金樱子与鸡内金对实验性糖尿病兔微量元素的影响
据文献报道影响胰岛素活性和糖脂代谢异常的微量元素有铬、锌、铁、硒、钒、铜、锰、镍及稀土元素 [1，2] 。金樱子与鸡内金是传统的中药，具有降血脂改善血流状态及微循环灌注的作用 [3] 。发现金樱子水煎液中含有丰富的微量元素 [4，5] 。本研究主要观察金樱子和鸡内金对食饵性高糖高脂兔胰组织中微量元素钒、铬、硒、镍、锌的影响。
1 材料与方法
1.1 材料 雄性新西兰兔1.5～1.8kg，购自中南大学湘雅医学院动物养殖场。糖脂颗粒饲料，本校动物部配制(蔗糖37%、猪油10%、基础饲料53%) [6] 。加药颗粒饲料配制:先将金樱子于40℃烤干，用中药粉碎机制成粉末，然后制成颗粒饲料。50%葡萄糖、金樱子购自衡阳市中医院药房。硝酸、高氯酸、盐酸试剂均为分析纯。葡萄糖氧化酶试剂盒，购自北京康泰临床试剂公司。胰岛素放射免疫试剂盒，购自北京中国原子能科学研究院。甘油三酯磷酯酶试剂盒，购自上海荣盛生物技术有限公司。
1.2 主要仪器 可调移液器、恒温水浴箱、大型抽风机、分析天平、等离子体原子发射光谱仪(美国贝尔德，PS-6ICP-AES)等。
1.3 动物饲养 动物模型的建立参照文献 [6，7] :动物在22±2℃的环境中单笼喂养。自由饮水，每天喂颗粒饲料约30g/(kg·d)，分9时和17时两次投放，晚上辅食少量新鲜青饲料。适应性喂养25天后随机分成3组:正常组7只，饲以普通颗粒饲料;对照组9只饲以糖脂饲料;治疗组9只，饲以糖脂饲料135天后，饲加金樱子50g/d、鸡内金27g/d，7时投放，待吃尽后，于上午9点钟和下午5点钟投放糖脂饲料。25天为1个疗程，中间停药1周，共2个疗程。采集血标本:饲糖脂前1次，饲糖脂期3次，治疗期2次。
1.4 检测指标 分阶段取禁食过夜兔耳缘静脉血，酶法测血清中葡萄糖和甘油三酯。放射免疫法测胰岛素。将动物处死后取其胰腺组织，置-30℃冰箱中保存。
1.5 微量元素的检测 用硝酸和高氯酸在烤炉上消化胰腺组织中的有机成分，用10%盐酸溶解其中微量元素。定容后用等离子体原子发射光谱仪检测其中微量元素的含量。
1.6 统计学处理 实验数据经SPSS10.0统计软件t检验，数据以ˉx±s表示，P<0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 血清葡萄糖的测定 饲糖脂饲料前3组血糖均无差异，135天后，对照组及治疗组血糖升高，与正常组比较，P<0.05。血清葡萄糖降低，治疗组与对照组比较，P<0.05，见表1。
表1 血清葡萄糖浓度比较 (略)注:a:与同组的第一次结果比较P<0.05;b:分别与同组的第2、第3、第4次结果比较P<0.05;c:与正常组比较P<0.05;d:与对照组比较P<0.01
2.2 血清甘油三酯的测定 饲糖脂饲料前组血清甘油三酯均无差异，饲糖脂饲料135天后，对照组及治疗组血清甘 油三酯均升高，与正常组比较P<0.05。治疗后血清甘油三酯降低，治疗组与对照组比较P<0.05，见表2。
表2 血清甘油三酯浓度比较 (略)注:a:与同组的第一次结果比较P<0.05;b:分别与同组的第2、第3、第4次结果比较P<0.05;c:与正常组比较P<0.01;d:与对照组比较P<0.05;e:与正常组比较P<0.01
2.3 血清胰岛素(ins)的测定 饲糖脂饲料前及饲糖脂饲料期3组血清胰岛素均无差异。治疗期，对照组及治疗组 血清胰岛素无统计学意义P>0.05，见表3。
