通心络治疗对血清可溶性CD40L的影响
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中国医学论坛报
摘 要
目的 通过观察通心络胶囊治疗急性冠脉综合征患者30天前后血清可溶性CD40配体sCD40L的变化了解通心络胶囊对斑块稳定和免疫炎症抑制的影响。
方法 将50例急性冠脉综合征患者随机分为通心络治疗组33例，口服通心络胶囊2粒一天三次和他汀类药物治疗组17例 测定治疗前后患者血清sCD40L水平的变化。
结果 两组患者治疗前后血清sCD40L水平明显下降，通心络组下降34.6%、他汀类组下降33.4%。与治疗前比较有显著统计学差异P<0.01，两组用药前后差值比较无显著性差异P>0.05。
结论 急性冠脉综合征患者早期予以通心络胶囊治疗一个疗程可明显降低血清炎症因子水平，有利于动脉粥样硬化斑块的稳定。
近年研究证明，免疫炎症反应与急性冠脉综合征有关1 CD40-CD40L系统作为免疫炎症反应中细胞信息通道的关键介导因子 可激活动脉粥样硬化(AS)斑块中黏附分子、细胞因子、基质金属蛋白酶和组织因子等 因此CD40-CD40L在AS的致病机制中可能是始动因素，并参与了AS发生、发展乃至斑块破裂的全过程2。而目前应用的抗动脉粥样硬化治疗中较为肯定的是他汀类调脂药物治疗，能使高胆固醇血症患者和急性冠脉综合征患者外周血中CD40/CD40L的表达下调3。有关其他药物治疗对CD40信号通路抑制作用的研究甚少。本研究旨在观察中成药通心络胶囊治疗急性冠脉综合征前后血清可溶性CD40L(sCD40L)水平的变化，以了解早期通心络治疗对斑块稳定和免疫炎症抑制的影响探讨急性冠脉综合征早期应用通心络的有效性和安全性。
, 百拇医药
资料与方法
研究对象
研究对象选自2004年2月至2004年7月在我院住院的急性冠脉综合征患者50例。所有患者在入院前2个月未服任何调脂药，在入院次日空腹抽血检查后被随机分为两组。通心络组33例，男性27例，女性6例，平均年龄(66±10)岁；其中合并高血压15例、糖尿病7例、高脂血症18例；急性心肌梗死AMI行急诊PCI术14例，不稳定性心绞痛(UA)行PTCA+支架术10例，冠脉搭桥术4例；予以常规治疗(氯吡格雷或噻氯匹定、硝酸酯类、β受体阻滞剂、ACEI、肠溶阿司匹林)加通心络胶囊2粒，一日三次，不用任何调脂药物。他汀类组17例(氟伐他汀10例和辛伐他汀7例)，男性15例，女性2例，平均年龄(64±11)岁；其中合并高血压2例、糖尿病2例、高脂血症13例；AMI行急性PCI术7例，UA行PTCA+支架术5例，冠脉搭桥术1例；予以常规治疗加氟伐他汀或辛伐他汀40 mg/d。对患者治疗前及治疗后30天取血检查sCD40L。AMI、UA 均经冠脉造影、心电图及酶谱改变证实。所有受试者近期均无感染性疾病或肿瘤。两组患者性别、年龄、血脂、吸烟、临床用药情况及疾病构成比均无显著差异。两组患者疾病构成情况见表1。
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表1 通心络组和他汀类组疾病构成比较
通心络组(33例) 他汀类组(17例)
人数 构成比人数 人数 构成比
不稳定性 19 57.5% 10 58.8%
心绞痛
急性心肌梗死 14 42.5% 7 41.2%
标本采集及处理
给予所有受试者在急性胸痛或心肌梗死发生后第二天空腹抽取全血3 mk，并在4 ℃自然凝固后1h内1500 g离心5 min，血清-70 ℃保存。在用药后平均30 d再对所有受试者抽取空腹全血3 mk，分离血清。
, http://www.100md.com 检测方法
血清sCD40L检测：血样本-70 ℃冻存，采用酶联免疫吸附法(ELASA)测定血清sCD40L，试剂盒购自美国BIOSOURCE公司(Catakog ＃KHS4001)，按照试剂盒说明严格操作，318-Micropkate Reader型酶标分析仪测定。建立OD值与sCD40Lng/mk的回归曲线，并根据回归曲线测得患者用药前后sCD40L ng/mk浓度。
统计学处理
