安神颗粒的主要药效学试验
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华西药学杂志
安神颗粒由黄芪、茯苓、人参、枸杞子、酸枣仁、牛膝等中药组成，具有宁心安神、补肾益智之功效。实验观察其对动物中枢神经系统、学习记忆功能及抗疲劳作用的影响，为临床试验提供治疗学基础。
1 实验部分
1.1 材料、动物与仪器
安神颗粒(ASP，自制，批号9705020)试验时用蒸馏水稀释成每ml含生药2 g；补肾益脑胶囊(BSC，0.27 g/粒，广西桂北制药厂，批号960815)。戊巴比妥钠(进口分装，佛山市化工实验厂)；氢溴酸东莨菪碱注射液(广州侨光制药厂，批号941019-6)；亚硝酸钠(北京化工厂，批号930519)；无水乙醇(蚌埠化学试剂厂，批号940511)。昆明种小鼠、Wistar大鼠(安徽省医学研究所，合格证分别为皖医实动准第01号和第03号)。实验室温度16～28℃。YSD-5型药理生理多用仪(蚌埠无线电二厂)；BHF Ⅰ型回避性条件反射仪测试箱(中国医学科学院药物研究所)。
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1.2 方法与结果
1.2.1 对小鼠自发活动[1]、走动时间和举双前肢的影响[2] 小鼠50只，体重18～22 g，♀各半，均分为5组。按表1剂量ig给药，对照组给予等容量生理盐水，连续7 d，末次用药35 min后，放入YSD-5型药理生理多用仪活动记录盒中，稳定10 min，记录给药45～60 min后15 min内动物的活动次数。结果安神颗粒与补肾益脑胶囊均能使小鼠的自发活动减少(表1)。
表1 安神颗粒对小鼠自发活动的影响(±s，n=10)
Compared with normal saline (NS),*P<0.05，**P<0.01
, http://www.100md.com 小鼠50只，体重18～22 g，♀兼用，均分为5组，给药前把小鼠放入有机塑料箱(30 cm×20 cm×15 cm)内，适应5 min后，记录2 min内走动时间(s)及双前肢向上抬举的次数作为正常值，再按表2剂量ig给药，连续7 d，末次给药55 min后，同法测定小鼠的活动数值。结果安神颗粒的高、中剂量组均可明显抑制小鼠的走动时间及举前肢数，表现出明显的镇静作用(表2)。
表2 安神颗粒对小鼠走动和举前肢的影响(±s,n=10)
Table 2 Effect of ASP on mice action and raising forefeet in 2 minute
BM=before medicine,AM=after medicine;compared with NS, *P<0.05，**P<0.01
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1.2.2 对戊巴比妥钠催眠作用及其阈下催眠量的影响 小鼠60只，体重18～22 g，♀各半，随机分为5组。按表3剂量ig给药，连续7 d，末次给药后1 h，各鼠ip戊巴比妥钠40 mg/kg，记录各鼠翻正反射消失时间(入睡潜伏期)及维持时间。结果显示安神颗粒能明显缩短小鼠入睡潜伏期及延长翻正反射消失的持续时间(表3)。
表3 安神颗粒对戊巴比妥钠催眠作用的影响(±s，n=12)
Table 3 Effect of ASP on the hypnotic action induced by sodium pentobarbital
*
DT＝dispearing time of right reflex;LT=lasting time of right reflex dispearing;compared with NS,*P<0.05
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小鼠50只，体重20～24 g，♀各半，给药剂量同上，末次给药后1 h，各鼠ip阈下剂量的戊巴比妥钠30 mg/kg，记录小鼠翻正反射消失的鼠数(以ip 15 min内小鼠翻正反射消失达1 min以上的鼠数作为入睡指标)。结果安神颗粒能明显增加戊巴比妥钠阈下剂量的小鼠入睡数，表现出协同戊巴比妥钠的催眠作用(表4)。
表4 安神颗粒对戊巴比妥钠阈下催眠量的影响(n=10)
Compared with NS,*P<0.05，**P<0.01
1.2.3 对小鼠学习记忆的影响 小鼠体重18～22 g，♀各半，正常对照组和病模对照组均用生理盐水，病模给药组ig安神颗粒(生药)9、4.5 g/(kg.d)或补肾益脑胶囊(生药)1.3 g/(kg.d)，连续7 d。末次给药后1 h进行训练，将小鼠放入回避性条件反射仪测试箱明室内，使其一旦进入暗室即遭电击(电压50 V)，逃回明室并获得记忆。于训练后2 h进行测验，记录小鼠自明室到钻洞进入暗室的潜伏期(s)作为学习成绩；5 min未钻洞者，潜伏期以300 s计算。记录动物5 min内进入暗室遭电击次数(错误次数)作为记忆成绩。结果表明，安神颗粒可对抗小鼠于训练前20 min ip东莨菪碱2 mg/kg引起的记忆获得障碍(表5)；对抗小鼠于训练后立即sc NaNO2 120 mg/kg所致的记忆巩固障碍见表6；对抗小鼠于测试前20 min ig 30%乙醇(10 ml/kg)所致的记忆再现障碍见表7。