表3 各组血INS浓度比较 (略)注:a:饲糖脂期与治疗期组内比较P>0.05;b:治疗组与对照组间比较P>0.05，治疗组与正常组比较P>0.05 2.4 对照组、治疗组和正常组之间微量元素含量的比较 对照组和正常组微量元素的含量比较，P<0.05;治疗组和对照组之间比较，P<0.05;治疗组和正常组之间比较，P>0.05，见表4。
表4 对照组、治疗组和正常组之间元素含量的比较 (略)注:a:与正常组比较P<0.05;b:与对照组比较P<0.05
3 讨论
2型糖尿病的临床表现主要是糖脂代谢紊乱。患者早期有高血脂、胰岛素抵抗和高胰岛素血症，但血浆葡萄糖仍维持正常。中期随着胰岛素抵抗的进一步加剧，血糖利用受阻而逐渐升高，胰腺分泌增加，血中胰岛素越来越高，受体越不敏感，形成一个恶性的循环，这时在病人出现餐后高血糖，检测发现糖耐量受损。而到后期最终出现空腹高血糖，胰小岛分泌功能因为持久的高血糖毒性作用而进一步恶化，最终导致2型糖尿病的发生。而微量元素在参与和维持体内的糖脂代谢方面有着十分重要的作用，2型糖尿病患者常有微量元素代谢紊乱的现象如镍、硒、钒、铬、锌等。补充这些元素可控制血糖、血脂 [8] 锌、镍、硒、钒、铬等在人体新陈代谢及生命活动中起着非常重要的作用。锌元素在体内作为许多酶的辅助因子维持酶的活性;锌影响胰岛素的合成、贮存、分泌以及结构的完整性。缺锌时胰岛β细胞内锌水平降低，胰岛β细胞分泌胰岛素功能降低。三价铬是胰岛素发挥生化作用的辅助因子，在体内缺少三价铬，胰岛素生物活性降低，靶组织对胰岛素效应降低，导致葡萄糖的利用率降低，出现糖的代谢紊乱。而现在有关糖尿病的发病机制有一种新的学说即无机元素学说 [9] ，这种学说也正逐渐被人们所重视。糖尿病是一种内分泌性疾病，其发病的中心环节是胰岛素分泌的不足和胰岛素抵抗。微量元素一方面能影响胰腺的分泌功能或组织胰岛素的敏感性，从而参与糖尿病的发生。另一方面糖尿病患者由于体内代谢异常，也可造成多种微量元素的异常。因此，2型糖尿病的预防和治疗不能忽略微量元素的作用。本研究主要探索金樱子和鸡内金对食饵性高糖高脂兔微量元素钒、铬、镍、硒、锌的变化。金樱子含有3种不同鞣质的化合物，3种不同的甾醇-β-D-吡喃葡萄糖苷四乙酸酯，3种不同甾醇-β-D吡喃葡萄糖苷，β-谷甾醇，胡萝卜素甾醇，金樱皂苷，齐墩果酸及其甲酯衍生物，2种野鸭椿酸衍生物等。鸡内金的有机成分有角蛋白、胃激素水解酶等。均含有微量元素如铁、锌、钙、锰、硒、钒、铬和镍等人体必需的微量元素。金樱子的功用:增加锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性，抗衰老;降低血清胆固醇和β-脂蛋白，减少肝脏、心肌中的脂肪沉积;止尿频，久服可耐寒轻身。金樱子提取液对NO 2- 有很强的清除作用。通过金樱子中有机物质的降血糖血脂作用的同时，补充人体所必需的无机微量元素能够代偿性的维持机体的代谢平衡，对2型糖尿病的预防和治疗有着重要的作用。本研究结果表明:微量元素铬、钒、镍和硒元素在治疗组与对照组比较差异有显著性，对照组与正常组中比较差异有显著性，治疗组与正常组比较差异无显著性，说明高糖高脂动物模型中这4种微量元素低于正常组，给服金樱子后其含量恢复到了正常组水平。而锌元素在治疗组、对照组的含量低于正常组，但治疗组与对照组比较差异并无显著性。本实验结果提示糖脂代谢与钒、铬、硒、镍含量密切相关，与文献报道一致。金樱子与鸡内金合用可改善钒、铬、硒、镍的含量，提高胰岛素的敏感性而改善糖的代谢。金樱子、鸡内金原药的微量元素的组成及含量的差异有待进一步研究。
参考文献
1 宋立人，洪恂，丁绪亮，等.现代中药学大辞典，2001，1330-1332;1139-1140.
