孕妇宫颈巨细胞病毒感染与宫内感染的关系
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雷花香 黄定梅 王华 刘建建 彭向京
关键词 巨细胞病毒感染；妊娠；子宫；妊娠结局
人巨细胞病毒(HCMV)感染的母婴传播问题，越来越引起人们的重视。近年来不少优生工作者进行了广泛、深入的研究[1，2]。本文采用聚合酶链反应技术(PCR)检测孕妇宫颈分泌物，胎儿绒毛、羊水、出生婴儿脐血或尿液等组织中HCMV。探讨宫颈HCMV感染与宫内感染的相关性，为临床诊断宫内HCMV感染，寻找最佳途径。
1 材料与方法
1.1 标本来源 1996年6月至1998年9月从本院门诊和住院病人中抽取430例孕妇(其中早孕210例，中孕138例，晚孕82例)。采集每个孕妇的宫颈管分泌物和外周血，检测HCMV-DNA。凡宫颈分泌物或外周血HCMV-DNA阳性者，进一步采集胎儿的绒毛或羊水或新生儿的脐血或尿液，检测HCMV-DNA。另外同时采集60例非孕妇女的宫颈分泌物，检测HCMV-DNA作为孕妇宫颈感染情况的对照。
, 百拇医药
1.2 研究方法
1.2.1 标本处理与DNA提取 宫颈分泌物，尿液及羊水均经离心，弃上清液，加50 μl裂解液，置沸水中10 min，再离心取上清液作模板DNA。绒毛、胎盘组织制成组织匀浆，加50 μl裂解液，2 μl蛋白酶K(10 mg/ml)，45 ℃水浴1 h，沸水中10 min，离心取上清液作模板DNA。
1.2.2 检测方法 采用PCR技术检测标本中的HCMV-DNA。DNA扩增仪为美国PE公司480型。试剂由上海复华生物医学工程有限公司生产。按试剂盒说明配制反应体系。置93 ℃ 3 min后，按93 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 60 s循环35次。最后置72 ℃延伸5 min。取10 μl扩增产物在2%的琼脂糖凝胶(含0.5 μg/ml EB)上电泳30 min。紫外光下，455 bp出现荧光带者为阳性，无荧光带出现者为阴性。
2 结果
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430例孕妇宫颈分泌物中HCMV-DNA阳性者69例，其感染率为16.05%(见附表)。430例孕妇血HCMV-DNA阳性者31例，感染率为7.21%，其中12例合并有宫颈分泌物HCMV-DNA阳性。69例孕妇宫颈分泌物HCMV-DNA阳性者、宫内感染者19例(见附表)。19例HCMV宫内感染者的妊娠结局：人工流产3例；自然流产4例；死胎2例；引产3例；分娩畸形儿3例；足月分娩4例，外观未见异常，正在随访中。对69例宫颈HCMV阳性者的胎儿绒毛、羊水及新生儿脐血或尿液的HCMV-DNA检查，结果宫内感染率为27.5%。
附表 各孕期孕妇宫颈HCMV感染与其
宫内感染的关系(例，%)
孕期 n 宫颈感染 宫内感染
早孕 210 29(13.81) 11(37.93)
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中孕 138 28(20.28) 6(21.42)
晚孕 82 12(14.63) 2(16.67)
对照 60 2(3.33) -
3 讨论
本组430例孕妇宫颈分泌物HCMV-DNA阳性者69例，宫颈HCMV感染率为16.05%。国外资料为3%～28%[1]，国内管立学等报道为15.22%[2]，而非孕妇女宫颈HCMV感染率仅为3.3%，明显低于妊娠妇女组。这可能与妊娠后免疫力降低易受病毒侵害和因妊娠后内分泌的改变使体内病毒激活有关[3]。
本文孕妇血HCMV-DNA阳性率7.21%明显低于宫颈阳性率(16.05%)，其原因可能与性传播有关。有报道[2]认为性生活次数增加感染机会，所以检测孕妇和其丈夫的HCMV感染情况同等重要。由于性生活能增加感染机会，所以应加强孕早期保健，广泛宣传卫生知识，在妊娠早期应尽可能避免性生活。
, 百拇医药
本文早、中、晚期孕妇组宫颈HCMV阳性者的宫内感染率分别为37.93%，21.42%，16.67%。导致这一变化的原因可能与随着妊娠的进展，胎盘功能愈完善，胎儿免疫力增强清除，抗感染能力随之增强有关[4]。本组资料提示，宫颈HCMV感染是宫内感染的重要途径；虽不能完全反映宫内感染，但至少可作为筛查宫内感染的一种安全有效的方法。
大量的研究证实HCMV是引起宫内感染导致流产、死胎、出生缺陷和婴儿智力发育障碍的主要病原体。鉴于HCMV感染率高，危害严重，应加强对孕妇HCMV活动性感染的监测，做好HCMV感染孕妇的产前诊断。
作者单位：湖南省妇幼保健院(长沙 410008)
参考文献
1 吕强敏，刘兰青，吴佩英，等.先天性及围产期巨细胞病毒感染与母婴传播的探究.中华儿科杂志，1998，26(6)：333～335
, 百拇医药
2 管立学，马风珍，王悦成，等.沙眼衣原体和人巨细胞病毒感染与胎膜早破的关系.中华妇产科杂志，1992，34(4)：230
3 韩维田，曲 鸿，于 萍，等.早期妊娠胚胎先天性人巨细胞病毒感染及危险因素分析.中国优生与遗传杂志，1995，3(4)：27
4 Griffiths,PD,Congenital and maternal cytomegalovirus infections in a London population.Br J Obstet Gynaecol,1991,98.135～140
(19981111 收稿)
湖南医学
HUNAN MEDICAL JOURNAL
1999年 第16卷 第4期 Vol.16 No.4, http://www.100md.com