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表5 安神颗粒对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍的影响
Compared with normal, *P<0.01； compared with Pathological pattern(PP),**P<0.05，***P<0.01
1.2.4 对小鼠游泳时间的影响 小鼠48只，体重10～20 g，♀各半，均分为3组。ig安神颗粒(生药)9、3.5 g/(kg.d)，连续7 d。末次给药1 h后，每鼠尾根处负重5%体重，放入盛水的玻璃缸内，水深30 cm，水温(25±1)℃，观察并记录小鼠从入水至溺死的时间。结果小鼠游泳时间明显延长，与生理盐水组比较有显著差异(P<0.05)，提示其具有抗疲劳能力。
表6 安神颗粒对NaNO2致小鼠记忆巩固障碍的影响
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Compared with normal,*P<0.01;compared with PP,**P<0.05,***P<0.01
表7 安神颗粒对乙醇致小鼠记忆再现障碍的影响
Compared with normal,*P<0.01;compared with PP,**P<0.05
1.2.5 对大鼠协调运动能力及耐力的影响 大鼠♀兼用，体重130～150 g，以转棒法观察[3]。选用在棒上停留3 min以上的动物50只，均分为5组。分别ig安神颗粒(生药)7、3.5、1.8 g/(kg.d)，连续7 d。末次给药1 h后，测定5 min内各组大鼠从棒上跌落的百分率。其高、中剂量组大鼠跌落率分别为30%和20%，与ig等量生理盐水大鼠跌落率60%比较有显著差异(P<0.05)，提示安神颗粒可提高大鼠的协调运动能力和耐力。
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2 讨论
由表1至表4可知，安神颗粒对中枢神经系统有明显的镇静和催眠作用；由表5至表7可见，安神颗粒具有一定的益智作用；安神颗粒有增强大鼠的精细协调运动功能，使大鼠转棒跌落率降低及小鼠游泳时间延长，表现出抗疲劳作用。
参考文献
1 王钦茂，龙子江，盛炎炎等.脱咖啡因茶及茶的中枢兴奋作用.安徽中医学院学报，1990，9(2)∶55
2 洪庚辛，覃文才，曹斌等.枣仁合剂的中枢抑制作用.中药通报，1988，13(9)∶42
3 陈奇主编.中药药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1993.669, 百拇医药
1 实验部分
1.1 材料、动物与仪器
安神颗粒(ASP，自制，批号9705020)试验时用蒸馏水稀释成每ml含生药2 g；补肾益脑胶囊(BSC，0.27 g/粒，广西桂北制药厂，批号960815)。戊巴比妥钠(进口分装，佛山市化工实验厂)；氢溴酸东莨菪碱注射液(广州侨光制药厂，批号941019-6)；亚硝酸钠(北京化工厂，批号930519)；无水乙醇(蚌埠化学试剂厂，批号940511)。昆明种小鼠、Wistar大鼠(安徽省医学研究所，合格证分别为皖医实动准第01号和第03号)。实验室温度16～28℃。YSD-5型药理生理多用仪(蚌埠无线电二厂)；BHF Ⅰ型回避性条件反射仪测试箱(中国医学科学院药物研究所)。
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1.2 方法与结果
1.2.1 对小鼠自发活动[1]、走动时间和举双前肢的影响[2] 小鼠50只，体重18～22 g，♀各半，均分为5组。按表1剂量ig给药，对照组给予等容量生理盐水，连续7 d，末次用药35 min后，放入YSD-5型药理生理多用仪活动记录盒中，稳定10 min，记录给药45～60 min后15 min内动物的活动次数。结果安神颗粒与补肾益脑胶囊均能使小鼠的自发活动减少(表1)。
表1 安神颗粒对小鼠自发活动的影响(±s，n=10)
Compared with normal saline (NS),*P<0.05，**P<0.01
, http://www.100md.com 小鼠50只，体重18～22 g，♀兼用，均分为5组，给药前把小鼠放入有机塑料箱(30 cm×20 cm×15 cm)内，适应5 min后，记录2 min内走动时间(s)及双前肢向上抬举的次数作为正常值，再按表2剂量ig给药，连续7 d，末次给药55 min后，同法测定小鼠的活动数值。结果安神颗粒的高、中剂量组均可明显抑制小鼠的走动时间及举前肢数，表现出明显的镇静作用(表2)。
表2 安神颗粒对小鼠走动和举前肢的影响(±s,n=10)
Table 2 Effect of ASP on mice action and raising forefeet in 2 minute
BM=before medicine,AM=after medicine;compared with NS, *P<0.05，**P<0.01
