双表型急性白血病的MIC分型研究
http://www.100md.com
苏健华 辜梅新 黄梓伦
双表型急性白血病是急性混合性白血病(HAL)的其中一类，指的是病人骨髓的同一白血病细胞同时表达淋巴系和髓系特征[1]。我院1997年诊断成人和儿童急性白血病52例，全部进行MIC分型，其中15例为双表型急性白血病，占总数的28%。
1 资料与方法
1.1 研究对象 15例病例中，男性9例，女性6例，其中5例为儿童，年龄1.5～49岁
1.2 形态学及细胞组织化学检测 治疗前骨髓按1986年全国会议制定的白血病FAB分型标准。采用的组织化学染色主要有：碱性磷酸酶(ALP)，过氧化酶(POX)，醋酸AS-D奈酚脂酶(Naphthol AS-D Chioroacetate AS-DEC),A-丁酸奈酚脂酶(Naphthol Butyrate NBE)等(DCE与NBE为SIGMA产品)。
, 百拇医药
1.3 免疫表型检测 应用流式细胞仪(BD公司U.S.A)，三种荧光抗体：FTTC(异硫氰酸荧光素)PE(澡红蛋白荧光素)和Precp荧光素。McAb表达T淋巴系：CD3 CD7，B淋巴系CD10 CD19 CD20及髓系CD13 CD14 CD15 CD33，干细胞系CD34 CD38。用上述不同荧光的McAb抗体同时标记待测样本，搭配的方式为：CD34/33/38 CD34/13/19 CD15/14 CD7/20/3。CD45辅助设门，设门在病变细胞群。结果由分析软件处理，点维图，多参数分析，淋巴系≥20%，粒系≥30%为阳性对照[2]。McAb试剂由美国BD公司提供。
1.4 细胞遗传学检测 染色体标本取材于骨髓。培养方法：用直接法和24 h法，收集有丝分裂期的细胞。用热变性方法显带。并根据国际人类细胞命名法(ISCN)进行核型分析。
2 结果
2.1 细胞形态学 15例双表型急性白血病骨髓及外周血涂片，根据FAB标准分型，分为急淋(ALL)7例，急非淋(ANLL)或不能分型的8例，组织细胞化学染色：ALP，POX，AS-D，AS-DCE，全部均阴性。
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2.2 免疫学分型 细胞免疫分型：T-Ly-G白血病2例，抗原表达为CD34+CD38+CD33+CD13+CD15-CD14-CD7+CD3+CD19-，B-Ly-G白血病13例，抗原表达为CD34+CD33+CD38+CD13+CD15-CD14-CD19+CD7-CD3-。
2.3 细胞遗传学 15例患者的染色体均有克隆性异常，数目的异常表现为染色体的数目增加或减少，结构的异常表现为染色体的平衡移位，臂间缺失。
3 讨论
形态学是诊断急、慢性白血病的基础，但对双表型急性白血病有困难。本文根据形态学诊断为ALL的7例患者，是根据细胞胞体的大小、核染色质的粗细、POX阴性而下的结论。另外8例患者由于细胞形态既不象淋巴细胞又不象粒细胞胞浆中无Auer小体，所有的组化都阴性，因此无法按FAB分型。
免疫学分型对形态学分型有困难的上述类型白血病起决定作用。我们利用流式细胞术，三种不同的荧光抗体一起标记测定其白血病细胞表面抗原，其细胞同时有两种抗原表达，在点维图的URL区CD19 PE CD13 Precp呈双阳性表达，证实为B-Ly-G双表型白血病，而不是单纯的ALL。另8例形态学无法分类的也通过免疫学分型为T-Ly-G和B-Ly-G白血病。因此，急性双表型白血病的诊断是由免疫学分型决定，特别是利用FCM，经荧光双染色容易确定HAL类型。
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细胞遗传学改变常呈非特异性[3]，或称多态性变异。本文中的15例急性双表型白血病患者的染色体改变呈非特异性，只能作为一个辅助的诊断。
作者单位：苏健华 辜梅新 黄梓伦 广东省人民医院血液室(510080)
参考文献
[1] 艾辉胜.现代白血病.北京：人民军医出版社，1997.6
[2] 石 慧，赵新民.儿童急性混合性白血病的临床与实验观察.中华血液学杂志，1996，17(1)：33
[3] 潘 涌，薜永权.染色体涂染技术在恶性血液病研究中的应用.中华医学遗传学杂志，1997，14(6)：203
广东医学
GUANGKONG MEDICAL JOURNAL
1999年 第4期 No.4 1999, http://www.100md.com
