复方烧伤喷雾剂的药效学研究
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中国现代应用药学
烧伤是战时及日常生活中都很常见的机体损伤，是因物理、化学、放射线等 诸多因素作用于机体而造成的一种极其复杂的外伤性疾患。烧伤治疗外治疗法颇多，外用药物治疗在烧伤治疗中占首要突出地位。传统制剂治疗烧烫伤，应用最多是酊剂 [1，2]，酒精作为溶媒有一定刺激性，特别是破损部位痛感明显。为提高治疗效果， 减轻烧伤患者痛苦，我们从大量治疗烧伤的中药中精选了6味，以乙酸乙酯作为主要溶媒， 研制新型复方烧伤喷雾剂，并做了皮肤急性毒性试验、皮肤刺激试验、皮肤过敏试验，结果 证明，复方烧伤喷雾剂外用时既无急性毒性反应，亦无皮肤刺激和皮肤过敏反应，是一安全 的外用药物(论文另发)；同时研究了药物的药效学，现报告如下。
1 复方烧伤喷雾剂的制备
将黄柏、虎杖、柿叶、地榆 、白芨等药材粉碎制成粗粉，加溶剂(乙醇、乙酸乙酯、水按一定比例混合)均匀湿润，密闭 放置4h，均匀装入渗漉筒，加溶剂浸渍48h，缓慢渗漉(0.2ml/min)，收取漉液1000ml，加入冰片 溶解，即得。
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2 体外抑菌实验
2.1 实验材料
2.1.1 药物 A：复方烧伤喷雾剂(自制，批号：980222)；B：烧伤酊(复方烧伤喷 雾剂原料药用75%乙醇提取)；C：阳性对照品(2%磺胺嘧啶银混悬液)；D：溶剂(乙醇、乙酸 乙酯、水按一定比例混合而成)。
2.1.2 动物 二级Hartley豚鼠[中 国药品生物制品检定所实验动物繁育场，京动管质字(1994)第073号]。
2.1.3 菌株 金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、大肠埃希氏菌、普通变 形杆菌(中国药品生物制品检定所)。
2.1.4 培养基 MH培养基(中国药 品生物制品检定所)。
2.1.5 3%凝固汽油 凝固汽油粉(防化指挥 学院)150g，加70号汽油5000ml，每天搅拌一次，待凝固汽油粉完全溶解后，1周之后方可使用 。
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2.2 实验方法
采用管碟法[3]。
2.2.1 双碟的制备 取直径约90mm、高16mm的平底双碟，注入加热 融化的MH培养基20ml，使在碟底内均匀推平，放置水平台上使凝固，作为底层。另取培养基5 ml加热融化后，放冷至50℃，加入稀释100倍的实验菌悬液0.1ml(使能得到清晰的抑菌圈)， 摇匀注入双碟，使在底层上均匀摊布，作为菌层。放置水平台上冷却后，在每一双碟中以等 距离均匀安置不锈钢小管(牛津杯)，用陶瓦圆盖覆盖备用。
2.2.2 抑菌实验 将实验药物分成药物原液、1/2浓度、1/10浓度、1/10 0浓度等4种浓度，每个钢管中滴入药物0.2ml，用陶瓦圆盖覆盖，在恒温箱内培养24h，将剩余 药液吸出，测量抑菌圈直径。
2.2.3 抑菌结果 实验结果表明，在本 实验条件下，溶剂没有抑菌作用，复方烧伤酊喷雾剂对4种细菌都有一定的抑菌作用，与烧 伤酊相比较，抑菌作用较强，说明溶剂对有效成分的提取比乙醇的效果好；烧伤喷雾剂与2% 磺胺嘧啶银混悬液相比，对绿脓假单胞菌、大肠埃希氏菌的抑菌作用略低，对普通变形杆菌 的抑菌作用相当，而对金黄色葡萄球菌的抑菌作用则略强(见表1，2)。
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表1 抑菌实验结果/抑菌圈直径：X±s mm， n=4
表2 抑菌实验结果/抑菌圈直径：X±s mm， n=4
注：*烧伤喷雾剂与2%磺胺嘧啶银混悬液比较，P<0.05，*’P< 0.01；^烧伤喷雾剂与烧伤酊比较，P<0.05，*’P<0.01；R：抑菌圈直径 <10mm，无抑菌作用
3 皮肤烧伤实验
3.1 凝固汽油烧伤豚鼠模型的复制 [4]
