类风湿性关节炎从络辨治及寒热方剂作用机理研究
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病证结合、辨证论治是中医药防治疑难疾病的核心内容，辨证论治指导下的方剂作用研究是中医现代化的关键问题之一。类风湿性关节炎(RA)是一类发病率、致残率均高的现代难治病种，寒、热辨证治疗早中期RA具有一定的优势和特色。然而，目前尚缺乏符合RA病种特征的中医理论认识体系，对RA辨证论治的机理由于受到单侧面、单生物学因素研究框架的局限而难以深入。因此亟需引入新的思路与方法，进行系统地反映RA辨证论治和复合干预策略的研究。
1.目的
以类风湿性关节炎(RA)及其寒、热方剂为对象，从络病理论的角度对RA的中医药诊疗规律进行提炼；以RA理想的胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠为模型，从复杂适应系统、生物节律“预言性稳态”等角度，围绕CIA滑膜局部病灶与下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴-免疫系统的整体、动态变化，研究RA寒、热方剂的作用机理。
工作假说：疾病、证候、方剂为复杂系统。辨证论治的不同方剂(寒、热方剂)可使机体(RA、CIA)的状态发生不同的改变，和/或其变化可体现不同的时相特征。通过典型化设计、多环节、多层次动态观察与分析，将有助于探寻寒、热方剂辨证治疗RA的机理。
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2 .方法
2.1理论方法：采用文献学、流行病学调查(纵向研究和横断面调查)、逻辑分析等方法，对RA从“络”辨治的规律，RA方证偏性关联，以及本研究的前期临床基础——痛痹、热痹疼痛的起病/发作年节律调查结果进行分析，对RA方证复杂系统的研究切入点进行探讨。
2.2实验方法： 以国际公认的RA动物模型——II型胶原诱导的关节炎(CIA)雄性Wistar大鼠为对象，在疾病模型证候学评价、时间生物学驯化的基础上，以寒、热方剂“清络饮”、“温络饮”分别干预，雷公藤多甙片为治疗对照，分别进行以下观察与检测：
(1)CII免疫1，7，21，33天时的疼痛试验(21℃、5-8℃、42-45℃)，关节肿胀程度，肛温，膝、踝关节肤温，体重等体征评价。
(2)CII免疫8,33天双侧膝踝关节、肾上腺病理形态学观察；CII免疫33天滑膜细胞透射电镜观察、滑膜MMP3mRNA原位杂交、TIMP-1免疫组化等检测，以及各项图象分析。
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(3)CII免疫33天放射性免疫法测定6:00，12:00，18:00，0:00时血中ACTH、皮质醇、TNF-a、IL-6、IL-1β水平。
(4)分析方法：采用余弦法对各因子的昼夜水平进行周期、振幅、相位等节律分析；对束状带厚度、ACTH水平进行线性相关分析；其它检测与分析数据进行t检验等统计学检验。
3.结果
3.1理论研究结果
根据导师王永炎院士的学术思想，认为RA是“新病入络”的代表病证，病变核心在于“病络”。进而首次提出并阐释RA从“络”辨治的初步理论构架：“外邪入络，邪伏肢节脉络”的发病学特点、“毒损肢节脉络，络道亢变，络脉虚滞”的病因病机特点、“分证论治(譬如散寒、清热)，截毒防变(强调早期治疗)，通畅络脉(强调矫正病理)”的治则治法特点。
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3.2实验研究结果
3.2.1 CIA的体征与证候学观察
慢性痛(P0.05)，肛温(P>0.05)、体重(P>0.3)无异常，故单纯CIA的寒热偏向不明显。同时，相关研究综合表明CIA具有随之复加因素的变化而体现出不同证候倾向，发生相应的免疫、神经、内分泌等改变的潜质，提示CIA对寒、热方药的干预可出现不同的反应。