2 文香兰，李善花，金英锦，等.葡萄酸铬对试验性糖尿病小鼠胰岛影响的免疫组织化学观察.微量元素与健康研究，2000，17(3):10-11.
3 Watler Mertg.The essential trace elements.Science，1981，213:1335.
4 高迎，陈末名，李广义.金樱子的化学成分研究.中国中药杂志，1993，18(7):426.
5 郭孟萍，陈晓，金文兴.金樱子水煎液中高含量无机元素测定及临床应用意义.江西医学院学报，1998，10(3):132.
6 张秋菊，尹卫东，席守民，等.金樱子和鸡内金对高糖高脂兔中糖、脂和胰岛素的影响.中国动脉硬化杂志，2003，11(3):227-229.
7 王宗保，袁中华，余坚，等.诱发糖尿病饲料致新西兰兔动脉粥样硬化时血糖、血清胰岛素和肝、肾、胰组织结构的变化.中国动脉硬化杂志，2001，9(5):391-393.
8 American diabetes association national institude of diabetes.digestive and kindney disease.The precention or delay of type2diabetes.Diabetes care，2003，26(1):62-68.
9 周美宇，王立平，王玉贵，等.糖尿病的发病与治疗机理探讨.微量元素与健康研究，1999，16(4):29-31.
(编辑黄 杰)
作者单位:421001湖南衡阳南华大学生命科学与技术学院
421001湖南衡阳南华大学第二附属医院, 百拇医药(罗其富 罗玉平 尹卫东 刘四春 张秋菊)
1 材料与方法
1.1 材料 雄性新西兰兔1.5～1.8kg，购自中南大学湘雅医学院动物养殖场。糖脂颗粒饲料，本校动物部配制(蔗糖37%、猪油10%、基础饲料53%) [6] 。加药颗粒饲料配制:先将金樱子于40℃烤干，用中药粉碎机制成粉末，然后制成颗粒饲料。50%葡萄糖、金樱子购自衡阳市中医院药房。硝酸、高氯酸、盐酸试剂均为分析纯。葡萄糖氧化酶试剂盒，购自北京康泰临床试剂公司。胰岛素放射免疫试剂盒，购自北京中国原子能科学研究院。甘油三酯磷酯酶试剂盒，购自上海荣盛生物技术有限公司。
1.2 主要仪器 可调移液器、恒温水浴箱、大型抽风机、分析天平、等离子体原子发射光谱仪(美国贝尔德，PS-6ICP-AES)等。
1.3 动物饲养 动物模型的建立参照文献 [6，7] :动物在22±2℃的环境中单笼喂养。自由饮水，每天喂颗粒饲料约30g/(kg·d)，分9时和17时两次投放，晚上辅食少量新鲜青饲料。适应性喂养25天后随机分成3组:正常组7只，饲以普通颗粒饲料;对照组9只饲以糖脂饲料;治疗组9只，饲以糖脂饲料135天后，饲加金樱子50g/d、鸡内金27g/d，7时投放，待吃尽后，于上午9点钟和下午5点钟投放糖脂饲料。25天为1个疗程，中间停药1周，共2个疗程。采集血标本:饲糖脂前1次，饲糖脂期3次，治疗期2次。
1.4 检测指标 分阶段取禁食过夜兔耳缘静脉血，酶法测血清中葡萄糖和甘油三酯。放射免疫法测胰岛素。将动物处死后取其胰腺组织，置-30℃冰箱中保存。
1.5 微量元素的检测 用硝酸和高氯酸在烤炉上消化胰腺组织中的有机成分，用10%盐酸溶解其中微量元素。定容后用等离子体原子发射光谱仪检测其中微量元素的含量。
