人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达和活性检测
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岳凤鸣；赵焕英；杨慧；高福禄；徐群渊
人胰岛素样生长因子Ⅰ|克隆|表达|生物活性,关键词：
参见附件(102kb)。
岳凤鸣；赵焕英；杨慧；高福禄；徐群渊 河北医科大学组织学胚胎学教研室 石家庄050017；首都医科大学北京神经科学研究所 北京100054；承德医学院 承德067000 解剖学报 2003 3
关键词：人胰岛素样生长因子Ⅰ；克隆；表达；生物活性
目的 克隆人胰岛素样生长因子Ⅰ型(hIGF 1) ,构建真核表达载体并进行表达及活性检测,为IGF 1基因治疗糖尿病奠定基础。 方法 提取胎儿肝脏总RNA ,RT PCR法扩增IGF 1cDNA片段,重组于pUCM T载体,测序正确后构建表达载体,转染猴肾成纤维细胞系COS 7,用原位杂交和免疫组织化学检测表达,收集培养上清以胰岛素刺激释放实验进行活性测定。 结果 扩增得到710bp带有Kozak序列的IGF 1cDNA片段;成功构建了真核表达载体pCI neo hIGF 1;IGF 1在COS 7细胞得到了表达,并具有刺激胰岛素分泌的活性。 结论 新构建的载体pCI neo hIGF 1能在COS 7细胞中表达、分泌, ...
关键词：人胰岛素样生长因子Ⅰ；克隆；表达；生物活性
目的 克隆人胰岛素样生长因子Ⅰ型(hIGF 1) ,构建真核表达载体并进行表达及活性检测,为IGF 1基因治疗糖尿病奠定基础。 方法 提取胎儿肝脏总RNA ,RT PCR法扩增IGF 1cDNA片段,重组于pUCM T载体,测序正确后构建表达载体,转染猴肾成纤维细胞系COS 7,用原位杂交和免疫组织化学检测表达,收集培养上清以胰岛素刺激释放实验进行活性测定。 结果 扩增得到710bp带有Kozak序列的IGF 1cDNA片段;成功构建了真核表达载体pCI neo hIGF 1;IGF 1在COS 7细胞得到了表达,并具有刺激胰岛素分泌的活性。 结论 新构建的载体pCI neo hIGF 1能在COS 7细胞中表达、分泌, ...
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