人PDGF-A基因的克隆、表达及表达产物的纯化
http://www.100md.com
费玲玲；张萍；黄文晋；陈镔复；鞠躬
PDGFA|克隆|表达|纯化,关键词：
参见附件(49kb)。
费玲玲；张萍；黄文晋；陈镔复；鞠躬 第四军医大学基础部神经科学研究所 陕西西安710032 细胞与分子免疫学杂志 2002 4
关键词：PDGFA；克隆；表达；纯化
目的 克隆血小板衍生的生长因子A链 (PDGF A)的基因 ,并在大肠杆菌中表达。方法 利用RT PCR法 ,从人肝癌细胞系 (HHCC)的总RNA中 ,扩增PDGF A的全长cD NA ,再用PCR法扩增PDGF A成熟蛋白的全长编码序列。编码序列经测序验证后 ,克隆入表达载体pGEX 4T 1中 ,构建PDGF A的原核表达载体 ,在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白 ,并进行谷胱甘肽 (GST)亲和层析纯化。结果 以RT PCR扩增的PDGF A基因的全长为 12 5 5bp ,以PCR扩增得到其成熟蛋白的编码序列为 5 31bp。构建了PDGF A基因的原核高效表达载体pGEX PDGF A ,表达产物主要位于包涵体内。对包涵体蛋白进行变...
关键词：PDGFA；克隆；表达；纯化
目的 克隆血小板衍生的生长因子A链 (PDGF A)的基因 ,并在大肠杆菌中表达。方法 利用RT PCR法 ,从人肝癌细胞系 (HHCC)的总RNA中 ,扩增PDGF A的全长cD NA ,再用PCR法扩增PDGF A成熟蛋白的全长编码序列。编码序列经测序验证后 ,克隆入表达载体pGEX 4T 1中 ,构建PDGF A的原核表达载体 ,在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白 ,并进行谷胱甘肽 (GST)亲和层析纯化。结果 以RT PCR扩增的PDGF A基因的全长为 12 5 5bp ,以PCR扩增得到其成熟蛋白的编码序列为 5 31bp。构建了PDGF A基因的原核高效表达载体pGEX PDGF A ,表达产物主要位于包涵体内。对包涵体蛋白进行变...
您现在查看是摘要介绍页，详见CAJ附件(49kb)。