改良PCR-ELISA的建立及初步应用
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郭晏海；张菊；崔大祥；赵锦荣；闫小君
聚合酶链反应|酶联免疫吸附分析|液相杂交,关键词：
参见附件(35kb)。
郭晏海；张菊；崔大祥；赵锦荣；闫小君 第四军医大学全军基因诊断技术研究所 西安710033 临床检验杂志 2002 4
关键词：聚合酶链反应；酶联免疫吸附分析；液相杂交
目的 建立操作简单、灵敏、特异的PCR -ELISA。方法 采用短DNA片段扩增 ,其中上游引物 5′端标记有生物素 ,使PCR扩增产物的一条链上带有生物素 ,随着PCR反应的结束 ,PCR反应液中的地高辛标记的探针与PCR产物中的生物素标记的DNA链杂交 ,形成杂交产物 ,然后杂交产物通过生物素与微孔板上固定的链霉亲合素结合 ,被固定在微孔板上 ,最后用ELISA检测被固定的杂交产物。结果 该方法可以检测出 1× 10 1拷贝的HBVDNA模板 ,对 10 0例乙型肝炎患者的血清进行检测 ,HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清 10 0 %(30 /30 )检出HBVDNA ;HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HB ...
关键词：聚合酶链反应；酶联免疫吸附分析；液相杂交
目的 建立操作简单、灵敏、特异的PCR -ELISA。方法 采用短DNA片段扩增 ,其中上游引物 5′端标记有生物素 ,使PCR扩增产物的一条链上带有生物素 ,随着PCR反应的结束 ,PCR反应液中的地高辛标记的探针与PCR产物中的生物素标记的DNA链杂交 ,形成杂交产物 ,然后杂交产物通过生物素与微孔板上固定的链霉亲合素结合 ,被固定在微孔板上 ,最后用ELISA检测被固定的杂交产物。结果 该方法可以检测出 1× 10 1拷贝的HBVDNA模板 ,对 10 0例乙型肝炎患者的血清进行检测 ,HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清 10 0 %(30 /30 )检出HBVDNA ;HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HB ...
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