用磁捕法快速分离HCV-mRNA
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刘永章；胡操寒；金龙金
磁捕法|HCV-mRNA|聚合酶链反应,关键词：
参见附件(18kb)。
刘永章；胡操寒；金龙金 温州医学院生物学教研室；浙江温州325027；温州市一一八医院肝病科；浙江温州325000 温州医学院学报 2001 2
关键词：磁捕法；HCV-mRNA；聚合酶链反应
目的 :寻找一种操作简便、快速、敏感性高、重复性好且特异性强的RNA分离纯化方法。方法 :磁捕法是用亲和素包被的磁珠交联带有生物素标记的丙型肝炎病毒 (HCV)寡核苷酸探针 ,与血清HCV mRNA(以异硫氰酸胍作裂解液 )特异性结合 ,经洗涤分离纯化HCV mRNA模板 ,作逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR) ,用于检测HCV患者血清。并用蛋白酶K消化法作对照。结果 :磁捕法检测抗 HCV阳性肝病患者血清5 0例 ,HCV RNA阳性 34例 (6 8% ) ,对 34例阳性标本 ,用蛋白酶K消化法提取HCV mRNA检测HCV ,结果HCVRNA阳性仅 2 8例。结论 :磁捕法分离HCV mRNA具有操作简便、快速、重复性好等优点。
关键词：磁捕法；HCV-mRNA；聚合酶链反应
目的 :寻找一种操作简便、快速、敏感性高、重复性好且特异性强的RNA分离纯化方法。方法 :磁捕法是用亲和素包被的磁珠交联带有生物素标记的丙型肝炎病毒 (HCV)寡核苷酸探针 ,与血清HCV mRNA(以异硫氰酸胍作裂解液 )特异性结合 ,经洗涤分离纯化HCV mRNA模板 ,作逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR) ,用于检测HCV患者血清。并用蛋白酶K消化法作对照。结果 :磁捕法检测抗 HCV阳性肝病患者血清5 0例 ,HCV RNA阳性 34例 (6 8% ) ,对 34例阳性标本 ,用蛋白酶K消化法提取HCV mRNA检测HCV ,结果HCVRNA阳性仅 2 8例。结论 :磁捕法分离HCV mRNA具有操作简便、快速、重复性好等优点。
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