人三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ基因的克隆与表达
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苏玉金；江小华；姜重建；张宇新；杨秋慧；徐群渊；杨慧
三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ|RT-PCR|原位杂交|人胚肝脏,关键词：
参见附件(86kb)。
苏玉金；江小华；姜重建；张宇新；杨秋慧；徐群渊；杨慧 首都医科大学北京神经科学研究所 北京市神经再生修复重点实验室 北京100054；北京市神经再生修复重点实验室 解剖学报 2003 4
关键词：三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ；RT-PCR；原位杂交；人胚肝脏
目的 研究人三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ(GCHⅠ)基因在多巴胺代谢过程中的作用。 方法 从人胚胎肝脏中提取总RNA ,以RT PCR法扩增GCHⅠcDNA ,克隆于PGEM T easy载体中,测序正确后再构建真核表达载体,转染猴肾成纤维细胞系COS7,原位杂交检测其表达。 结果 RT PCR扩增出90 4bp的cDNA ,并成功构建真核表达载体pCI neo GCHⅠ,原位杂交证实其在COS7表达阳性率为70 %～80 %。 结论 GCHⅠ有望用于帕金森病的基因治疗。
关键词：三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ；RT-PCR；原位杂交；人胚肝脏
目的 研究人三磷酸鸟苷酸环化水解酶Ⅰ(GCHⅠ)基因在多巴胺代谢过程中的作用。 方法 从人胚胎肝脏中提取总RNA ,以RT PCR法扩增GCHⅠcDNA ,克隆于PGEM T easy载体中,测序正确后再构建真核表达载体,转染猴肾成纤维细胞系COS7,原位杂交检测其表达。 结果 RT PCR扩增出90 4bp的cDNA ,并成功构建真核表达载体pCI neo GCHⅠ,原位杂交证实其在COS7表达阳性率为70 %～80 %。 结论 GCHⅠ有望用于帕金森病的基因治疗。
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