临床篇：维奥欣对动脉粥样硬化及冠心病介入治疗疗效的影响响
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目的：研究VIOSCIN对动脉粥样硬化形成及心肌缺血的影响。
方法：采用高胆固醇饮食喂养20只大鼠，随机分为对照组和试验组，每组10只，试验组于喂养7天后添加VIOSCIN，于不同时期测血清胆固醇(TC)，甘油三脂(TG)和血清内皮素(EI-1)水平，观察动脉粥样硬化和心肌缺血程度。
结果：对照组30d，60dTC，TG和ET-1较喂养前明显升高(P0.05)，光学显微镜检查；对照组主动脉根部局部管腔形成典型的动脉粥样硬化斑块，平滑肌细胞排列紊乱。试验组主动脉根部管壁厚薄均匀一致，平滑肌细胞排列整齐，内膜未见粥样斑块。电镜检查；对照组心肌线粒体肿胀，线粒体嵴稀疏，内可见大量空泡，毛细血管内皮电子密度降低，试验组心肌线粒体未见上述改变。毛细血管内皮电子密度较高，偶见空泡变性。
结论：VIOSCIN能降低TC，TG和ET-1，防治动脉粥样硬化和心肌缺血，具有良好的临床应用前景。
, 百拇医药
关键词：动脉粥样硬化 心肌缺血 内皮素
第一部分 动物实验
维奥欣对动脉粥样硬化及粥样硬化性心肌缺血的实验研究
动脉硬化的形成过程较为复杂，已知多种因素可以促使冠状动脉粥样硬化的发生和发展，高血压、高脂血症、吸烟、糖尿病等均为冠心病的易患因素。本研究应用维奥欣干预动脉粥样硬化(AS)的造型鼠，对比研究主动脉、冠状动脉粥样硬化和由此导致的心肌缺血的程度，并观察维奥欣对血清胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)及血浆内皮素(EI-1)的影响，旨在探讨维奥欣(VIOSCIN)防治AS的作用并探讨其机制，为冠心病的预防和治疗提供理论依据，寻找理想的防治冠心病的药物。
材料和方法
材料 动物：选用英国种豚鼠，4~5月龄，雌雄兼备，体重在500-600g之间，共20只，由青岛大学医学院动物试验中心提供。
, 百拇医药
维奥欣，英文名称VIOSCIN，由东盛科技股份有限公司制药一厂生产。
ET-1测定药盒由解放军军事医学科学院提供。
方法 20只大鼠随机分为对照组和试验组，每组10只。试验组在高胆固醇食物喂养7天后，在高胆固醇食物中添加维奥欣(80mg/Kg)，持续喂养至第60天。对照组高胆固醇食物喂养60天。
心电图测量 喂养前和喂养第30、60天分别记录心电图。心电图记录采用上海第二医科大学研制的MPA-V软件，记录II导联心电图。观察心电图心律及ST-T变化。
血TG-TC测定：喂养前、喂养第30、60天分别测定血清TC、TG。
血浆内皮素(ET-1)测定：喂养前、喂养第30、60天分别测定血浆ET-1。采用放射免疫分析法测定ET-1。
, 百拇医药
病变血管和心肌的光学镜检和电镜检查 高胆固醇喂养第60天，处死两组动物，开胸取出心脏，生理盐水冲洗。取心脏主动脉根部及其周围心脏组织、冠状动脉组织，放置于40%多聚甲醛液固定12小时，石蜡包埋、切片，HE梁色。同时取心房肌和心室肌组织切片，以上述方法固定染色，进行光学镜检和电镜检查。
统计学处理 数据采用配对资料的t检验，p0.05)(表1、2)。
对照组血浆ET-1在喂养30天和60天时较喂养前明显升高(p0.05)(表3)。
光学显微镜检查 对照组主动脉根部局部管壁向管腔内突出，形成典型的动脉粥样硬化斑块，平滑肌细胞排列紊乱、局部增生，主动脉旁可见大量的呈空泡状的脂肪组织。试验组主动脉根部管壁厚薄均匀一致，平滑肌细胞排列整齐，内膜未见粥样斑块。
