1986年Sen和Baltimore首先报道核因子-kappaB(NF-κB)，随后十多年中NF-κB在细胞核内外信息传递中的作用越来越受到许多领域研究者的关注。NF-κB能诱导或协同调控多种具有重要生物医学意义的基因，如编码炎性细胞因子、趋化因子、干扰素、MHC蛋白、生长因子、细胞粘附因子的基因和病毒基因等。它参与机体炎症反应 [1] 、血管再生、凋亡等生理和病理生理过程 [2] 。NF-κB首先在淋巴细胞中被作为免疫球蛋白kappa轻链基因表达的调节因子而发现，后来在其他许多细胞中也发现可有NF-κB表达 [3] 。作为一个核心调节因子，它参与了心脏病、肝脏病、肾脏病，甚至五官科等疾病的发生。基于它在体内分布广泛，且具有多样化的生物学作用，在基础与临床研究中日益受到重视。但NF-κB的研究方法，并不是广为人知，在此作一介绍。

    1 细胞中NF-κB的测定

    1.1 凝胶电泳迁移率转变分析(Electrophoretic mobility shift assay，EMSA) [4] EMSA特异性强，是一种简单、快速和极为灵敏的用于检测样品中DNA序列特异性蛋白质的方法。NF-κB活化入核后，可以与靶基因启动子上游特异的κB序列结合。将同位素标记的NF-κB特异的DNA序列，与核粗提物相互作用后进行电泳，那么与DNA特异结合的NF-κB因为具有较大的分子量而使迁移速度明显减慢，因而产生了与游离DNA位置不同的对应于NF-κB/DNA复合物的清晰电泳条带，根据同位素的信号强弱可以直接反映NF-κB/DNA复合物形成的多少。

    1.1.1 抽提核蛋白 [5] 药物作用细胞1h后收集细胞，预冷的PBS漂洗2次，以BufferA(10mM Hepes，pH7.9，10mM KCl，0.1mM EDTA，0.1mM EDTA，1mM DTT，0.5mM PMSF)重悬，10min后加入l0%NP40至终浓度0.6%，混匀后l2000rpm4℃离心20s，弃上清，以Buffer B(20mM Hepes，pH7.9，0.4M NaCl，1mM EDTA，1mM EDTA，0.1mM PMSF)重悬，4℃孵育20min，1200Orpm4℃离心20s，取上清即为核蛋白，-70℃冻存或即刻使用 ......