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成年健康豚鼠60只，雌雄各半，体重(400±20)g，实验前24h背部剪毛约25cm 2，用自制脱毛剂(硫化钡25.0g，淀粉35.0g，滑石粉35.0g，肥皂粉5.0g，用少量水配成糊 状即可)脱毛。用中间开洞2.5cm×3.5cm(8.75cm2)的湿纱布覆盖在脱毛处，将3%凝固 汽油迅速均匀涂抹在脱毛的皮肤上，立即点火燃烧10s达浅Ⅱ度烧伤，燃烧16s达深Ⅱ度烧伤 。
3.2 对豚鼠烧伤愈合的影响
将豚鼠随机均分为6组，每组10只，分 别为烧伤浅Ⅱ度创面复方烧伤喷雾剂治疗组、烧伤酊组、2%SD-Ag治疗组、空白对照(溶剂) 组和烧伤深Ⅱ度创面复方烧伤喷雾剂治疗组、烧伤酊组、2%SD-Ag治疗组、空白对照(溶剂 组)。烧伤30min开始给药，2%SD-Ag每日给药2次，复方烧伤喷雾剂和溶剂组每日喷药4次( 按各自给药方法给药)，至创面愈合止。为促使成膜，复方烧伤喷雾剂和溶剂最初5次给药的 间隔时间为5min。观察各组动物的结痂面积(cm2)、脱痂时间(d)及愈合天数。
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3.3 结果
实验结果见表3，表明复方烧伤喷雾剂可明显促进烧伤创面的 愈合，与2%SD-Ag效果相似
表3 复方烧伤喷雾剂烧伤创面愈合的影响/n=10
注：与溶剂比较，*P<0.05，*’P<0.01
4 抗感染实验[5]
绿脓假单胞菌经 16～24h的培养，用生理盐水制成4×108的细菌悬液，取1ml涂布于Ⅲ度豚鼠烧伤创面模型 (燃烧19s)上，按以上给药方法给药。实验结果，每组10只Ⅲ度豚鼠烧伤创面模型中，2%SD- Ag、烧伤酊、复方烧伤喷雾剂对豚鼠Ⅲ度烧伤的抗感染作用非常显著，三者之间则 无显著差别，见表4。
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表4 复方烧伤喷雾剂对豚鼠Ⅲ度 烧伤的抗感染效果/n=10
注：与溶剂比较，P<0.01，差别极其显著；P <0.05，差别显著
5 讨 论
中药外治烧伤有悠久的历史。制痂治疗是中 医治疗烧伤的有效方法之一，早在唐朝王焘所著《外台秘要》中即有这方面的记载 [6]，与西医的暴露疗法基本相似，系指用外用制剂涂抹或喷洒创面，使其形成药物痂 膜，其中关键问题是保持创面干燥以形成保护性药痂和改善局部血液循环[7～11] 。本制剂中白芨含有大量白芨胶，可形成药膜、阻止烧伤创面渗液、干燥创面及促进组织修 复[12]。
乙酸乙酯是无色透明液体，具有良好的挥发性，有水果香味，沸点77.1 5℃，多用作溶剂和香料，医药上用作驱风药和镇痛药[13]；也是中药中主要有效 成分生物碱类、甙类和鞣质等的良好溶媒。而且乙酸乙酯有麻醉作用，只有在大剂量接触才 有毒副作用(人吸入400ppm)[14]。我们将乙酸乙酯、乙醇和水按一定比例配成稳定 的溶媒，使制成的喷雾剂最大限度的溶解有效治疗成分，其体外抑菌效果明显优于乙醇提取 物，且挥发快(喷雾后1～3min溶剂即挥发完全)，易于干燥成膜制痂。因此，乙酸乙酯可作 为外用药物溶剂。
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参考文献
[1]刘祚永，陈世平，刘学俊，等.复方烧伤酊治疗 烧伤的临床及实验研究.中药药理与临床，1994，(3)∶4647.
[2]梁勇才.中国烧伤大全.北京：学苑出版社，199 3∶253.
[3]中国药典.1995∶73.
[4]黎鳌，杨宗城，萧光夏，等.实验烧伤外科学 .重庆大学出版社，1997∶9.
[5]陈晓武，马恩庆.温润烧伤膏、磺胺嘧啶银霜及 热烘暴露疗法对烧伤创面绿脓杆菌感染的控制效果比较.中国烧伤溃疡杂志，1990，3∶39.
[6]王焘.外台秘要.北京：人民卫生出版 社，1955∶792.
, 百拇医药 [7]戴文祥.烧伤创面的 制痂与干热风疗法.中级医刊，1983，(7)∶25.
[8]韩之勋，陈国钧，李守田，等.中药制痂治疗烧 伤创面的探讨.中医杂志，1984，(5)∶49.
[9]Thomsen M，Alsbjorn BF.Development of the partial skin thickness burns since the second world war:an overview.Burns，1992，( 18)∶511.
[10]丁岳梁，韩春茂.我国烧伤创面处 理进展概况.中华整形烧伤外科杂志，1989，5(1)∶56.