电镜检查 对照组心肌线粒体肿胀，线粒体嵴稀疏，内可见大量空泡，线粒体外腔扩大。毛细血管内皮电子密度降低，可见大量明显的空泡变性。试验组心肌线粒体未见线粒体嵴稀疏，空泡变性较对照组明显减少，线粒体外腔未见扩大。毛细血管内皮电子密度较高，偶见空泡变性，但较对照组电子密度高。
, 百拇医药
讨论
在动脉粥样硬化形成过程中的诸多因素中，血清胆醇含量过高与动脉粥样硬化密切相关。降低血胆固
醇、甘油三脂水平可以使动脉粥样硬化斑块消退，降低心血管疾病的发生率和病死率。近年来有研究提出血管内皮功能紊乱为发生动脉粥样硬化的病理基础[1-3]，血管内皮具有特殊的解剖位置，直接接触血液和血管组织，是血管损伤和动脉粥样硬化危险因素最直接的“靶点”，多种因素高血压、吸烟、高脂血症、糖尿病等可以改变内皮细胞的功能，内皮细分泌ET-1增加，后者具有明显的收缩血管作用，并通过与胰岛素、血糖以及脂质的相互作用，促进血管平滑肌细胞增生和动脉粥样硬化的发生和发展[4-6]。血管内皮细胞除合成2种血管松弛因子(PGI2和EDPF)外，至少还合成3种缩血管物质，其中ET为所知的最强的内源性缩血管物质[7]，ET通过基因表达促进DNA合成，刺激血管平滑肌细胞增生，促使冠状动脉病变形成，而动脉粥样硬化病变本身又可以导致ET的产生增加。在冠状动脉急性缺血试验以及急性心肌梗塞时该物质均有明显升高[8,9]。本研究观察到高脂肪饮食喂养大鼠不仅使其血胆固醇和甘油三脂升高，且动脉粥样硬化病变严重，ET-1明显升高，也提示ET-1与动脉粥样硬化的发生发展有密切关系。
, 百拇医药
维奥欣是从我国特有的药用植物穿山龙提取的水溶性甾体皂甙类物质，具有活血化瘀，疏通血脉的作用。我们将其介入动脉粥样硬化造型大鼠后，发现大鼠血清胆固醇、甘油三脂未见增加，ET-1也无升高，无AS病变发生，心肌细胞超微结构未发生明显改变，电镜下线粒体缺血性肿胀减轻，空泡形成较少，毛细血管内皮细胞电子密度增高；光学显微镜下表现为主动脉壁和冠状动脉未形成动脉粥样硬化斑块，主动脉和冠状动脉壁厚薄均匀一致，未见大量空泡变性状脂肪组织，因此，推断维奥欣可能通过调节脂质代谢，改善和保护血管内皮功能，使内皮细胞分泌ET-1减少，从而发挥预防和治疗AS作用。本文还观察到高脂饲料喂养组大鼠其ECG表现出明显的缺血性ST-T改变，与高脂饮食导致冠状动脉粥样硬化性狭窄，心肌缺血有关，而加服维奥欣组大鼠，未表现出类似的现象，未见冠状动脉粥样硬化改变和狭窄，心肌供血良好，提示维奥欣具有预防冠状动脉粥样硬化性狭窄及其所致的心肌缺血性损伤的作用。提示维奥欣在临床防治动脉粥样硬化性狭窄及其所致的心肌缺血方面有良好的前景。
第二部分 临床研究
, 百拇医药
维奥欣对冠心病介入治疗疗效的影响(研究正在进行)
经皮穿刺冠状动脉腔内成形术(PTCA)冠状动脉内支架植入是目前治疗冠心病尤其是不稳定心绞痛和急性心肌梗塞十分有效的方法，成功率高并发症少，患者避免了冠脉搭桥的手术创伤和痛苦，目前临床应用越来越多。然而，术后血管的再狭窄是困扰冠心病介入治疗的一大问题。降脂治疗、抗血小板、抗凝血、转换酶抑制剂等均被用于术后再狭窄的防治，但效果并不理想。因此，目前冠心病介入治疗后再狭窄的防治仍然是综合治疗。中药在防治冠脉介入治疗后再狭窄方面的作用如何目前尚无明确的答案，多种国产中成药被用于这方面的临床和基础研究，取得初步效果。我们采用国产中药维奥欣和目前普遍用于防治再狭窄的降脂药物舒降之比较，观察维奥欣对介入治疗后疗效，尤其是再狭窄的可能影响。
临床资料
