肾癌抑制性消减杂交文库的构建及意义
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艾军魁；陈琳；黄啸；张勇；张强；果宏峰；梁丽莉；那彦群；张志文；郭应禄
肾肿瘤|癌|基因|杂交|文库,关键词：
参见附件(55kb)。
艾军魁；陈琳；黄啸；张勇；张强；果宏峰；梁丽莉；那彦群；张志文；郭应禄 北京大学第一医院泌尿外科北京大学泌尿外科研究所 中华泌尿外科杂志 2002 9
关键词：肾肿瘤；癌；基因；杂交；文库
目的 应用抑制性消减杂交技术构建人肾癌组织与正常肾组织间差异表达的cDNA组成的消减文库。 方法 分别从肾癌组织和正常肾组织提取polyA+ RNA ,合成双链cDNA ,经RsaI酶切后将肾癌cDNA分为两组并加上不同的DNA接头 ,再与过量正常肾组织cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR ,PCR产物与T/A载体连接并转化大肠杆菌构建成cDNA消减文库 ,文库扩增后随机挑取克隆进行酶切、测序及同源性分析。 结果 文库共包含 4 14个阳性克隆 ,随机挑取 2 6 5个阳性克隆提取质粒并酶切分析 ,其中 2 4 6个克隆有插入片段。将其中 4 0个克隆进行测序 ,表明 1个克隆为新基...
关键词：肾肿瘤；癌；基因；杂交；文库
目的 应用抑制性消减杂交技术构建人肾癌组织与正常肾组织间差异表达的cDNA组成的消减文库。 方法 分别从肾癌组织和正常肾组织提取polyA+ RNA ,合成双链cDNA ,经RsaI酶切后将肾癌cDNA分为两组并加上不同的DNA接头 ,再与过量正常肾组织cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR ,PCR产物与T/A载体连接并转化大肠杆菌构建成cDNA消减文库 ,文库扩增后随机挑取克隆进行酶切、测序及同源性分析。 结果 文库共包含 4 14个阳性克隆 ,随机挑取 2 6 5个阳性克隆提取质粒并酶切分析 ,其中 2 4 6个克隆有插入片段。将其中 4 0个克隆进行测序 ,表明 1个克隆为新基...
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