不同的抗原修复技术在应用中的选择
乳腺肿瘤,免疫组化抗原修复,缓冲液、乳腺肿瘤,免疫组织化学,1材料与方法,2结果,3讨论,参考文献
【摘要】 目的 探讨何时应使用抗原修复技术及其不同的方法在应用中的选择。 方法 通过不处理、微波法、高压法和胰酶法抗原修复以及丙酮简单处理法(属非抗原修复技术),比较16种抗体的免疫组化染色在不同技术条件下的应用效果。 结果 (1)由热引导的抗原修复能极大地改善免疫组化染色效果。(2)采用高压加热抗原修复与微波抗原修复比较,前者的免疫组化效果更佳。(3)抗原修复液的使用有多种方法。(4)比较不处理组和胰酶法,还不能认为胰酶法的染色效果优于不处理组。(5)丙酮简单处理法是一种方法简单,又能使组织免疫反应活性得到明显加强的方法。(6)在抗原修复过程中作用的温度和时间也是抗原修复成败的重要因素之一。(7)石蜡切片的厚度亦可影响抗原的表达。 结论 (1)在实际工作中运用不同的抗原修复技术能极大地改善免疫组化结果,提高难以检测的细胞内、细胞核的抗原检出率。(2)检测抗原不一定要使用抗原修复技术,经丙酮简单处理标本的方法是一种方法简单,又能使组织免疫反应活性得到明显加强的方法,有时是可以替代复杂的抗原修复技术的。【关键词】 免疫组化抗原修复 缓冲液、乳腺肿瘤 免疫组织化学
随着免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的不断深入和广泛应用,抗原修复技术在免疫组化中的作用 [1] 和选择何种抗原修复的方法已成为人们关注的问题。由于以常规福尔马林或其他固定液固定,酒精脱水处理的组织切片,在免疫组化染色时,常有部分待测的组织抗原由于蛋白内和蛋白间的亚甲基桥的桥连,改变了蛋白质的形态,引起许多抗原决定簇被封闭,使免疫反应活性无反应或明显降低 [2] 。因此,充分的抗原修复是关系免疫组化结果好坏的重要因素,此时抗原修复的方式就显得极为重要,但是这些方法较为复杂,或切片在抗原修复过程中易出现脱片现象,可能中断免疫组化染色,延误正常病理报告的发出。因此,寻找一种简单的组织处理方法,在保证免疫反应活性基础上,提高和加强免疫反应阳性率就很有必要。文章就此问题作一探讨。目前常用的抗原修复技术有:酶消化法(胰蛋白酶、胃蛋白酶)、微波处理法、高压锅煮沸法、蒸馏水煮沸法 [3] 、蒸汽法及水浴法。抗原修复液有:柠檬酸盐缓冲液、Tris缓冲液和EDTA缓冲液。我们选择了16种常用抗体,比较微波法、高压法、胰酶法、丙酮简单处理法及不用处理等五种方法的免疫组化染色的应用效果,现将结果总结如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 组织材料 选取66例我院外科手术切除的乳腺癌组织 ......
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