关键词 巨细胞病毒感染；妊娠；子宫；妊娠结局
人巨细胞病毒(HCMV)感染的母婴传播问题，越来越引起人们的重视。近年来不少优生工作者进行了广泛、深入的研究[1，2]。本文采用聚合酶链反应技术(PCR)检测孕妇宫颈分泌物，胎儿绒毛、羊水、出生婴儿脐血或尿液等组织中HCMV。探讨宫颈HCMV感染与宫内感染的相关性，为临床诊断宫内HCMV感染，寻找最佳途径。
1 材料与方法
1.1 标本来源 1996年6月至1998年9月从本院门诊和住院病人中抽取430例孕妇(其中早孕210例，中孕138例，晚孕82例)。采集每个孕妇的宫颈管分泌物和外周血，检测HCMV-DNA。凡宫颈分泌物或外周血HCMV-DNA阳性者，进一步采集胎儿的绒毛或羊水或新生儿的脐血或尿液，检测HCMV-DNA。另外同时采集60例非孕妇女的宫颈分泌物，检测HCMV-DNA作为孕妇宫颈感染情况的对照。
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1.2 研究方法
1.2.1 标本处理与DNA提取 宫颈分泌物，尿液及羊水均经离心，弃上清液，加50 μl裂解液，置沸水中10 min，再离心取上清液作模板DNA。绒毛、胎盘组织制成组织匀浆，加50 μl裂解液，2 μl蛋白酶K(10 mg/ml)，45 ℃水浴1 h，沸水中10 min，离心取上清液作模板DNA。
1.2.2 检测方法 采用PCR技术检测标本中的HCMV-DNA。DNA扩增仪为美国PE公司480型。试剂由上海复华生物医学工程有限公司生产。按试剂盒说明配制反应体系。置93 ℃ 3 min后，按93 ℃ 30 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 60 s循环35次。最后置72 ℃延伸5 min。取10 μl扩增产物在2%的琼脂糖凝胶(含0.5 μg/ml EB)上电泳30 min。紫外光下，455 bp出现荧光带者为阳性，无荧光带出现者为阴性。
2 结果
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430例孕妇宫颈分泌物中HCMV-DNA阳性者69例，其感染率为16.05%(见附表)。430例孕妇血HCMV-DNA阳性者31例，感染率为7.21%，其中12例合并有宫颈分泌物HCMV-DNA阳性。69例孕妇宫颈分泌物HCMV-DNA阳性者、宫内感染者19例(见附表)。19例HCMV宫内感染者的妊娠结局：人工流产3例；自然流产4例；死胎2例；引产3例；分娩畸形儿3例；足月分娩4例，外观未见异常，正在随访中。对69例宫颈HCMV阳性者的胎儿绒毛、羊水及新生儿脐血或尿液的HCMV-DNA检查，结果宫内感染率为27.5%。
附表 各孕期孕妇宫颈HCMV感染与其
宫内感染的关系(例，%)
孕期 n 宫颈感染 宫内感染
早孕 210 29(13.81) 11(37.93)
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中孕 138 28(20.28) 6(21.42)
晚孕 82 12(14.63) 2(16.67)
对照 60 2(3.33) -
3 讨论
本组430例孕妇宫颈分泌物HCMV-DNA阳性者69例，宫颈HCMV感染率为16.05%。国外资料为3%～28%[1]，国内管立学等报道为15.22%[2]，而非孕妇女宫颈HCMV感染率仅为3.3%，明显低于妊娠妇女组。这可能与妊娠后免疫力降低易受病毒侵害和因妊娠后内分泌的改变使体内病毒激活有关[3]。
本文孕妇血HCMV-DNA阳性率7.21%明显低于宫颈阳性率(16.05%)，其原因可能与性传播有关。有报道[2]认为性生活次数增加感染机会，所以检测孕妇和其丈夫的HCMV感染情况同等重要。由于性生活能增加感染机会，所以应加强孕早期保健，广泛宣传卫生知识，在妊娠早期应尽可能避免性生活。
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本文早、中、晚期孕妇组宫颈HCMV阳性者的宫内感染率分别为37.93%，21.42%，16.67%。导致这一变化的原因可能与随着妊娠的进展，胎盘功能愈完善，胎儿免疫力增强清除，抗感染能力随之增强有关[4]。本组资料提示，宫颈HCMV感染是宫内感染的重要途径；虽不能完全反映宫内感染，但至少可作为筛查宫内感染的一种安全有效的方法。
大量的研究证实HCMV是引起宫内感染导致流产、死胎、出生缺陷和婴儿智力发育障碍的主要病原体。鉴于HCMV感染率高，危害严重，应加强对孕妇HCMV活动性感染的监测，做好HCMV感染孕妇的产前诊断。
作者单位：湖南省妇幼保健院(长沙 410008)
参考文献
1 吕强敏，刘兰青，吴佩英，等.先天性及围产期巨细胞病毒感染与母婴传播的探究.中华儿科杂志，1998，26(6)：333～335
, 百拇医药
2 管立学，马风珍，王悦成，等.沙眼衣原体和人巨细胞病毒感染与胎膜早破的关系.中华妇产科杂志，1992，34(4)：230
3 韩维田，曲 鸿，于 萍，等.早期妊娠胚胎先天性人巨细胞病毒感染及危险因素分析.中国优生与遗传杂志，1995，3(4)：27
4 Griffiths,PD,Congenital and maternal cytomegalovirus infections in a London population.Br J Obstet Gynaecol,1991,98.135～140
(19981111 收稿)
湖南医学
HUNAN MEDICAL JOURNAL
1999年 第16卷 第4期 Vol.16 No.4, http://www.100md.com