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编号:10627072
蛋白质芯片技术
http://www.100md.com 《中华实用医药杂志》 2005年第8期
蛋白质,蛋白质芯片,SELDI-TOF-MS,生物检测技术,1蛋白质芯片的分类及基本构成,2蛋白质芯片的应用,3蛋白质芯片的问题和应用前景,参考文献
     【摘要】 蛋白质芯片是近年来发展起来的新的生物检测技术,本文综述了该技术的发展情况及从其分类、构成到应用,并重点介绍了SELDI-TOF-MS这一技术。最后阐述了蛋白质芯片的前景及存在不足。

    【关键词】 蛋白质芯片 SELDI-TOF-MS 生物检测技术

    人类基因组计划已经进入后基因组时代(post genome era)—功能基因组时代,而作为基因功能的直接体现者-蛋白质及其之间的相互作用越来越引起科学家们的关注,因为要彻底了解生命的本质,就必须要了解蛋白质在生物生长、发育、衰老整个生命过程中的功能、不同蛋白质之间的相互作用以及它们与发生、发展和转化的规律,从而诞生了一门新的学科———蛋白质组学 [1] (Proteomics)。蛋白质芯片技术则是继基因芯片之后发展起来的生物检验技术,它高度并行性、高通量、微型化和自动化的特点成为研究蛋白质组学的有力工具。它的出现对于生物学、临床检验医学、遗传学、药理学等很多学科的进步具有很大的意义。

     1 蛋白质芯片的分类及基本构成

    1.1 蛋白质芯片的分类 蛋白质芯片又称蛋白质微阵列,属于生物芯片的一种,根据制作方法和应用的不同将蛋白质芯片分为两种:一种是蛋白质检测芯片,类似于较早出现的基因芯片,即在固相支持物表面高度密集排列的探针蛋白点阵,当待测靶蛋白与其反应时,可特异性的捕获样品中的靶蛋白,然后通过检测系统进行分析,如表面增强激光解析离子化—飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)将靶蛋白离子化,直接对其进行定性、定量分析 [2] ;第二种是蛋白质功能芯片,本质说就是微行化凝胶电泳板,即样品中的待测蛋白在电场作用下通过芯片上的微孔道进行分离,然后经喷射进入质谱仪中来检测待测蛋白质 [3] 。目前应用较多的是第一种芯片。

    1.2 探针蛋白的制备 蛋白质检测芯片上的探针蛋白可根据研究目的的不同,选用抗体、抗原、受体、酶等具有生物活性的蛋白质。由于具有高度的特异性和亲和性,单克隆抗体是比较好的一种探针蛋白,用其构筑的芯片可用于检测蛋白质表达丰度及确定新的蛋白质。基因工程抗体的发展使蛋白质芯片的提出和发展成为可能 [4] 。噬菌体抗体库技术就是典型的代表。也可以利用其它的蛋白质文库制备探针蛋白,如全合成人重组抗体库、噬菌体肽库、噬菌体表达文库等。经蛋白质组技术如双相凝胶电泳技术分离得到的蛋白质作为抗原,把固相化的抗原与抗体库孵育,即可得到相应的单克隆抗体。

    1.3 芯片的制备 因为蛋白质要比DNA难合成,更难于在固相支持物表面合成 ......

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