1.6 统计学处理 实验数据经SPSS10.0统计软件t检验，数据以ˉx±s表示，P<0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 血清葡萄糖的测定 饲糖脂饲料前3组血糖均无差异，135天后，对照组及治疗组血糖升高，与正常组比较，P<0.05。血清葡萄糖降低，治疗组与对照组比较，P<0.05，见表1。
表1 血清葡萄糖浓度比较 (略)注:a:与同组的第一次结果比较P<0.05;b:分别与同组的第2、第3、第4次结果比较P<0.05;c:与正常组比较P<0.05;d:与对照组比较P<0.01
2.2 血清甘油三酯的测定 饲糖脂饲料前组血清甘油三酯均无差异，饲糖脂饲料135天后，对照组及治疗组血清甘 油三酯均升高，与正常组比较P<0.05。治疗后血清甘油三酯降低，治疗组与对照组比较P<0.05，见表2。
表2 血清甘油三酯浓度比较 (略)注:a:与同组的第一次结果比较P<0.05;b:分别与同组的第2、第3、第4次结果比较P<0.05;c:与正常组比较P<0.01;d:与对照组比较P<0.05;e:与正常组比较P<0.01
2.3 血清胰岛素(ins)的测定 饲糖脂饲料前及饲糖脂饲料期3组血清胰岛素均无差异。治疗期，对照组及治疗组 血清胰岛素无统计学意义P>0.05，见表3。
表3 各组血INS浓度比较 (略)注:a:饲糖脂期与治疗期组内比较P>0.05;b:治疗组与对照组间比较P>0.05，治疗组与正常组比较P>0.05 2.4 对照组、治疗组和正常组之间微量元素含量的比较 对照组和正常组微量元素的含量比较，P<0.05;治疗组和对照组之间比较，P<0.05;治疗组和正常组之间比较，P>0.05，见表4。
表4 对照组、治疗组和正常组之间元素含量的比较 (略)注:a:与正常组比较P<0.05;b:与对照组比较P<0.05
3 讨论
2型糖尿病的临床表现主要是糖脂代谢紊乱。患者早期有高血脂、胰岛素抵抗和高胰岛素血症，但血浆葡萄糖仍维持正常。中期随着胰岛素抵抗的进一步加剧，血糖利用受阻而逐渐升高，胰腺分泌增加，血中胰岛素越来越高，受体越不敏感，形成一个恶性的循环，这时在病人出现餐后高血糖，检测发现糖耐量受损。而到后期最终出现空腹高血糖，胰小岛分泌功能因为持久的高血糖毒性作用而进一步恶化，最终导致2型糖尿病的发生。而微量元素在参与和维持体内的糖脂代谢方面有着十分重要的作用，2型糖尿病患者常有微量元素代谢紊乱的现象如镍、硒、钒、铬、锌等。补充这些元素可控制血糖、血脂 [8] 锌、镍、硒、钒、铬等在人体新陈代谢及生命活动中起着非常重要的作用。锌元素在体内作为许多酶的辅助因子维持酶的活性;锌影响胰岛素的合成、贮存、分泌以及结构的完整性。缺锌时胰岛β细胞内锌水平降低，胰岛β细胞分泌胰岛素功能降低。三价铬是胰岛素发挥生化作用的辅助因子，在体内缺少三价铬，胰岛素生物活性降低，靶组织对胰岛素效应降低，导致葡萄糖的利用率降低，出现糖的代谢紊乱。而现在有关糖尿病的发病机制有一种新的学说即无机元素学说 [9] ，这种学说也正逐渐被人们所重视。糖尿病是一种内分泌性疾病，其发病的中心环节是胰岛素分泌的不足和胰岛素抵抗。微量元素一方面能影响胰腺的分泌功能或组织胰岛素的敏感性，从而参与糖尿病的发生。另一方面糖尿病患者由于体内代谢异常，也可造成多种微量元素的异常。因此，2型糖尿病的预防和治疗不能忽略微量元素的作用。