1998年10月~2001年6月行冠状动脉内支架植入术的冠心病患者201例；除外单纯PTCA术及接受支架治疗的三支病变病人；术前检测血糖、血胆固醇、肝肾功能、PT及ECG、心脏超声、心功能评定；
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观察病例的临床资料(表1)
方法
服药方法：两组术前3-5天开始每日口服抵克力得0.5，术后抵克力得0.25/d>2个月，阿司匹林0.3/d，硫氮卓酮、ACEI，硝酸酯类等；维奥欣组：维奥欣160mg，每日3次；对照组：舒降之20mg/日；联合组：维奥欣160mg，每日3次；舒降之20mg/日。三组基础治疗具有良好的可比性。
冠状动脉成形术：采用股动脉穿刺插管，完成冠脉造影后根据病变特点选择球囊和支架等，所有病人支架植入术顺利，术后3-4小时拔除留置
动脉鞘。三组病人置入支架情况见表3。
结果
冠状动脉内支架植入术的成功率
, 百拇医药
入选病人的冠状动脉支架植入手术均顺利，手术成功率100%，无死亡发生。
随访
随访从术后开始，记录患者临床症状(心绞痛、心力衰竭等)、血脂变化(TG、CH)随访6-18个月。
三组病人观察期间内血脂变化(表4)
本术后再狭窄 维奥欣组10例心绞痛再发，ECG示原部位心肌缺血，冠造示支架内再狭窄(14.3%)；对照组发生心绞痛9例，ECG示原部位缺血加重，冠造示支架内再狭窄(13.8%)；联合组8例心绞痛再发，ECG示原部位心肌缺血，冠造示支架内再狭窄(12.1%)。组间比较无显著差异(P>0.05)；
三组病人左心射血分数(表5)
三组病人于术前和术后3个月采用彩色多普勒超声评价左心功能(LVEF)。
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讨论
流行病学调查显示，膳食中饱和脂肪酸和/或胆固醇多，可使平均血脂水平尤其是血浆胆固醇水平增高，冠心病的患病率及发病率也相应的增高[10]。表明高脂血症是冠心病发病的重要危险因素一。经过药物治疗，脂质代谢异常改善可以延缓冠状动脉粥样硬化病变的发展，甚至可以使原有粥样硬化斑块减小或消退。因此，降脂治疗对于冠心病的一级和二级预防、降低发病率和死亡率具有十分重要的意义。目前临床上用于调节脂质代谢的药物很多，其作用机制一般有以下几个方面：①阻止胆固醇或胆酸从肠道吸收，促进从肠道排泄；②抑制胆固醇的体内合成或促进胆固醇的转化；
③阻止其他脂质的合成或促进其他脂质的代谢等。调制药物在临床上应用通常遇到的问题除了其降至效果外，往往因为其明显的副作用而限制其临床应用。突出的问题是长期应用降脂药物尤其是贝特类和他汀类(HMG-CoA还原酶抑制剂)对肝脏毒性和肌病[11]。在众多的降脂药物中上述两类药物的降脂疗效是肯定的，但是这两类药物价格昂贵，普通人难以接受。寻找一种价格合理、疗效确切、毒副作用小的降脂药物具有重要意义。
冠心病介入治疗后血管再狭窄是目前困扰该项技术发展的一个主要难题，发生再狭窄的机制复杂，受多种因素的影响，因此预防仍然是多种药物和措施的联合应用。本研究通过观察维奥欣与舒降之的对比研究，发现维奥欣在对介入治疗疗效的影响方面与舒降之类似，无显著差异。其治疗动脉硬化和防治再狭窄的机制可能与降血脂、影响血管内皮功能等有关[12]。由于本研究尚未完成，维奥欣对再狭窄的作用如何有待进一步观察，但是，本研究初步结果具有重要作用，是一种安全有效治疗冠心病和高脂血症的国产植物药制剂。, http://www.100md.com
