微量取血测定25(OH)2D3对婴幼儿佝偻病早期诊断的研究
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张家信 李义民 田庆春 乔欣 张忠新 吕莉
300074 天津市儿童保健所微量取血测定25(OH)2D3对婴幼儿佝偻病
关键词: 临床经验交流
维生素D(简称VD)缺乏性佝偻病是影响中国儿童身心健康的“四病”之一。围绕该病的诊断问题许多学者做了多年的探讨[1]，确认血清25(OH)2D3是VD在体内的主要活性代谢产物，是评价VD营养状况及诊断佝偻病的可靠指标[2]，但由于需静脉采血难以被婴幼儿及家长接受，同时也缺少适应于本地区实际的诊断界值。因此本课题建立了25(OH)2D3微量化采血及测试方法，拟取代原静脉采血测试，并应用于248名0～3岁儿童现场测试，确定25(OH)2D3正常参照范围及佝偻病的诊断界值，并提出VD缺乏症的诊断界值，用以评价儿童VD营养状况。
对象和方法：1.研究对象和分组：选择儿童保健所管辖地段0～3岁婴幼儿作为研究对象，要求被观察儿：(1)近期无感染(上呼吸道感染、腹泻等)；(2)无心、肝、肾及除佝偻病以外的骨代谢疾患。调查儿童376名，符合上述条件，调查资料完整的0～3岁者总计248名，其中男115名，女133名。每半岁为一年龄组，共分为6组。
, 百拇医药
从248名中随机选择50名作为方法学研究对象，年龄范围8个月～2岁。选择正常成人21名，年龄范围22～48岁，其中男9名，女12名。所有方法学研究对象同时采集静脉血与左手无名指外周血，余198名0～3岁者仅采取外周血。
2.研究方法：(1)临床检查：结合儿童保健系统查体，详细询问喂养史、生长发育史、神经系统症状、VD与钙剂补充情况，并由有经验的医生进行全面体检，详细记载有无佝偻病的体征。(2)微量化采血方法：①用具：11号手术刀片及刀托：内径1.2 mm，长90 mm玻璃毛细管。②方法：用11号手术刀片附以刀托从左手无名指穿刺约3 mm，在较大范围稍加压力，以玻璃毛细管吸取血液，然后用橡皮泥及火漆封口，避光以1 500r/m离心分离血清，-20℃保存。
3.血液指标检验及仪器应用：血清25(OH)2D3竞争结合蛋白测定法：北京市创伤骨科研究所提供25(OH)2D3测定药盒[3]，25羟基(26，27-甲基-H)维生素D3[692GBQ/mmol(18.7 Ci/mmol)]；25羟基维生素D3；[25(OH)2D3]标准品由瑞士H. Gutmmann提供，其它均为进口或国产优级纯制品。
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X线左腕正位象：由有经验的放射科医生固定专人、固定标准进行拍摄。然后由有经验的放射科专家阅片确定诊断。
结果：1.微量化采血与静脉采血测定结果比较(表1)：对50名儿童(8个月～2岁)和21名成人(22～48岁)同时采集其静脉血与自身外周血(静脉需血量100～200 μl，外周微量血测试仅需60 μl)。无论是静脉血还是微量血检测结果成人均高于儿童，但差异无显著性，t分别为1.324和1.343，P均>0.05，两组静脉血与微量血自身对照差异无显著性，而有极显著意义的正相关(表1)。
2.不同年龄组25(OH)2D3测定结果(表2)：血清25(OH)2D3在男女性别间无统计学差异，不再按性别进行分组分析。以半岁为一年龄组将248名0～3岁儿童分为6组，比较观察25(OH)2D3浓度变化，可见0～6个月组小儿25(OH)2D3明显低于其他年龄组，6个月以上各年龄组间差异无统计学意义。
, 百拇医药 3.佝偻病组与正常组血清25(OH)2D3浓度的比较(表3)：按照全国
表2 248名不同年龄组0～3岁儿童微
量化采血25(OH)2D3测值(±s，μg/L)
年龄(月) 例数 25(OH)2D3
0～
51
19±6
6～ 56 24±9
12～ 51 24±6
18～ 38 21±5
24～ 29 24±6
30～ 23 23±6
合计 248 22±7
偻病防治协作组拟定的X线诊断标准，发现佝偻病X线表现儿童27名(初期24名，激期3名)，佝偻病组微量血25(OH)2D3低于正常儿，t=4.977，P, 百拇医药