3.2.2 RA、CIA从“络”辨治的部分病理生理基础
“病络”是RA、CIA病变的主要渠道和枢纽。研究发现，导致“病络”形成的“毒邪”为综合的病因病理，在本研究中表现为：
(1)部分细胞因子分泌量的变化、分泌节律的紊乱：CIA大鼠0:00时血清TNF-α(P, 百拇医药
1.目的
以类风湿性关节炎(RA)及其寒、热方剂为对象，从络病理论的角度对RA的中医药诊疗规律进行提炼；以RA理想的胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠为模型，从复杂适应系统、生物节律“预言性稳态”等角度，围绕CIA滑膜局部病灶与下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴-免疫系统的整体、动态变化，研究RA寒、热方剂的作用机理。
工作假说：疾病、证候、方剂为复杂系统。辨证论治的不同方剂(寒、热方剂)可使机体(RA、CIA)的状态发生不同的改变，和/或其变化可体现不同的时相特征。通过典型化设计、多环节、多层次动态观察与分析，将有助于探寻寒、热方剂辨证治疗RA的机理。
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2 .方法
2.1理论方法：采用文献学、流行病学调查(纵向研究和横断面调查)、逻辑分析等方法，对RA从“络”辨治的规律，RA方证偏性关联，以及本研究的前期临床基础——痛痹、热痹疼痛的起病/发作年节律调查结果进行分析，对RA方证复杂系统的研究切入点进行探讨。
2.2实验方法： 以国际公认的RA动物模型——II型胶原诱导的关节炎(CIA)雄性Wistar大鼠为对象，在疾病模型证候学评价、时间生物学驯化的基础上，以寒、热方剂“清络饮”、“温络饮”分别干预，雷公藤多甙片为治疗对照，分别进行以下观察与检测：
(1)CII免疫1，7，21，33天时的疼痛试验(21℃、5-8℃、42-45℃)，关节肿胀程度，肛温，膝、踝关节肤温，体重等体征评价。
(2)CII免疫8,33天双侧膝踝关节、肾上腺病理形态学观察；CII免疫33天滑膜细胞透射电镜观察、滑膜MMP3mRNA原位杂交、TIMP-1免疫组化等检测，以及各项图象分析。
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(3)CII免疫33天放射性免疫法测定6:00，12:00，18:00，0:00时血中ACTH、皮质醇、TNF-a、IL-6、IL-1β水平。
(4)分析方法：采用余弦法对各因子的昼夜水平进行周期、振幅、相位等节律分析；对束状带厚度、ACTH水平进行线性相关分析；其它检测与分析数据进行t检验等统计学检验。
3.结果
3.1理论研究结果
根据导师王永炎院士的学术思想，认为RA是“新病入络”的代表病证，病变核心在于“病络”。进而首次提出并阐释RA从“络”辨治的初步理论构架：“外邪入络，邪伏肢节脉络”的发病学特点、“毒损肢节脉络，络道亢变，络脉虚滞”的病因病机特点、“分证论治(譬如散寒、清热)，截毒防变(强调早期治疗)，通畅络脉(强调矫正病理)”的治则治法特点。
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3.2实验研究结果
3.2.1 CIA的体征与证候学观察
慢性痛(P0.05)，肛温(P>0.05)、体重(P>0.3)无异常，故单纯CIA的寒热偏向不明显。同时，相关研究综合表明CIA具有随之复加因素的变化而体现出不同证候倾向，发生相应的免疫、神经、内分泌等改变的潜质，提示CIA对寒、热方药的干预可出现不同的反应。
3.2.2 RA、CIA从“络”辨治的部分病理生理基础
“病络”是RA、CIA病变的主要渠道和枢纽。研究发现，导致“病络”形成的“毒邪”为综合的病因病理，在本研究中表现为：
(1)部分细胞因子分泌量的变化、分泌节律的紊乱：CIA大鼠0:00时血清TNF-α(P, 百拇医药