方法：采用高胆固醇饮食喂养20只大鼠，随机分为对照组和试验组，每组10只，试验组于喂养7天后添加VIOSCIN，于不同时期测血清胆固醇(TC)，甘油三脂(TG)和血清内皮素(EI-1)水平，观察动脉粥样硬化和心肌缺血程度。
结果：对照组30d，60dTC，TG和ET-1较喂养前明显升高(P0.05)，光学显微镜检查；对照组主动脉根部局部管腔形成典型的动脉粥样硬化斑块，平滑肌细胞排列紊乱。试验组主动脉根部管壁厚薄均匀一致，平滑肌细胞排列整齐，内膜未见粥样斑块。电镜检查；对照组心肌线粒体肿胀，线粒体嵴稀疏，内可见大量空泡，毛细血管内皮电子密度降低，试验组心肌线粒体未见上述改变。毛细血管内皮电子密度较高，偶见空泡变性。
结论：VIOSCIN能降低TC，TG和ET-1，防治动脉粥样硬化和心肌缺血，具有良好的临床应用前景。
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关键词：动脉粥样硬化 心肌缺血 内皮素
第一部分 动物实验
维奥欣对动脉粥样硬化及粥样硬化性心肌缺血的实验研究
动脉硬化的形成过程较为复杂，已知多种因素可以促使冠状动脉粥样硬化的发生和发展，高血压、高脂血症、吸烟、糖尿病等均为冠心病的易患因素。本研究应用维奥欣干预动脉粥样硬化(AS)的造型鼠，对比研究主动脉、冠状动脉粥样硬化和由此导致的心肌缺血的程度，并观察维奥欣对血清胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)及血浆内皮素(EI-1)的影响，旨在探讨维奥欣(VIOSCIN)防治AS的作用并探讨其机制，为冠心病的预防和治疗提供理论依据，寻找理想的防治冠心病的药物。
材料和方法
材料 动物：选用英国种豚鼠，4~5月龄，雌雄兼备，体重在500-600g之间，共20只，由青岛大学医学院动物试验中心提供。
, 百拇医药
维奥欣，英文名称VIOSCIN，由东盛科技股份有限公司制药一厂生产。
ET-1测定药盒由解放军军事医学科学院提供。
方法 20只大鼠随机分为对照组和试验组，每组10只。试验组在高胆固醇食物喂养7天后，在高胆固醇食物中添加维奥欣(80mg/Kg)，持续喂养至第60天。对照组高胆固醇食物喂养60天。
心电图测量 喂养前和喂养第30、60天分别记录心电图。心电图记录采用上海第二医科大学研制的MPA-V软件，记录II导联心电图。观察心电图心律及ST-T变化。
血TG-TC测定：喂养前、喂养第30、60天分别测定血清TC、TG。
血浆内皮素(ET-1)测定：喂养前、喂养第30、60天分别测定血浆ET-1。采用放射免疫分析法测定ET-1。
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病变血管和心肌的光学镜检和电镜检查 高胆固醇喂养第60天，处死两组动物，开胸取出心脏，生理盐水冲洗。取心脏主动脉根部及其周围心脏组织、冠状动脉组织，放置于40%多聚甲醛液固定12小时，石蜡包埋、切片，HE梁色。同时取心房肌和心室肌组织切片，以上述方法固定染色，进行光学镜检和电镜检查。
统计学处理 数据采用配对资料的t检验，p0.05)(表1、2)。
对照组血浆ET-1在喂养30天和60天时较喂养前明显升高(p0.05)(表3)。
光学显微镜检查 对照组主动脉根部局部管壁向管腔内突出，形成典型的动脉粥样硬化斑块，平滑肌细胞排列紊乱、局部增生，主动脉旁可见大量的呈空泡状的脂肪组织。试验组主动脉根部管壁厚薄均匀一致，平滑肌细胞排列整齐，内膜未见粥样斑块。