300074 天津市儿童保健所微量取血测定25(OH)2D3对婴幼儿佝偻病
关键词: 临床经验交流
维生素D(简称VD)缺乏性佝偻病是影响中国儿童身心健康的“四病”之一。围绕该病的诊断问题许多学者做了多年的探讨[1]，确认血清25(OH)2D3是VD在体内的主要活性代谢产物，是评价VD营养状况及诊断佝偻病的可靠指标[2]，但由于需静脉采血难以被婴幼儿及家长接受，同时也缺少适应于本地区实际的诊断界值。因此本课题建立了25(OH)2D3微量化采血及测试方法，拟取代原静脉采血测试，并应用于248名0～3岁儿童现场测试，确定25(OH)2D3正常参照范围及佝偻病的诊断界值，并提出VD缺乏症的诊断界值，用以评价儿童VD营养状况。
对象和方法：1.研究对象和分组：选择儿童保健所管辖地段0～3岁婴幼儿作为研究对象，要求被观察儿：(1)近期无感染(上呼吸道感染、腹泻等)；(2)无心、肝、肾及除佝偻病以外的骨代谢疾患。调查儿童376名，符合上述条件，调查资料完整的0～3岁者总计248名，其中男115名，女133名。每半岁为一年龄组，共分为6组。
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从248名中随机选择50名作为方法学研究对象，年龄范围8个月～2岁。选择正常成人21名，年龄范围22～48岁，其中男9名，女12名。所有方法学研究对象同时采集静脉血与左手无名指外周血，余198名0～3岁者仅采取外周血。
2.研究方法：(1)临床检查：结合儿童保健系统查体，详细询问喂养史、生长发育史、神经系统症状、VD与钙剂补充情况，并由有经验的医生进行全面体检，详细记载有无佝偻病的体征。(2)微量化采血方法：①用具：11号手术刀片及刀托：内径1.2 mm，长90 mm玻璃毛细管。②方法：用11号手术刀片附以刀托从左手无名指穿刺约3 mm，在较大范围稍加压力，以玻璃毛细管吸取血液，然后用橡皮泥及火漆封口，避光以1 500r/m离心分离血清，-20℃保存。
3.血液指标检验及仪器应用：血清25(OH)2D3竞争结合蛋白测定法：北京市创伤骨科研究所提供25(OH)2D3测定药盒[3]，25羟基(26，27-甲基-H)维生素D3[692GBQ/mmol(18.7 Ci/mmol)]；25羟基维生素D3；[25(OH)2D3]标准品由瑞士H. Gutmmann提供，其它均为进口或国产优级纯制品。
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X线左腕正位象：由有经验的放射科医生固定专人、固定标准进行拍摄。然后由有经验的放射科专家阅片确定诊断。
结果：1.微量化采血与静脉采血测定结果比较(表1)：对50名儿童(8个月～2岁)和21名成人(22～48岁)同时采集其静脉血与自身外周血(静脉需血量100～200 μl，外周微量血测试仅需60 μl)。无论是静脉血还是微量血检测结果成人均高于儿童，但差异无显著性，t分别为1.324和1.343，P均>0.05，两组静脉血与微量血自身对照差异无显著性，而有极显著意义的正相关(表1)。
2.不同年龄组25(OH)2D3测定结果(表2)：血清25(OH)2D3在男女性别间无统计学差异，不再按性别进行分组分析。以半岁为一年龄组将248名0～3岁儿童分为6组，比较观察25(OH)2D3浓度变化，可见0～6个月组小儿25(OH)2D3明显低于其他年龄组，6个月以上各年龄组间差异无统计学意义。
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表2 248名不同年龄组0～3岁儿童微
量化采血25(OH)2D3测值(±s，μg/L)
年龄(月) 例数 25(OH)2D3
0～
51
19±6
6～ 56 24±9
12～ 51 24±6
18～ 38 21±5
24～ 29 24±6
30～ 23 23±6
合计 248 22±7
偻病防治协作组拟定的X线诊断标准，发现佝偻病X线表现儿童27名(初期24名，激期3名)，佝偻病组微量血25(OH)2D3低于正常儿，t=4.977，P, 百拇医药