数据均用x±s表示，各组用药前后比较用配对t检验，两组用药前后差值比较用团体t检验。P<0.05时认为有统计学显著意义。
结 果
ELASA法测sCD40L回归曲线的建立：
sCD40L回归线的建立见表2和图1。
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表2 sCD40L浓度与OD值
sCD40L浓度(ng/mk) OD值
2.5 1.029
1.25 0.714
0.63 0.490
0.31 0.276
0.16 0.189
0 0
[Image:1]
sCD40L浓度(ng/mk)
图1 ELASA法测sCD40Lx与OD值的回归线
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所得sCD40L浓度(X)与OD值(Y)的回归曲线为：Y＝0.136533+0.387381X。
急性冠脉综合征患者血清sCD40L水平
通心络组用药后sCD40L水平(6.106±2.315) ng/mk 显著低于用药前(9.339±2.864) ng/mk下降达34.6%，用药前后比较有显著统计学差异(P<0.01)。他汀类组用药后sCD40L水平(7.032±3.17) ng/mk明显低于用药前(10.558±2.33) ng/mk下降33.4%，用药前后比较有显著统计学差异(P<0.01)。两组用药前后sCD40L下降值通心络组为(3.233±2.153)ng/mk；他汀类组为(3.525±2.94) ng/mk比较无显著差异(P＝0.36)。
讨 论
冠状动脉粥样硬化是缺血性心脏病最常见的病因，而粥样斑块破裂及伴随的附壁血栓则是急性冠脉综合征发生的重要病理生理改变之一。如何能延缓或阻断动脉粥样硬化的发生发展，使粥样斑块稳定，已成为当今研究的热点。
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CD40与CD40L的相互作用在免疫反应调节中非常重要，它参与抗原呈递和自身免疫反应，与T淋巴细胞和巨噬细胞激活有关。CD40L也称gp39，最近被定义为CD154，是肿瘤坏死因子(TNF)超基因家族的一种，它主要表达于激活的CD4+T淋巴细胞，也表达于B淋巴细胞、自然杀伤细胞、单核/巨噬细胞等。CD40与CD40L结合后激活一些第二信使系统，进而激活相应的基因表达。CD40-CD40L信号途径使动脉粥样硬化炎症反应过程中的黏附分子、细胞因子、基质金属蛋白酶和组织因子等激活。因此有人认为，CD40L参与了AS发生过程中的免疫反应，可能是炎症发展的基础2。实验证明，通过应用抗CD40L抗体能减轻和延缓动脉粥样硬化的发展和斑块破裂，促进斑块稳定4。
急性冠脉综合征患者sCD40L水平明显增高，提示sCD40L可能参与了急性冠脉综合征的发生5。目前应用的抗动脉粥样硬化治疗中较为肯定的是他汀类调脂药物的治疗，能使高胆固醇血症患者和急性冠脉综合征患者外周血中CD40/CD40L的表达下调3，提示他汀类药物治疗能减轻AS急性期的免疫反应，可能直接抑制了炎症的上级调节机制，从而减少了一些与AS及斑块稳定的炎症介质、细胞因子等的生成和表达。
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通心络胶囊是吴以岭教授首创运用中医络病理论研制而成的中药复方制剂，具有益气活血、通络止痛之功效。通心络胶囊由人参、水蛭、土鳖虫、蝉衣、全蝎、蜈蚣、冰片等组成。多项研究已证明，通心络应用于冠心病、不稳定性心绞痛等疗效显著，具有改善血管内皮功能、抑制血小板凝集等作用6。
本研究发现通心络能明显降低急性冠脉综合征患者血清sCD40L水平，显示与他汀类药同样的效果，提示通心络、同样具有减轻AS急性期的免疫反应，抑制炎症，从而稳定斑块，延缓AS发展的作用。推测通心络可能通过抑制血小板凝集、改善微循环、使血清sCD40L水平下调，并使其介导的免疫因子如血清 ET(血管内皮细胞合成的缩血管因子)和部分细胞黏附分子表达下降、血清NO(血管内皮细胞合成的舒血管因子)表达增加等有关。这方面的机制有待进一步研究。服用通心络胶囊过程中个别患者出现胃部不适，减量或餐后即刻服用可使之明显减轻。总之，急性冠脉综合征早期应用通心络是安全有效的，能抑制炎症，稳定斑块。