[11]Lawrence JC.Burn bacteriology during the last 50 years.Burns，1992，(18)∶523.
[12]郑玉艽.白芨胶的制备及临床应用研究.福建中医药，19 92，23(3)∶50.
[13]张光杰主编.药用辅料应用技 术.北京：中国医药科技出版社，1991∶723.
[14]董华模主编.化学物的毒性及其环境保护参数手册.北京 ：人民卫生出版社，1988∶538., 百拇医药
1 复方烧伤喷雾剂的制备
将黄柏、虎杖、柿叶、地榆 、白芨等药材粉碎制成粗粉，加溶剂(乙醇、乙酸乙酯、水按一定比例混合)均匀湿润，密闭 放置4h，均匀装入渗漉筒，加溶剂浸渍48h，缓慢渗漉(0.2ml/min)，收取漉液1000ml，加入冰片 溶解，即得。
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2 体外抑菌实验
2.1 实验材料
2.1.1 药物 A：复方烧伤喷雾剂(自制，批号：980222)；B：烧伤酊(复方烧伤喷 雾剂原料药用75%乙醇提取)；C：阳性对照品(2%磺胺嘧啶银混悬液)；D：溶剂(乙醇、乙酸 乙酯、水按一定比例混合而成)。
2.1.2 动物 二级Hartley豚鼠[中 国药品生物制品检定所实验动物繁育场，京动管质字(1994)第073号]。
2.1.3 菌株 金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、大肠埃希氏菌、普通变 形杆菌(中国药品生物制品检定所)。
2.1.4 培养基 MH培养基(中国药 品生物制品检定所)。
2.1.5 3%凝固汽油 凝固汽油粉(防化指挥 学院)150g，加70号汽油5000ml，每天搅拌一次，待凝固汽油粉完全溶解后，1周之后方可使用 。
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2.2 实验方法
采用管碟法[3]。
2.2.1 双碟的制备 取直径约90mm、高16mm的平底双碟，注入加热 融化的MH培养基20ml，使在碟底内均匀推平，放置水平台上使凝固，作为底层。另取培养基5 ml加热融化后，放冷至50℃，加入稀释100倍的实验菌悬液0.1ml(使能得到清晰的抑菌圈)， 摇匀注入双碟，使在底层上均匀摊布，作为菌层。放置水平台上冷却后，在每一双碟中以等 距离均匀安置不锈钢小管(牛津杯)，用陶瓦圆盖覆盖备用。
2.2.2 抑菌实验 将实验药物分成药物原液、1/2浓度、1/10浓度、1/10 0浓度等4种浓度，每个钢管中滴入药物0.2ml，用陶瓦圆盖覆盖，在恒温箱内培养24h，将剩余 药液吸出，测量抑菌圈直径。
2.2.3 抑菌结果 实验结果表明，在本 实验条件下，溶剂没有抑菌作用，复方烧伤酊喷雾剂对4种细菌都有一定的抑菌作用，与烧 伤酊相比较，抑菌作用较强，说明溶剂对有效成分的提取比乙醇的效果好；烧伤喷雾剂与2% 磺胺嘧啶银混悬液相比，对绿脓假单胞菌、大肠埃希氏菌的抑菌作用略低，对普通变形杆菌 的抑菌作用相当，而对金黄色葡萄球菌的抑菌作用则略强(见表1，2)。
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表1 抑菌实验结果/抑菌圈直径：X±s mm， n=4
表2 抑菌实验结果/抑菌圈直径：X±s mm， n=4
注：*烧伤喷雾剂与2%磺胺嘧啶银混悬液比较，P<0.05，*’P< 0.01；^烧伤喷雾剂与烧伤酊比较，P<0.05，*’P<0.01；R：抑菌圈直径 <10mm，无抑菌作用
3 皮肤烧伤实验
3.1 凝固汽油烧伤豚鼠模型的复制 [4]
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成年健康豚鼠60只，雌雄各半，体重(400±20)g，实验前24h背部剪毛约25cm 2，用自制脱毛剂(硫化钡25.0g，淀粉35.0g，滑石粉35.0g，肥皂粉5.0g，用少量水配成糊 状即可)脱毛。用中间开洞2.5cm×3.5cm(8.75cm2)的湿纱布覆盖在脱毛处，将3%凝固 汽油迅速均匀涂抹在脱毛的皮肤上，立即点火燃烧10s达浅Ⅱ度烧伤，燃烧16s达深Ⅱ度烧伤 。
3.2 对豚鼠烧伤愈合的影响