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1.2.2 对戊巴比妥钠催眠作用及其阈下催眠量的影响 小鼠60只，体重18～22 g，♀各半，随机分为5组。按表3剂量ig给药，连续7 d，末次给药后1 h，各鼠ip戊巴比妥钠40 mg/kg，记录各鼠翻正反射消失时间(入睡潜伏期)及维持时间。结果显示安神颗粒能明显缩短小鼠入睡潜伏期及延长翻正反射消失的持续时间(表3)。
表3 安神颗粒对戊巴比妥钠催眠作用的影响(±s，n=12)
Table 3 Effect of ASP on the hypnotic action induced by sodium pentobarbital
*
DT＝dispearing time of right reflex;LT=lasting time of right reflex dispearing;compared with NS,*P<0.05
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小鼠50只，体重20～24 g，♀各半，给药剂量同上，末次给药后1 h，各鼠ip阈下剂量的戊巴比妥钠30 mg/kg，记录小鼠翻正反射消失的鼠数(以ip 15 min内小鼠翻正反射消失达1 min以上的鼠数作为入睡指标)。结果安神颗粒能明显增加戊巴比妥钠阈下剂量的小鼠入睡数，表现出协同戊巴比妥钠的催眠作用(表4)。
表4 安神颗粒对戊巴比妥钠阈下催眠量的影响(n=10)
Compared with NS,*P<0.05，**P<0.01
1.2.3 对小鼠学习记忆的影响 小鼠体重18～22 g，♀各半，正常对照组和病模对照组均用生理盐水，病模给药组ig安神颗粒(生药)9、4.5 g/(kg.d)或补肾益脑胶囊(生药)1.3 g/(kg.d)，连续7 d。末次给药后1 h进行训练，将小鼠放入回避性条件反射仪测试箱明室内，使其一旦进入暗室即遭电击(电压50 V)，逃回明室并获得记忆。于训练后2 h进行测验，记录小鼠自明室到钻洞进入暗室的潜伏期(s)作为学习成绩；5 min未钻洞者，潜伏期以300 s计算。记录动物5 min内进入暗室遭电击次数(错误次数)作为记忆成绩。结果表明，安神颗粒可对抗小鼠于训练前20 min ip东莨菪碱2 mg/kg引起的记忆获得障碍(表5)；对抗小鼠于训练后立即sc NaNO2 120 mg/kg所致的记忆巩固障碍见表6；对抗小鼠于测试前20 min ig 30%乙醇(10 ml/kg)所致的记忆再现障碍见表7。
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表5 安神颗粒对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍的影响
Compared with normal, *P<0.01； compared with Pathological pattern(PP),**P<0.05，***P<0.01
1.2.4 对小鼠游泳时间的影响 小鼠48只，体重10～20 g，♀各半，均分为3组。ig安神颗粒(生药)9、3.5 g/(kg.d)，连续7 d。末次给药1 h后，每鼠尾根处负重5%体重，放入盛水的玻璃缸内，水深30 cm，水温(25±1)℃，观察并记录小鼠从入水至溺死的时间。结果小鼠游泳时间明显延长，与生理盐水组比较有显著差异(P<0.05)，提示其具有抗疲劳能力。
表6 安神颗粒对NaNO2致小鼠记忆巩固障碍的影响
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Compared with normal,*P<0.01;compared with PP,**P<0.05,***P<0.01
表7 安神颗粒对乙醇致小鼠记忆再现障碍的影响
Compared with normal,*P<0.01;compared with PP,**P<0.05
1.2.5 对大鼠协调运动能力及耐力的影响 大鼠♀兼用，体重130～150 g，以转棒法观察[3]。选用在棒上停留3 min以上的动物50只，均分为5组。分别ig安神颗粒(生药)7、3.5、1.8 g/(kg.d)，连续7 d。末次给药1 h后，测定5 min内各组大鼠从棒上跌落的百分率。其高、中剂量组大鼠跌落率分别为30%和20%，与ig等量生理盐水大鼠跌落率60%比较有显著差异(P<0.05)，提示安神颗粒可提高大鼠的协调运动能力和耐力。
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2 讨论
由表1至表4可知，安神颗粒对中枢神经系统有明显的镇静和催眠作用；由表5至表7可见，安神颗粒具有一定的益智作用；安神颗粒有增强大鼠的精细协调运动功能，使大鼠转棒跌落率降低及小鼠游泳时间延长，表现出抗疲劳作用。
参考文献
1 王钦茂，龙子江，盛炎炎等.脱咖啡因茶及茶的中枢兴奋作用.安徽中医学院学报，1990，9(2)∶55
2 洪庚辛，覃文才，曹斌等.枣仁合剂的中枢抑制作用.中药通报，1988，13(9)∶42
3 陈奇主编.中药药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1993.669, 百拇医药