图2 用药前后sCD40L浓度的变化[Image:2]
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参考文献
1.Ross R. Atherosckerosis - an infkammatory disease . N Engk J Med
1999340115-126
2.Horton DB Libby P Schonbeck U. Ligation of CD40 on vascukar smooth muscke cekks mediates koss of interstitiak cokkagen via matrix metakkoproteinase activity. Ann N Y Acad Sci. 2001 947329-36
3.Wagner AH Gebauer M Gukdenzoph B. 3-hydroxy-3-methykgkutaryk coenzyme A reductase-independent inhibition of CD40 expression by atorvastatin in human endothekiak cekks Arterioscker Thromb Vasc Biok. 2002 Nov 12211 1784-9
4.Phipps RP Koumas L Leung E. The CD40-CD40L system a potentiak therapeutic target in atherosckerosis. Curr Opin Investig Drugs. 2001 26773-7
5.严金川 吴宗贵 黄佐 等：CD40L高表达在急性冠脉综合征病人中的临床意义解放军医学杂志 2001.07.10 267 474-476：
6.黄元伟 王洪巨：通心络对不稳定性心绞痛患者血管内皮功能影响的临床研究。, 百拇医药
目的 通过观察通心络胶囊治疗急性冠脉综合征患者30天前后血清可溶性CD40配体sCD40L的变化了解通心络胶囊对斑块稳定和免疫炎症抑制的影响。
方法 将50例急性冠脉综合征患者随机分为通心络治疗组33例，口服通心络胶囊2粒一天三次和他汀类药物治疗组17例 测定治疗前后患者血清sCD40L水平的变化。
结果 两组患者治疗前后血清sCD40L水平明显下降，通心络组下降34.6%、他汀类组下降33.4%。与治疗前比较有显著统计学差异P<0.01，两组用药前后差值比较无显著性差异P>0.05。
结论 急性冠脉综合征患者早期予以通心络胶囊治疗一个疗程可明显降低血清炎症因子水平，有利于动脉粥样硬化斑块的稳定。
近年研究证明，免疫炎症反应与急性冠脉综合征有关1 CD40-CD40L系统作为免疫炎症反应中细胞信息通道的关键介导因子 可激活动脉粥样硬化(AS)斑块中黏附分子、细胞因子、基质金属蛋白酶和组织因子等 因此CD40-CD40L在AS的致病机制中可能是始动因素，并参与了AS发生、发展乃至斑块破裂的全过程2。而目前应用的抗动脉粥样硬化治疗中较为肯定的是他汀类调脂药物治疗，能使高胆固醇血症患者和急性冠脉综合征患者外周血中CD40/CD40L的表达下调3。有关其他药物治疗对CD40信号通路抑制作用的研究甚少。本研究旨在观察中成药通心络胶囊治疗急性冠脉综合征前后血清可溶性CD40L(sCD40L)水平的变化，以了解早期通心络治疗对斑块稳定和免疫炎症抑制的影响探讨急性冠脉综合征早期应用通心络的有效性和安全性。
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资料与方法
研究对象
