OVA257-264肽-β2m融合基因的构建及体内特异性CTL的诱导
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钱丽；钱关祥
参见附件(98kb)。
钱丽；钱关祥 上海第二医科大学分子生物学实验中心 上海200025 细胞与分子免疫学杂志 2002 5
关键词：四聚体；表达；纯化；特异性CTL
目的 构建融合基因OVA2 57 2 64 β2m的表达载体 ,并以其表达产物作为免疫原 ,在体内诱导特异性CTL。方法 采用PCR技术 ,从人肝癌细胞株SMMC 772 1中克隆人β2m基因 ,拼接上OVA(2 5 7～ 2 6 4)序列及linker后 ,克隆入pET 42b(+)高效表达载体进行诱导表达。对表达产物进行纯化与复性后 ,用其作为免疫原诱导特异性CTL ,并构建H 2Kb OVA四聚体检测特异性CTL。结果 成功地获得融合蛋白OVA2 57 2 64 β 2m及H 2Kb OVA四聚体 ,应用H 2Kb OVA四聚体对特异性CTL检测结果与经典的细胞毒试验一致。结论 OVA2 57 2 64 β 2m的表达产物 ,可有效的在体内诱导.
关键词：四聚体；表达；纯化；特异性CTL
目的 构建融合基因OVA2 57 2 64 β2m的表达载体 ,并以其表达产物作为免疫原 ,在体内诱导特异性CTL。方法 采用PCR技术 ,从人肝癌细胞株SMMC 772 1中克隆人β2m基因 ,拼接上OVA(2 5 7～ 2 6 4)序列及linker后 ,克隆入pET 42b(+)高效表达载体进行诱导表达。对表达产物进行纯化与复性后 ,用其作为免疫原诱导特异性CTL ,并构建H 2Kb OVA四聚体检测特异性CTL。结果 成功地获得融合蛋白OVA2 57 2 64 β 2m及H 2Kb OVA四聚体 ,应用H 2Kb OVA四聚体对特异性CTL检测结果与经典的细胞毒试验一致。结论 OVA2 57 2 64 β 2m的表达产物 ,可有效的在体内诱导.
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