将豚鼠随机均分为6组，每组10只，分 别为烧伤浅Ⅱ度创面复方烧伤喷雾剂治疗组、烧伤酊组、2%SD-Ag治疗组、空白对照(溶剂) 组和烧伤深Ⅱ度创面复方烧伤喷雾剂治疗组、烧伤酊组、2%SD-Ag治疗组、空白对照(溶剂 组)。烧伤30min开始给药，2%SD-Ag每日给药2次，复方烧伤喷雾剂和溶剂组每日喷药4次( 按各自给药方法给药)，至创面愈合止。为促使成膜，复方烧伤喷雾剂和溶剂最初5次给药的 间隔时间为5min。观察各组动物的结痂面积(cm2)、脱痂时间(d)及愈合天数。
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3.3 结果
实验结果见表3，表明复方烧伤喷雾剂可明显促进烧伤创面的 愈合，与2%SD-Ag效果相似
表3 复方烧伤喷雾剂烧伤创面愈合的影响/n=10
注：与溶剂比较，*P<0.05，*’P<0.01
4 抗感染实验[5]
绿脓假单胞菌经 16～24h的培养，用生理盐水制成4×108的细菌悬液，取1ml涂布于Ⅲ度豚鼠烧伤创面模型 (燃烧19s)上，按以上给药方法给药。实验结果，每组10只Ⅲ度豚鼠烧伤创面模型中，2%SD- Ag、烧伤酊、复方烧伤喷雾剂对豚鼠Ⅲ度烧伤的抗感染作用非常显著，三者之间则 无显著差别，见表4。
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表4 复方烧伤喷雾剂对豚鼠Ⅲ度 烧伤的抗感染效果/n=10
注：与溶剂比较，P<0.01，差别极其显著；P <0.05，差别显著
5 讨 论
中药外治烧伤有悠久的历史。制痂治疗是中 医治疗烧伤的有效方法之一，早在唐朝王焘所著《外台秘要》中即有这方面的记载 [6]，与西医的暴露疗法基本相似，系指用外用制剂涂抹或喷洒创面，使其形成药物痂 膜，其中关键问题是保持创面干燥以形成保护性药痂和改善局部血液循环[7～11] 。本制剂中白芨含有大量白芨胶，可形成药膜、阻止烧伤创面渗液、干燥创面及促进组织修 复[12]。
乙酸乙酯是无色透明液体，具有良好的挥发性，有水果香味，沸点77.1 5℃，多用作溶剂和香料，医药上用作驱风药和镇痛药[13]；也是中药中主要有效 成分生物碱类、甙类和鞣质等的良好溶媒。而且乙酸乙酯有麻醉作用，只有在大剂量接触才 有毒副作用(人吸入400ppm)[14]。我们将乙酸乙酯、乙醇和水按一定比例配成稳定 的溶媒，使制成的喷雾剂最大限度的溶解有效治疗成分，其体外抑菌效果明显优于乙醇提取 物，且挥发快(喷雾后1～3min溶剂即挥发完全)，易于干燥成膜制痂。因此，乙酸乙酯可作 为外用药物溶剂。
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参考文献
[1]刘祚永，陈世平，刘学俊，等.复方烧伤酊治疗 烧伤的临床及实验研究.中药药理与临床，1994，(3)∶4647.
[2]梁勇才.中国烧伤大全.北京：学苑出版社，199 3∶253.
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[4]黎鳌，杨宗城，萧光夏，等.实验烧伤外科学 .重庆大学出版社，1997∶9.
[5]陈晓武，马恩庆.温润烧伤膏、磺胺嘧啶银霜及 热烘暴露疗法对烧伤创面绿脓杆菌感染的控制效果比较.中国烧伤溃疡杂志，1990，3∶39.
[6]王焘.外台秘要.北京：人民卫生出版 社，1955∶792.
, 百拇医药 [7]戴文祥.烧伤创面的 制痂与干热风疗法.中级医刊，1983，(7)∶25.
[8]韩之勋，陈国钧，李守田，等.中药制痂治疗烧 伤创面的探讨.中医杂志，1984，(5)∶49.
[9]Thomsen M，Alsbjorn BF.Development of the partial skin thickness burns since the second world war:an overview.Burns，1992，( 18)∶511.
[10]丁岳梁，韩春茂.我国烧伤创面处 理进展概况.中华整形烧伤外科杂志，1989，5(1)∶56.
[11]Lawrence JC.Burn bacteriology during the last 50 years.Burns，1992，(18)∶523.
[12]郑玉艽.白芨胶的制备及临床应用研究.福建中医药，19 92，23(3)∶50.
[13]张光杰主编.药用辅料应用技 术.北京：中国医药科技出版社，1991∶723.
[14]董华模主编.化学物的毒性及其环境保护参数手册.北京 ：人民卫生出版社，1988∶538., 百拇医药