研究对象选自2004年2月至2004年7月在我院住院的急性冠脉综合征患者50例。所有患者在入院前2个月未服任何调脂药，在入院次日空腹抽血检查后被随机分为两组。通心络组33例，男性27例，女性6例，平均年龄(66±10)岁；其中合并高血压15例、糖尿病7例、高脂血症18例；急性心肌梗死AMI行急诊PCI术14例，不稳定性心绞痛(UA)行PTCA+支架术10例，冠脉搭桥术4例；予以常规治疗(氯吡格雷或噻氯匹定、硝酸酯类、β受体阻滞剂、ACEI、肠溶阿司匹林)加通心络胶囊2粒，一日三次，不用任何调脂药物。他汀类组17例(氟伐他汀10例和辛伐他汀7例)，男性15例，女性2例，平均年龄(64±11)岁；其中合并高血压2例、糖尿病2例、高脂血症13例；AMI行急性PCI术7例，UA行PTCA+支架术5例，冠脉搭桥术1例；予以常规治疗加氟伐他汀或辛伐他汀40 mg/d。对患者治疗前及治疗后30天取血检查sCD40L。AMI、UA 均经冠脉造影、心电图及酶谱改变证实。所有受试者近期均无感染性疾病或肿瘤。两组患者性别、年龄、血脂、吸烟、临床用药情况及疾病构成比均无显著差异。两组患者疾病构成情况见表1。
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表1 通心络组和他汀类组疾病构成比较
通心络组(33例) 他汀类组(17例)
人数 构成比人数 人数 构成比
不稳定性 19 57.5% 10 58.8%
心绞痛
急性心肌梗死 14 42.5% 7 41.2%
标本采集及处理
给予所有受试者在急性胸痛或心肌梗死发生后第二天空腹抽取全血3 mk，并在4 ℃自然凝固后1h内1500 g离心5 min，血清-70 ℃保存。在用药后平均30 d再对所有受试者抽取空腹全血3 mk，分离血清。
, http://www.100md.com 检测方法
血清sCD40L检测：血样本-70 ℃冻存，采用酶联免疫吸附法(ELASA)测定血清sCD40L，试剂盒购自美国BIOSOURCE公司(Catakog ＃KHS4001)，按照试剂盒说明严格操作，318-Micropkate Reader型酶标分析仪测定。建立OD值与sCD40Lng/mk的回归曲线，并根据回归曲线测得患者用药前后sCD40L ng/mk浓度。
统计学处理
数据均用x±s表示，各组用药前后比较用配对t检验，两组用药前后差值比较用团体t检验。P<0.05时认为有统计学显著意义。
结 果
ELASA法测sCD40L回归曲线的建立：
sCD40L回归线的建立见表2和图1。
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表2 sCD40L浓度与OD值
sCD40L浓度(ng/mk) OD值
2.5 1.029
1.25 0.714
0.63 0.490
0.31 0.276
0.16 0.189
0 0
[Image:1]
sCD40L浓度(ng/mk)
图1 ELASA法测sCD40Lx与OD值的回归线
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所得sCD40L浓度(X)与OD值(Y)的回归曲线为：Y＝0.136533+0.387381X。
急性冠脉综合征患者血清sCD40L水平
通心络组用药后sCD40L水平(6.106±2.315) ng/mk 显著低于用药前(9.339±2.864) ng/mk下降达34.6%，用药前后比较有显著统计学差异(P<0.01)。他汀类组用药后sCD40L水平(7.032±3.17) ng/mk明显低于用药前(10.558±2.33) ng/mk下降33.4%，用药前后比较有显著统计学差异(P<0.01)。两组用药前后sCD40L下降值通心络组为(3.233±2.153)ng/mk；他汀类组为(3.525±2.94) ng/mk比较无显著差异(P＝0.36)。
讨 论
冠状动脉粥样硬化是缺血性心脏病最常见的病因，而粥样斑块破裂及伴随的附壁血栓则是急性冠脉综合征发生的重要病理生理改变之一。如何能延缓或阻断动脉粥样硬化的发生发展，使粥样斑块稳定，已成为当今研究的热点。