电镜检查 对照组心肌线粒体肿胀，线粒体嵴稀疏，内可见大量空泡，线粒体外腔扩大。毛细血管内皮电子密度降低，可见大量明显的空泡变性。试验组心肌线粒体未见线粒体嵴稀疏，空泡变性较对照组明显减少，线粒体外腔未见扩大。毛细血管内皮电子密度较高，偶见空泡变性，但较对照组电子密度高。
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讨论
在动脉粥样硬化形成过程中的诸多因素中，血清胆醇含量过高与动脉粥样硬化密切相关。降低血胆固
醇、甘油三脂水平可以使动脉粥样硬化斑块消退，降低心血管疾病的发生率和病死率。近年来有研究提出血管内皮功能紊乱为发生动脉粥样硬化的病理基础[1-3]，血管内皮具有特殊的解剖位置，直接接触血液和血管组织，是血管损伤和动脉粥样硬化危险因素最直接的“靶点”，多种因素高血压、吸烟、高脂血症、糖尿病等可以改变内皮细胞的功能，内皮细分泌ET-1增加，后者具有明显的收缩血管作用，并通过与胰岛素、血糖以及脂质的相互作用，促进血管平滑肌细胞增生和动脉粥样硬化的发生和发展[4-6]。血管内皮细胞除合成2种血管松弛因子(PGI2和EDPF)外，至少还合成3种缩血管物质，其中ET为所知的最强的内源性缩血管物质[7]，ET通过基因表达促进DNA合成，刺激血管平滑肌细胞增生，促使冠状动脉病变形成，而动脉粥样硬化病变本身又可以导致ET的产生增加。在冠状动脉急性缺血试验以及急性心肌梗塞时该物质均有明显升高[8,9]。本研究观察到高脂肪饮食喂养大鼠不仅使其血胆固醇和甘油三脂升高，且动脉粥样硬化病变严重，ET-1明显升高，也提示ET-1与动脉粥样硬化的发生发展有密切关系。
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维奥欣是从我国特有的药用植物穿山龙提取的水溶性甾体皂甙类物质，具有活血化瘀，疏通血脉的作用。我们将其介入动脉粥样硬化造型大鼠后，发现大鼠血清胆固醇、甘油三脂未见增加，ET-1也无升高，无AS病变发生，心肌细胞超微结构未发生明显改变，电镜下线粒体缺血性肿胀减轻，空泡形成较少，毛细血管内皮细胞电子密度增高；光学显微镜下表现为主动脉壁和冠状动脉未形成动脉粥样硬化斑块，主动脉和冠状动脉壁厚薄均匀一致，未见大量空泡变性状脂肪组织，因此，推断维奥欣可能通过调节脂质代谢，改善和保护血管内皮功能，使内皮细胞分泌ET-1减少，从而发挥预防和治疗AS作用。本文还观察到高脂饲料喂养组大鼠其ECG表现出明显的缺血性ST-T改变，与高脂饮食导致冠状动脉粥样硬化性狭窄，心肌缺血有关，而加服维奥欣组大鼠，未表现出类似的现象，未见冠状动脉粥样硬化改变和狭窄，心肌供血良好，提示维奥欣具有预防冠状动脉粥样硬化性狭窄及其所致的心肌缺血性损伤的作用。提示维奥欣在临床防治动脉粥样硬化性狭窄及其所致的心肌缺血方面有良好的前景。
第二部分 临床研究
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维奥欣对冠心病介入治疗疗效的影响(研究正在进行)
经皮穿刺冠状动脉腔内成形术(PTCA)冠状动脉内支架植入是目前治疗冠心病尤其是不稳定心绞痛和急性心肌梗塞十分有效的方法，成功率高并发症少，患者避免了冠脉搭桥的手术创伤和痛苦，目前临床应用越来越多。然而，术后血管的再狭窄是困扰冠心病介入治疗的一大问题。降脂治疗、抗血小板、抗凝血、转换酶抑制剂等均被用于术后再狭窄的防治，但效果并不理想。因此，目前冠心病介入治疗后再狭窄的防治仍然是综合治疗。中药在防治冠脉介入治疗后再狭窄方面的作用如何目前尚无明确的答案，多种国产中成药被用于这方面的临床和基础研究，取得初步效果。我们采用国产中药维奥欣和目前普遍用于防治再狭窄的降脂药物舒降之比较，观察维奥欣对介入治疗后疗效，尤其是再狭窄的可能影响。
