关于新鲜和陈旧标本中结核分枝杆菌检测方法的探讨
因为在离体环境中结核杆菌生活状态有差异，新鲜标本和陈旧标本中的检测方法也不尽相同，应当选择相
对灵敏的方法检测。为了选择一种方便的检测方法，我们采用了抗酸染色、细菌培养、荧光染色、聚合酶联反应(PCR)4种方法分别检测陈旧标本和新鲜标本中结核分枝杆菌，结果如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源 106份标本来自2002年3～11月本院肺科结核患者的痰、脑脊液、胸腹水等并置于灭菌青霉素小瓶中。选取45份标本，取每份标本的1/2做抗酸染色、细菌培养、荧光染色、PCR检测。其余的1/2留在各容器中4℃冰箱保存，直至2004年3月再用4种方法检测。
1.2 检测方法 抗酸染色、细菌培养按实验室常规方法检测。荧光染色试剂金胺0-罗丹明，结核分枝杆菌在背景中呈现金黄色荧光。PCR采用北京人民医院结核PCR检测试剂盒。
1.3 统计学方法 4种方法阳性率比较用卡方检验;敏感性、特异性用诊断试验四格表计算法。
2 结果
新鲜标本抗酸染色、细菌培养、荧光染色、PCR4种方法阳性率分别为30.6%、36.6%、48.2%、50%;陈旧标本分别为24.8%、31.8%、45.7%和0。结果显示，PCR检测新鲜标本中的MTB敏感性最高，与抗酸染色比较，差异有显著性(P<0.05)，但不能检测陈旧标本中的MTB。可能是PCR扩增技术需要标本的脱氧核糖核酸有较高活动性，荧光染色在新旧两种标本中均有较高敏感性。
总之，新鲜标本可用于抗酸染色和细菌培养检测，但敏感性低。荧光染色对新旧标本检测均可获可靠结果，可能是由于荧光素稳定，发光使信号放大，在荧光显微镜下更容易观察。PCR对新鲜标本敏感性高，但对放置过久的标本不能发挥作用，因此应尽快处理采集的标本，方可获得可靠结果。
(收稿日期:2004-06-08)
作者单位:056001河北省邯郸市传染病医院
(编辑刘 静), http://www.100md.com(孙占文)
对灵敏的方法检测。为了选择一种方便的检测方法，我们采用了抗酸染色、细菌培养、荧光染色、聚合酶联反应(PCR)4种方法分别检测陈旧标本和新鲜标本中结核分枝杆菌，结果如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源 106份标本来自2002年3～11月本院肺科结核患者的痰、脑脊液、胸腹水等并置于灭菌青霉素小瓶中。选取45份标本，取每份标本的1/2做抗酸染色、细菌培养、荧光染色、PCR检测。其余的1/2留在各容器中4℃冰箱保存，直至2004年3月再用4种方法检测。
1.2 检测方法 抗酸染色、细菌培养按实验室常规方法检测。荧光染色试剂金胺0-罗丹明，结核分枝杆菌在背景中呈现金黄色荧光。PCR采用北京人民医院结核PCR检测试剂盒。
1.3 统计学方法 4种方法阳性率比较用卡方检验;敏感性、特异性用诊断试验四格表计算法。
2 结果
新鲜标本抗酸染色、细菌培养、荧光染色、PCR4种方法阳性率分别为30.6%、36.6%、48.2%、50%;陈旧标本分别为24.8%、31.8%、45.7%和0。结果显示，PCR检测新鲜标本中的MTB敏感性最高，与抗酸染色比较，差异有显著性(P<0.05)，但不能检测陈旧标本中的MTB。可能是PCR扩增技术需要标本的脱氧核糖核酸有较高活动性，荧光染色在新旧两种标本中均有较高敏感性。
总之，新鲜标本可用于抗酸染色和细菌培养检测，但敏感性低。荧光染色对新旧标本检测均可获可靠结果，可能是由于荧光素稳定，发光使信号放大，在荧光显微镜下更容易观察。PCR对新鲜标本敏感性高，但对放置过久的标本不能发挥作用，因此应尽快处理采集的标本，方可获得可靠结果。
(收稿日期:2004-06-08)
作者单位:056001河北省邯郸市传染病医院
(编辑刘 静), http://www.100md.com(孙占文)