逆转录病毒介导的人CNTF在嗅神经鞘细胞中的表达及其对神经细胞存活和突起生长的影响
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杨浩；金卫林；范明；游思维；鞠躬
睫状神经营养因子|逆转录病毒载体|嗅神经鞘细胞|神经网膜节细胞|背根神经节|细胞培养,关键词：
参见附件(160kb)。
杨浩；金卫林；范明；游思维；鞠躬 军事医学科学院基础医学研究所 北京100850；第四军医大学神经科学研究 西安710032 解剖学报 2003 4
关键词：睫状神经营养因子；逆转录病毒载体；嗅神经鞘细胞；神经网膜节细胞；背根神经节；细胞培养
目的 研究含有睫状神经营养因子(CNTF)表达调控系统修饰的嗅神经鞘细胞(OECs)对神经细胞存活和突起生长的影响。 方法 通过基因克隆,用KpnⅠ+XbaⅠ将pcDNA3 S(NGF信号肽) hCNTF质粒中含有NGF信号肽的CNTF切下,插入逆转录病毒表达载体pRev TRE中。酶切鉴定后,将其与本系统的调控质粒pRev Tet On转入Ecopack 2 93细胞进行病毒包装,制备重组缺陷型hCNTF和Tet On逆转录病毒感染原代培养的大鼠OECs,用不同浓度的强力霉素诱导,以Western blot法对hCNTF的表达培养上清进行检测。将转染hCNTF的OECs与新生2d大鼠DRG联合培养,用其上清培养视网膜节细胞(RGCs) ...
关键词：睫状神经营养因子；逆转录病毒载体；嗅神经鞘细胞；神经网膜节细胞；背根神经节；细胞培养
目的 研究含有睫状神经营养因子(CNTF)表达调控系统修饰的嗅神经鞘细胞(OECs)对神经细胞存活和突起生长的影响。 方法 通过基因克隆,用KpnⅠ+XbaⅠ将pcDNA3 S(NGF信号肽) hCNTF质粒中含有NGF信号肽的CNTF切下,插入逆转录病毒表达载体pRev TRE中。酶切鉴定后,将其与本系统的调控质粒pRev Tet On转入Ecopack 2 93细胞进行病毒包装,制备重组缺陷型hCNTF和Tet On逆转录病毒感染原代培养的大鼠OECs,用不同浓度的强力霉素诱导,以Western blot法对hCNTF的表达培养上清进行检测。将转染hCNTF的OECs与新生2d大鼠DRG联合培养,用其上清培养视网膜节细胞(RGCs) ...
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