抗汉坦病毒糖蛋白细胞内抗体的构建和稳定表达
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王涛；李建东；李川；梁米芳；李德新
汉坦病毒|糖蛋白|抗体|单链|表达,关键词：
参见附件(102kb)。
王涛；李建东；李川；梁米芳；李德新 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所出血热虫媒病毒室 100052北京 中华实验和临床病毒学杂志 2003 2
关键词：汉坦病毒；糖蛋白；抗体；单链；表达
目的 在内质网和细胞质内表达抗汉坦病毒糖蛋白G1,G2细胞内抗体。方法 PCR分别扩增抗汉坦病毒糖蛋白抗体VH和VL段基因,克隆入单链抗体表达载体pOPE 10 1 2 15 (Yol) ,转化大肠埃希菌XLI Blue ,IPTG诱导表达并鉴定其活性,再将单链抗体基因克隆入真核表达载体pEF myc ER和pEF myc CYTO ,转染VeroE6 ,使单链抗体在内质网和细胞质内得到表达;通过G4 18和有限稀释法筛选阳性克隆,建立稳定表达抗汉坦病毒糖蛋白细胞内抗体的细胞系。结果 Western blot检测证实原核表达单链抗体,ELISA ,IFA检测其具有抗原结合活性,真核表达显示内质网和细胞质内特异性荧光...
关键词：汉坦病毒；糖蛋白；抗体；单链；表达
目的 在内质网和细胞质内表达抗汉坦病毒糖蛋白G1,G2细胞内抗体。方法 PCR分别扩增抗汉坦病毒糖蛋白抗体VH和VL段基因,克隆入单链抗体表达载体pOPE 10 1 2 15 (Yol) ,转化大肠埃希菌XLI Blue ,IPTG诱导表达并鉴定其活性,再将单链抗体基因克隆入真核表达载体pEF myc ER和pEF myc CYTO ,转染VeroE6 ,使单链抗体在内质网和细胞质内得到表达;通过G4 18和有限稀释法筛选阳性克隆,建立稳定表达抗汉坦病毒糖蛋白细胞内抗体的细胞系。结果 Western blot检测证实原核表达单链抗体,ELISA ,IFA检测其具有抗原结合活性,真核表达显示内质网和细胞质内特异性荧光...
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