乙肝的基因治疗
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乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个世界范围的卫生问题。随着科学技术的发展，基因工程技术的进步，基因治疗在抗HBV感染的研究中崭露头角。基因治疗指从基因水平抑制HBV的复制，达到从根本上治疗乙肝的目的。目前，乙肝的基
因治疗技术尚不是十分成熟，但为治疗乙肝开辟了新的途径。
■反义核苷酸疗法
这种方法指利用一小段外源性DNA或RNA通过碱基互补配对原则与靶细胞中的mRNA或DNA结合成稳定的互补结构，从而影响靶细胞中的病毒复制、转录、翻译，同时可激活RNA酶和利用CPG序列诱导免疫反应等非反义机制。
反义核苷酸技术共经历了三代的发展：第一代的反义DNA；第二代的反义RNA；第三代的核酸。目前，反义寡脱氧核糖核苷酸(ASODN)治疗乙肝已进入Ⅰ～Ⅲ期临床评价，反义RNA及多靶位核酶的体外实验也显示了其成为新兴的基因靶
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向药物的诱人前景。
■治疗性疫苗
核酸疫苗又称DNA疫苗，即将编码无毒力但有抗原性的病毒蛋白的基因克隆入真核表达载体接种人体，借助宿主细胞进行表达，合成的抗原可诱导宿主细胞的免疫应答，以达到预防和治疗的目的。这种基因疫苗的优点是可诱导体液和细
胞双重免疫，清除病毒及病毒感染的细胞。有些细胞因子，如IFN-α、IL-2及IL-12等可能对治疗HBV慢性感染会有帮助。因此，有人研究开发了表达α干扰素、IL-12等细胞因子的基因疫苗。这些疫苗与其他的DNA疫苗联合应用，能进
一步增强DNA疫苗的治疗效果。PowderJect公司的乙型肝炎DNA疫苗用于人体后被证实可产生保护性免疫反应。
■胞内抗体
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胞内抗体是指将所需抗体的编码基因导入细胞，在靶细胞内表达出抗体并与相应HBV抗原结合，抑制病毒的包装和出胞过程，以达到治疗的目的。应用单克隆抗体技术，可不经人体免疫而得到人源化基因抗体。利用这种人源化抗体进行
乙肝基因治疗，可将本来不在胞内表达、进入不到胞内的抗体分子导入细胞内进行表达，阻断HBV的生活周期，达到治疗目的。最近，科学家合成了一段针对核心抗原(HBcAg)的单链抗体(SFV)基因，将其作为目的基因导入可表达HBV的HB611细胞内，产生的抗HBcAg的SFV可显著性抑制HBV的复制。
■细胞内干涉性蛋白疗法
外源性基因转导表达技术可将一种具有特定功能的基因导入靶细胞，利用该基因的表达产物在靶细胞内发挥抗病毒作用。目前，相关的研究主要是将一些突变失活的特定基因导入受感染细胞，与野生型进行竞争，以抑制其活性，从而抑制病毒复制。显性失活的核心蛋白突变型基因、无活性突变型HBV反式激活蛋白等都属于这一类。
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■自杀基因
近年，自杀基因的转基因表达也成为乙肝基因治疗的研究热点。它是将一种引发细胞坏死或细胞程序化死亡的基因导入细胞中，在合适的条件下引发病毒感染细胞的自杀死亡，清除病毒感染的细胞，达到抗病毒治疗之目的。因为这种目的基因可引发靶细胞的自杀死亡，因此，称之为“自杀基因”。
乙肝病毒的复制方式类似逆转录病毒，第四军医大学病原生物学教研室研究人员依据核衣壳导向的病毒灭活原理构建了以乙肝病毒核心蛋白(HBVc)为靶向分子，人嗜酸性粒细胞来源的神经毒素(hEDN)为效应分子的融合基因——靶向核糖核酸酶(TR)基因，HBVc是乙肝病毒包装过程中不可缺少的成分，hEDN的本质是一种核糖核酸酶，可以特异性降解乙肝病毒的前基因组RNA(PgRNA)。将该融合基因的真核表达载体转入2.2.15细胞发现，TR可以有效的抑制乙肝病毒的复制。
另外，RNA诱饵、反基因策略等研究也在不断深入，有望为乙型肝炎的治疗带来新的曙光。