双表型急性白血病是急性混合性白血病(HAL)的其中一类，指的是病人骨髓的同一白血病细胞同时表达淋巴系和髓系特征[1]。我院1997年诊断成人和儿童急性白血病52例，全部进行MIC分型，其中15例为双表型急性白血病，占总数的28%。
1 资料与方法
1.1 研究对象 15例病例中，男性9例，女性6例，其中5例为儿童，年龄1.5～49岁
1.2 形态学及细胞组织化学检测 治疗前骨髓按1986年全国会议制定的白血病FAB分型标准。采用的组织化学染色主要有：碱性磷酸酶(ALP)，过氧化酶(POX)，醋酸AS-D奈酚脂酶(Naphthol AS-D Chioroacetate AS-DEC),A-丁酸奈酚脂酶(Naphthol Butyrate NBE)等(DCE与NBE为SIGMA产品)。
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1.3 免疫表型检测 应用流式细胞仪(BD公司U.S.A)，三种荧光抗体：FTTC(异硫氰酸荧光素)PE(澡红蛋白荧光素)和Precp荧光素。McAb表达T淋巴系：CD3 CD7，B淋巴系CD10 CD19 CD20及髓系CD13 CD14 CD15 CD33，干细胞系CD34 CD38。用上述不同荧光的McAb抗体同时标记待测样本，搭配的方式为：CD34/33/38 CD34/13/19 CD15/14 CD7/20/3。CD45辅助设门，设门在病变细胞群。结果由分析软件处理，点维图，多参数分析，淋巴系≥20%，粒系≥30%为阳性对照[2]。McAb试剂由美国BD公司提供。
1.4 细胞遗传学检测 染色体标本取材于骨髓。培养方法：用直接法和24 h法，收集有丝分裂期的细胞。用热变性方法显带。并根据国际人类细胞命名法(ISCN)进行核型分析。
2 结果
2.1 细胞形态学 15例双表型急性白血病骨髓及外周血涂片，根据FAB标准分型，分为急淋(ALL)7例，急非淋(ANLL)或不能分型的8例，组织细胞化学染色：ALP，POX，AS-D，AS-DCE，全部均阴性。
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2.2 免疫学分型 细胞免疫分型：T-Ly-G白血病2例，抗原表达为CD34+CD38+CD33+CD13+CD15-CD14-CD7+CD3+CD19-，B-Ly-G白血病13例，抗原表达为CD34+CD33+CD38+CD13+CD15-CD14-CD19+CD7-CD3-。
2.3 细胞遗传学 15例患者的染色体均有克隆性异常，数目的异常表现为染色体的数目增加或减少，结构的异常表现为染色体的平衡移位，臂间缺失。
3 讨论
形态学是诊断急、慢性白血病的基础，但对双表型急性白血病有困难。本文根据形态学诊断为ALL的7例患者，是根据细胞胞体的大小、核染色质的粗细、POX阴性而下的结论。另外8例患者由于细胞形态既不象淋巴细胞又不象粒细胞胞浆中无Auer小体，所有的组化都阴性，因此无法按FAB分型。
免疫学分型对形态学分型有困难的上述类型白血病起决定作用。我们利用流式细胞术，三种不同的荧光抗体一起标记测定其白血病细胞表面抗原，其细胞同时有两种抗原表达，在点维图的URL区CD19 PE CD13 Precp呈双阳性表达，证实为B-Ly-G双表型白血病，而不是单纯的ALL。另8例形态学无法分类的也通过免疫学分型为T-Ly-G和B-Ly-G白血病。因此，急性双表型白血病的诊断是由免疫学分型决定，特别是利用FCM，经荧光双染色容易确定HAL类型。
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细胞遗传学改变常呈非特异性[3]，或称多态性变异。本文中的15例急性双表型白血病患者的染色体改变呈非特异性，只能作为一个辅助的诊断。
作者单位：苏健华 辜梅新 黄梓伦 广东省人民医院血液室(510080)
参考文献
[1] 艾辉胜.现代白血病.北京：人民军医出版社，1997.6
[2] 石 慧，赵新民.儿童急性混合性白血病的临床与实验观察.中华血液学杂志，1996，17(1)：33
[3] 潘 涌，薜永权.染色体涂染技术在恶性血液病研究中的应用.中华医学遗传学杂志，1997，14(6)：203
广东医学
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1999年 第4期 No.4 1999, http://www.100md.com