TGF-βRⅡ/Fc融合蛋白的纯化及其生物学活性鉴定
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李圣青；李焕章；杨乔欣；倪殿涛
转化生长因子-β|肺间质纤维化|融合蛋白,关键词：
参见附件(65kb)。
李圣青；李焕章；杨乔欣；倪殿涛 第四军医大学基础部微生物学教研室；第四军医大学西京医院呼吸内科 陕西西安710032 细胞与分子免疫学杂志 2003 4
关键词：转化生长因子-β；肺间质纤维化；融合蛋白
目的:用重组Bac TRⅡ杆状病毒表达系统大量表达融合蛋白TGF βRⅡ/Fc,并对其进行纯化及鉴定;验证该融合蛋白是否能够阻断细胞因子TGF β1的生物学作用。方法:采用病毒空斑形成试验测定病毒滴度,并对其进行扩增。采用Pro teinG柱和快速蛋白质液相层析法(FPLC)纯化目的蛋白。采用SDS PAGE分析纯化后的目的蛋白,并将蛋白电泳条带进行灰度扫描,计算目的蛋白的含量。采用Westernblot和夹心ELISA法,鉴定目的蛋白是否表达。采用MTT比色法,验证融合蛋白TGF βRⅡ/Fc能否阻断TGF β1对小鼠肺成纤维细胞(L92 9)生长的作用。采用Westernblot技术,验证融合蛋白能否...
关键词：转化生长因子-β；肺间质纤维化；融合蛋白
目的:用重组Bac TRⅡ杆状病毒表达系统大量表达融合蛋白TGF βRⅡ/Fc,并对其进行纯化及鉴定;验证该融合蛋白是否能够阻断细胞因子TGF β1的生物学作用。方法:采用病毒空斑形成试验测定病毒滴度,并对其进行扩增。采用Pro teinG柱和快速蛋白质液相层析法(FPLC)纯化目的蛋白。采用SDS PAGE分析纯化后的目的蛋白,并将蛋白电泳条带进行灰度扫描,计算目的蛋白的含量。采用Westernblot和夹心ELISA法,鉴定目的蛋白是否表达。采用MTT比色法,验证融合蛋白TGF βRⅡ/Fc能否阻断TGF β1对小鼠肺成纤维细胞(L92 9)生长的作用。采用Westernblot技术,验证融合蛋白能否...
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