为一抗，以生物素标记通用型二抗作为桥梁，将辣根过氧化物酶标记链酶卵白素连接在组织细胞上，最后用DAB显色。(1)石蜡切片脱蜡入水。(2)3%H 2 O 2 室温孵育10min，以去除内源性过氧化物酶。(3)PBS冲洗，2min×3次，擦干组织块周围多余的液体。(4)抗原修复:玻片浸入0.01M枸橼酸缓冲液中 ......