临床资料
1998年10月~2001年6月行冠状动脉内支架植入术的冠心病患者201例；除外单纯PTCA术及接受支架治疗的三支病变病人；术前检测血糖、血胆固醇、肝肾功能、PT及ECG、心脏超声、心功能评定；
, 百拇医药
观察病例的临床资料(表1)
方法
服药方法：两组术前3-5天开始每日口服抵克力得0.5，术后抵克力得0.25/d>2个月，阿司匹林0.3/d，硫氮卓酮、ACEI，硝酸酯类等；维奥欣组：维奥欣160mg，每日3次；对照组：舒降之20mg/日；联合组：维奥欣160mg，每日3次；舒降之20mg/日。三组基础治疗具有良好的可比性。
冠状动脉成形术：采用股动脉穿刺插管，完成冠脉造影后根据病变特点选择球囊和支架等，所有病人支架植入术顺利，术后3-4小时拔除留置
动脉鞘。三组病人置入支架情况见表3。
结果
冠状动脉内支架植入术的成功率
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入选病人的冠状动脉支架植入手术均顺利，手术成功率100%，无死亡发生。
随访
随访从术后开始，记录患者临床症状(心绞痛、心力衰竭等)、血脂变化(TG、CH)随访6-18个月。
三组病人观察期间内血脂变化(表4)
本术后再狭窄 维奥欣组10例心绞痛再发，ECG示原部位心肌缺血，冠造示支架内再狭窄(14.3%)；对照组发生心绞痛9例，ECG示原部位缺血加重，冠造示支架内再狭窄(13.8%)；联合组8例心绞痛再发，ECG示原部位心肌缺血，冠造示支架内再狭窄(12.1%)。组间比较无显著差异(P>0.05)；
三组病人左心射血分数(表5)
三组病人于术前和术后3个月采用彩色多普勒超声评价左心功能(LVEF)。
, 百拇医药
讨论
流行病学调查显示，膳食中饱和脂肪酸和/或胆固醇多，可使平均血脂水平尤其是血浆胆固醇水平增高，冠心病的患病率及发病率也相应的增高[10]。表明高脂血症是冠心病发病的重要危险因素一。经过药物治疗，脂质代谢异常改善可以延缓冠状动脉粥样硬化病变的发展，甚至可以使原有粥样硬化斑块减小或消退。因此，降脂治疗对于冠心病的一级和二级预防、降低发病率和死亡率具有十分重要的意义。目前临床上用于调节脂质代谢的药物很多，其作用机制一般有以下几个方面：①阻止胆固醇或胆酸从肠道吸收，促进从肠道排泄；②抑制胆固醇的体内合成或促进胆固醇的转化；
③阻止其他脂质的合成或促进其他脂质的代谢等。调制药物在临床上应用通常遇到的问题除了其降至效果外，往往因为其明显的副作用而限制其临床应用。突出的问题是长期应用降脂药物尤其是贝特类和他汀类(HMG-CoA还原酶抑制剂)对肝脏毒性和肌病[11]。在众多的降脂药物中上述两类药物的降脂疗效是肯定的，但是这两类药物价格昂贵，普通人难以接受。寻找一种价格合理、疗效确切、毒副作用小的降脂药物具有重要意义。
冠心病介入治疗后血管再狭窄是目前困扰该项技术发展的一个主要难题，发生再狭窄的机制复杂，受多种因素的影响，因此预防仍然是多种药物和措施的联合应用。本研究通过观察维奥欣与舒降之的对比研究，发现维奥欣在对介入治疗疗效的影响方面与舒降之类似，无显著差异。其治疗动脉硬化和防治再狭窄的机制可能与降血脂、影响血管内皮功能等有关[12]。由于本研究尚未完成，维奥欣对再狭窄的作用如何有待进一步观察，但是，本研究初步结果具有重要作用，是一种安全有效治疗冠心病和高脂血症的国产植物药制剂。, http://www.100md.com