抗甲型肝炎病毒抗体Fab在大肠杆菌中的表达
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于长明;宋宏彬;杜桂鑫;徐静;徐志凯;王海涛
甲型肝炎病毒|Fab|基因表达,关键词:
参见附件。
于长明;宋宏彬;杜桂鑫;徐静;徐志凯;王海涛 军事医学科学院微生物流行病学研究所 北京 100071 免疫学杂志 2002 2
关键词:甲型肝炎病毒;Fab;基因表达
目的在大肠杆菌中高效表达人源抗HAV抗体Fab,为进一步研究该抗体的功能奠定基础。方法依次将抗HAV抗体的Fd及轻链基因克隆到表达载体pASK84的不同信号序列下,构建成Fab表达质粒,在大肠杆菌JM83中进行表达,并对表达产物进行复性。用SDS-PAGE、western blot和ELISA法检测Fab的表达及其与甲肝病毒抗原的结合活性。结果 构建了抗HAV Fab的重组表达质粒p84Fab,在大肠杆菌JM83中获得表达,表达的Fab占全菌的25%,主要以包涵体形式存在,复性后具有抗原结合活性;培养基、菌体可溶性蛋白部分也能检测到有抗原结合活性的Fab。 结论抗HAV抗体Fab在大肠杆菌.
关键词:甲型肝炎病毒;Fab;基因表达
目的在大肠杆菌中高效表达人源抗HAV抗体Fab,为进一步研究该抗体的功能奠定基础。方法依次将抗HAV抗体的Fd及轻链基因克隆到表达载体pASK84的不同信号序列下,构建成Fab表达质粒,在大肠杆菌JM83中进行表达,并对表达产物进行复性。用SDS-PAGE、western blot和ELISA法检测Fab的表达及其与甲肝病毒抗原的结合活性。结果 构建了抗HAV Fab的重组表达质粒p84Fab,在大肠杆菌JM83中获得表达,表达的Fab占全菌的25%,主要以包涵体形式存在,复性后具有抗原结合活性;培养基、菌体可溶性蛋白部分也能检测到有抗原结合活性的Fab。 结论抗HAV抗体Fab在大肠杆菌.
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