人淋巴细胞抑制素基因克隆与表达的研究
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袁小澎;邹全明;鲁东水;朱永红;张卫军
人SPN|RT-PCR|基因克隆|序列分析|原核表达,关键词:
参见附件。
袁小澎;邹全明;鲁东水;朱永红;张卫军 第三军医大学临床微生物学教研室;河南洛阳534医院检验科 河南 洛阳471003 免疫学杂志 2002 3
关键词:人SPN;RT-PCR;基因克隆;序列分析;原核表达
目的 获得人SPN基因,构建SPN的原核表达载体。方法 采用RT-PCR的方法从激活的人外周血淋巴细胞的总cDNA中得到1493bp的人SPN基因,NdeI、BamHI双酶切后定向克隆到原核表达载体pET-11-c中,全自动测序仪测序,转化宿主菌BL21后,IPTG诱导,SDS-PAGE电泳分析。结果 成功克隆到人SPN基因,并构建表达质粒,SDS-PAGE电泳证实目的蛋白表达。结论 为进一步研究SPN的免疫抑制机理和作用以及探讨SPN作为新型生理性免疫抑制剂的可能性打下了坚实的基础。
关键词:人SPN;RT-PCR;基因克隆;序列分析;原核表达
目的 获得人SPN基因,构建SPN的原核表达载体。方法 采用RT-PCR的方法从激活的人外周血淋巴细胞的总cDNA中得到1493bp的人SPN基因,NdeI、BamHI双酶切后定向克隆到原核表达载体pET-11-c中,全自动测序仪测序,转化宿主菌BL21后,IPTG诱导,SDS-PAGE电泳分析。结果 成功克隆到人SPN基因,并构建表达质粒,SDS-PAGE电泳证实目的蛋白表达。结论 为进一步研究SPN的免疫抑制机理和作用以及探讨SPN作为新型生理性免疫抑制剂的可能性打下了坚实的基础。
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