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CD40与CD40L的相互作用在免疫反应调节中非常重要，它参与抗原呈递和自身免疫反应，与T淋巴细胞和巨噬细胞激活有关。CD40L也称gp39，最近被定义为CD154，是肿瘤坏死因子(TNF)超基因家族的一种，它主要表达于激活的CD4+T淋巴细胞，也表达于B淋巴细胞、自然杀伤细胞、单核/巨噬细胞等。CD40与CD40L结合后激活一些第二信使系统，进而激活相应的基因表达。CD40-CD40L信号途径使动脉粥样硬化炎症反应过程中的黏附分子、细胞因子、基质金属蛋白酶和组织因子等激活。因此有人认为，CD40L参与了AS发生过程中的免疫反应，可能是炎症发展的基础2。实验证明，通过应用抗CD40L抗体能减轻和延缓动脉粥样硬化的发展和斑块破裂，促进斑块稳定4。
急性冠脉综合征患者sCD40L水平明显增高，提示sCD40L可能参与了急性冠脉综合征的发生5。目前应用的抗动脉粥样硬化治疗中较为肯定的是他汀类调脂药物的治疗，能使高胆固醇血症患者和急性冠脉综合征患者外周血中CD40/CD40L的表达下调3，提示他汀类药物治疗能减轻AS急性期的免疫反应，可能直接抑制了炎症的上级调节机制，从而减少了一些与AS及斑块稳定的炎症介质、细胞因子等的生成和表达。
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通心络胶囊是吴以岭教授首创运用中医络病理论研制而成的中药复方制剂，具有益气活血、通络止痛之功效。通心络胶囊由人参、水蛭、土鳖虫、蝉衣、全蝎、蜈蚣、冰片等组成。多项研究已证明，通心络应用于冠心病、不稳定性心绞痛等疗效显著，具有改善血管内皮功能、抑制血小板凝集等作用6。
本研究发现通心络能明显降低急性冠脉综合征患者血清sCD40L水平，显示与他汀类药同样的效果，提示通心络、同样具有减轻AS急性期的免疫反应，抑制炎症，从而稳定斑块，延缓AS发展的作用。推测通心络可能通过抑制血小板凝集、改善微循环、使血清sCD40L水平下调，并使其介导的免疫因子如血清 ET(血管内皮细胞合成的缩血管因子)和部分细胞黏附分子表达下降、血清NO(血管内皮细胞合成的舒血管因子)表达增加等有关。这方面的机制有待进一步研究。服用通心络胶囊过程中个别患者出现胃部不适，减量或餐后即刻服用可使之明显减轻。总之，急性冠脉综合征早期应用通心络是安全有效的，能抑制炎症，稳定斑块。
图2 用药前后sCD40L浓度的变化[Image:2]
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参考文献
1.Ross R. Atherosckerosis - an infkammatory disease . N Engk J Med
1999340115-126
2.Horton DB Libby P Schonbeck U. Ligation of CD40 on vascukar smooth muscke cekks mediates koss of interstitiak cokkagen via matrix metakkoproteinase activity. Ann N Y Acad Sci. 2001 947329-36
3.Wagner AH Gebauer M Gukdenzoph B. 3-hydroxy-3-methykgkutaryk coenzyme A reductase-independent inhibition of CD40 expression by atorvastatin in human endothekiak cekks Arterioscker Thromb Vasc Biok. 2002 Nov 12211 1784-9
4.Phipps RP Koumas L Leung E. The CD40-CD40L system a potentiak therapeutic target in atherosckerosis. Curr Opin Investig Drugs. 2001 26773-7
5.严金川 吴宗贵 黄佐 等：CD40L高表达在急性冠脉综合征病人中的临床意义解放军医学杂志 2001.07.10 267 474-476：
6.黄元伟 王洪巨：通心络对不稳定性心绞痛患者血管内皮功能影响的临床研究。, 百拇医药