本研究主要探索金樱子和鸡内金对食饵性高糖高脂兔微量元素钒、铬、镍、硒、锌的变化。金樱子含有3种不同鞣质的化合物，3种不同的甾醇-β-D-吡喃葡萄糖苷四乙酸酯，3种不同甾醇-β-D吡喃葡萄糖苷，β-谷甾醇，胡萝卜素甾醇，金樱皂苷，齐墩果酸及其甲酯衍生物，2种野鸭椿酸衍生物等。鸡内金的有机成分有角蛋白、胃激素水解酶等。均含有微量元素如铁、锌、钙、锰、硒、钒、铬和镍等人体必需的微量元素。金樱子的功用:增加锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性，抗衰老;降低血清胆固醇和β-脂蛋白，减少肝脏、心肌中的脂肪沉积;止尿频，久服可耐寒轻身。金樱子提取液对NO 2- 有很强的清除作用。通过金樱子中有机物质的降血糖血脂作用的同时，补充人体所必需的无机微量元素能够代偿性的维持机体的代谢平衡，对2型糖尿病的预防和治疗有着重要的作用。本研究结果表明:微量元素铬、钒、镍和硒元素在治疗组与对照组比较差异有显著性，对照组与正常组中比较差异有显著性，治疗组与正常组比较差异无显著性，说明高糖高脂动物模型中这4种微量元素低于正常组，给服金樱子后其含量恢复到了正常组水平。而锌元素在治疗组、对照组的含量低于正常组，但治疗组与对照组比较差异并无显著性。本实验结果提示糖脂代谢与钒、铬、硒、镍含量密切相关，与文献报道一致。金樱子与鸡内金合用可改善钒、铬、硒、镍的含量，提高胰岛素的敏感性而改善糖的代谢。金樱子、鸡内金原药的微量元素的组成及含量的差异有待进一步研究。
参考文献
1 宋立人，洪恂，丁绪亮，等.现代中药学大辞典，2001，1330-1332;1139-1140.
2 文香兰，李善花，金英锦，等.葡萄酸铬对试验性糖尿病小鼠胰岛影响的免疫组织化学观察.微量元素与健康研究，2000，17(3):10-11.
3 Watler Mertg.The essential trace elements.Science，1981，213:1335.
4 高迎，陈末名，李广义.金樱子的化学成分研究.中国中药杂志，1993，18(7):426.
5 郭孟萍，陈晓，金文兴.金樱子水煎液中高含量无机元素测定及临床应用意义.江西医学院学报，1998，10(3):132.
6 张秋菊，尹卫东，席守民，等.金樱子和鸡内金对高糖高脂兔中糖、脂和胰岛素的影响.中国动脉硬化杂志，2003，11(3):227-229.
7 王宗保，袁中华，余坚，等.诱发糖尿病饲料致新西兰兔动脉粥样硬化时血糖、血清胰岛素和肝、肾、胰组织结构的变化.中国动脉硬化杂志，2001，9(5):391-393.
8 American diabetes association national institude of diabetes.digestive and kindney disease.The precention or delay of type2diabetes.Diabetes care，2003，26(1):62-68.
9 周美宇，王立平，王玉贵，等.糖尿病的发病与治疗机理探讨.微量元素与健康研究，1999，16(4):29-31.
(编辑黄 杰)
作者单位:421001湖南衡阳南华大学生命科学与技术学院
421001湖南衡阳南华大学第二附属医院, 百拇医药(罗其富 罗玉平 尹卫东 刘四春 张秋菊)
参见：首页 > 中医药 > 中药专业 > 中草药汇编 > 中药大典 > 动物类 > 鸡内金