基因治疗的主要问题在于治疗用核酸或蛋白质的稳定性、免疫源性和与靶细胞特异性识别的能力及其在感染的肝细胞中表达、释放的水平和持久性。但是，基因治疗从分子水平入手，能在不同的水平上抑制病毒的复制，从根本上解决感染的问题，所以基因治疗将可能是最有效、最有发展前景的治疗乙肝的方法之一。, http://www.100md.com
因治疗技术尚不是十分成熟，但为治疗乙肝开辟了新的途径。
■反义核苷酸疗法
这种方法指利用一小段外源性DNA或RNA通过碱基互补配对原则与靶细胞中的mRNA或DNA结合成稳定的互补结构，从而影响靶细胞中的病毒复制、转录、翻译，同时可激活RNA酶和利用CPG序列诱导免疫反应等非反义机制。
反义核苷酸技术共经历了三代的发展：第一代的反义DNA；第二代的反义RNA；第三代的核酸。目前，反义寡脱氧核糖核苷酸(ASODN)治疗乙肝已进入Ⅰ～Ⅲ期临床评价，反义RNA及多靶位核酶的体外实验也显示了其成为新兴的基因靶
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向药物的诱人前景。
■治疗性疫苗
核酸疫苗又称DNA疫苗，即将编码无毒力但有抗原性的病毒蛋白的基因克隆入真核表达载体接种人体，借助宿主细胞进行表达，合成的抗原可诱导宿主细胞的免疫应答，以达到预防和治疗的目的。这种基因疫苗的优点是可诱导体液和细
胞双重免疫，清除病毒及病毒感染的细胞。有些细胞因子，如IFN-α、IL-2及IL-12等可能对治疗HBV慢性感染会有帮助。因此，有人研究开发了表达α干扰素、IL-12等细胞因子的基因疫苗。这些疫苗与其他的DNA疫苗联合应用，能进
一步增强DNA疫苗的治疗效果。PowderJect公司的乙型肝炎DNA疫苗用于人体后被证实可产生保护性免疫反应。
■胞内抗体
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胞内抗体是指将所需抗体的编码基因导入细胞，在靶细胞内表达出抗体并与相应HBV抗原结合，抑制病毒的包装和出胞过程，以达到治疗的目的。应用单克隆抗体技术，可不经人体免疫而得到人源化基因抗体。利用这种人源化抗体进行
乙肝基因治疗，可将本来不在胞内表达、进入不到胞内的抗体分子导入细胞内进行表达，阻断HBV的生活周期，达到治疗目的。最近，科学家合成了一段针对核心抗原(HBcAg)的单链抗体(SFV)基因，将其作为目的基因导入可表达HBV的HB611细胞内，产生的抗HBcAg的SFV可显著性抑制HBV的复制。
■细胞内干涉性蛋白疗法
外源性基因转导表达技术可将一种具有特定功能的基因导入靶细胞，利用该基因的表达产物在靶细胞内发挥抗病毒作用。目前，相关的研究主要是将一些突变失活的特定基因导入受感染细胞，与野生型进行竞争，以抑制其活性，从而抑制病毒复制。显性失活的核心蛋白突变型基因、无活性突变型HBV反式激活蛋白等都属于这一类。
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■自杀基因
近年，自杀基因的转基因表达也成为乙肝基因治疗的研究热点。它是将一种引发细胞坏死或细胞程序化死亡的基因导入细胞中，在合适的条件下引发病毒感染细胞的自杀死亡，清除病毒感染的细胞，达到抗病毒治疗之目的。因为这种目的基因可引发靶细胞的自杀死亡，因此，称之为“自杀基因”。
乙肝病毒的复制方式类似逆转录病毒，第四军医大学病原生物学教研室研究人员依据核衣壳导向的病毒灭活原理构建了以乙肝病毒核心蛋白(HBVc)为靶向分子，人嗜酸性粒细胞来源的神经毒素(hEDN)为效应分子的融合基因——靶向核糖核酸酶(TR)基因，HBVc是乙肝病毒包装过程中不可缺少的成分，hEDN的本质是一种核糖核酸酶，可以特异性降解乙肝病毒的前基因组RNA(PgRNA)。将该融合基因的真核表达载体转入2.2.15细胞发现，TR可以有效的抑制乙肝病毒的复制。
另外，RNA诱饵、反基因策略等研究也在不断深入，有望为乙型肝炎的治疗带来新的曙光。
基因治疗的主要问题在于治疗用核酸或蛋白质的稳定性、免疫源性和与靶细胞特异性识别的能力及其在感染的肝细胞中表达、释放的水平和持久性。但是，基因治疗从分子水平入手，能在不同的水平上抑制病毒的复制，从根本上解决感染的问题，所以基因治疗将可能是最有效、最有发展前景的治疗乙肝的方法之一。, http://www.100md.com